一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法技术

本发明专利技术属于体外受精技术领域，具体的说是一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法，该方法包括以下步骤：S1、针对DSOF液进行保存液的配置；S1.1、配制浓度为0.0083g/mL的MgSO4，1mL分装，于‑20℃中冻存；S1.2、配制浓度为0.0301g/mL的CaCL2·2H2O，1mL分装，于‑20℃中冻存；S1.3、配制浓度为0.0036g/mL的丙酮酸(pyruvate)，1mL分装，于‑20℃中冻存；S1.4、配制浓度为0.0292g/mL的谷氨酰胺(L‑Glutamine)，1mL分装，于‑20℃中冻存；通过对改良后的DSOF液进行了进一步的优化研究，最终形成了优化DSOF液，相较于改良DSOF液，本优化DSOF液比原始配方DSOF液更加简洁，大大缩短了配液程序及对节省了试剂开支，同时增加了在体外受精18h精子活率，使得梅花鹿的体外受精卵至少可发育到桑葚胚阶段，卵裂率也提高到了50％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于体外受精，具体的说是一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法。

技术介绍

1、鹿是偶蹄目鹿科的哺乳动物，在我国的东北地区是主要的养鹿区域，也是当地十分重要的农业经济，目前可用于鹿(主要指梅花鹿和马鹿)体外胚胎生产的受精液主要有talp液、sof液和dsof液三种；其中dsof液是鹿专用体外受精液，是通过对马鹿受精过程中输卵管液的分析而得出的，其在鹿的体外胚胎生产上效果要远好于talp液和sof液，由于该液的原始配方由于所用的氨基酸均为单独的氨基酸，较为分散，配液过程十分繁琐。

2、在后续的研究中人们对其进行了改良，改良后的dsof液用包含了多种非必须氨基酸的mem neaas液和多种必须氨基酸的bme aas液对原始配方中的多种单独氨基酸进行了替换，进而优化了配液程序；改良后的dsof液同时提高了丙酮酸的含量，并用肝素替换了20％绵羊血清作为精子的获能因子。

3、在使用中，上述改良后的dsof液对我国繁殖季节梅花鹿进行了体外胚胎生产试验，结果受精卵仅发育到2-cell阶段便停滞了，卵裂率也仅为22％(2/9)。而相比之下，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法，其特征在于：所述该优化DSOF液继续用MEM NEAAs液和BME AAs液替代了多种单独氨基酸，比原始配方更加简洁，大大缩短了配液程序及对节省了试剂开支；所述该优化DSOF液在上述改良DSOF液的基础上继续用20％绵羊血清作为精子的获能因子，使用20％绵羊血清作为获能因子后可用于我国鹿的体外胚胎生产，梅花鹿的体外受精卵至少可发育到桑葚胚阶段，卵裂率也提高到了50％以上；所述该优化DSOF液提高了亚牛磺酸浓度到20μg/ml，比原始配方、上...

【技术特征摘要】

1.一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种优化的鹿专用体外受精液的配制方法，其特征在于：所述该优化dsof液继续用mem neaas液和bme aas液替代了多种单独氨基酸，比原始配方更加简洁，大大缩短了配液程序及对节省了试剂开支；所述该优化dsof液在上述改良dsof液的基础上继续用20％绵羊血清作为精子的获能因子，使用...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵刚，黄承俊，李宁，杜学海，江馗语，马力，商业，
申请(专利权)人：辽宁省农业发展服务中心，
类型：发明
国别省市：