一种级联酶有序固定方法及在亚硝酸盐可视检测中的应用技术

本发明专利技术提供了一种级联酶有序固定方法及在亚硝酸盐可视检测中的应用，并构建基于GOX@HRPDECN检测亚硝酸盐的反应体系，属于生物传感器技术领域。由于在GOX@HRP DECN中，级联酶分布有序，为中间产物的运输提供了特定路线，天然酶的催化效率和利用率进一步提高。蛋白无机纳米结构也对生物大分子起到保护作用，使级联反应酶在不适宜、极端环境中表现出更好的稳定性。因此借助GOX@HRP DECN优异的催化活性和稳定性，构建了液相反应体系检测亚硝酸盐。进一步将GOX@HRP DECN封装于具有固定和保护作用的多孔网络结构水凝胶中，在增强其稳定性和便携化的同时，实现了智能手机拍照后的图像输出，将图像转化为色坐标数据信息定量检测亚硝酸盐，为亚硝酸盐可视检测提供了技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然酶固定化与生物传感器，具体涉及级联反应的葡萄糖氧化酶(gox)和辣根过氧化物酶(hrp)在蛋白-无机杂化纳米花(decn)中有序固定的新方法，并将其包封在水凝胶中构建便携化的亚硝酸盐可视检测传感器。

技术介绍

1、基于生物酶构建的传感器在医学诊断、环境监测和食药检测等方面有广泛的应用和研究。生物酶的高活性和特异性为开发优质性能的生物传感器提供了保障。但是，由于生物酶的蛋白质本质，其在苛刻条件下(高温、极端ph和有机溶剂等)极易发生空间构象的变化，导致活性丧失，这极大地阻碍了酶基生物传感器的产业化发展。

2、固定化酶技术为生物酶的工业化生产提供可靠技术，通过将酶束缚或限制在固体材料一定区域内，既保留酶原有催化活性，又可提升酶对环境的抵抗性，同时，固定化酶的非均相性使其便于后续的产物分离操作，提高酶的循环使用次数。蛋白无机杂化纳米结构是一种花状的纳米材料，具有较高的比表面积、强大的吸附能力、优异的催化性能和高效的负载能力，是天然酶固定化的良好载体。通过温和的生物矿化自组装方式，使天然酶固定于无机盐形成的骨架中，可以限制蛋白结构构象本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种级联酶有序固定方法，其步骤如下：

2.如权利要求1所述的一种级联酶有序固定方法，其特征在于：GOX和HRP分两个步骤加入，步骤(1)中GOX的加入量为0.8mg，步骤(2)中HRP的加入量为1.2mg。

3.一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料，其特征在于：是由权利要求1和2所述的方法制备得到。

4.权利要求3所述的一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料作为检测试剂在亚硝酸盐液相传感平台中的应用，其特征在于：亚硝酸盐的检测范围为1.6～360μmol/L。

5.权利要求4所述的一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料作为检测试...

【技术特征摘要】

1.一种级联酶有序固定方法，其步骤如下：

2.如权利要求1所述的一种级联酶有序固定方法，其特征在于：gox和hrp分两个步骤加入，步骤(1)中gox的加入量为0.8mg，步骤(2)中hrp的加入量为1.2mg。

3.一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料，其特征在于：是由权利要求1和2所述的方法制备得到。

4.权利要求3所述的一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料作为检测试剂在亚硝酸盐液相传感平台中的应用，其特征在于：亚硝酸盐的检测范围为1.6～360μmol/l。

5.权利要求4所述的一种基于级联酶有序固定方法合成的纳米材料...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红霞，王荷蕊，闫旭，孙春燕，张铁华，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：