用于治疗听力损失的基因疗法递送组合物和方法技术

本公开提供了包含编码序列的构建体，所述编码序列可操作地连接至在外毛细胞中表达多核苷酸的启动子，其中所述编码序列编码多肽(例如，异源多肽)。示例性构建体包括AAV构建体。还提供了使用所公开的构建体来治疗听力损失和/或耳聋的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

技术介绍

1、听力损失可以是传导性的(从耳道或中耳引起的)、感觉神经性的(从内耳或听觉神经引起)或混合性的。大多数形式的非综合征性耳聋都与内耳结构受损引起的永久性听力损失(感觉神经性耳聋)相关，尽管一些形式可能涉及中耳的变化(传导性听力损失)。人的大部分感觉神经性听力损失是由耳蜗中corti器的毛细胞异常(毛细胞功能差)引起的。毛细胞在出生时可能是异常的，或者在个体的一生中可能会受到损害(例如，由于噪音创伤或感染所致)。

2、当前，用于听力损失的治疗包括针对轻度至重度损失的听力放大和针对重度至极度损失的耳蜗植入(kral和o'donoghue,2010,n.engl.j.med.363:1438-1450)。需要改进的用于非综合征性耳聋和其他形式的听力损失的治疗选择。

技术实现思路

1、本公开的某些方面涉及一种包含编码多肽的多核苷酸的构建体，所述多核苷酸可操作地连接至在外毛细胞中表达所述多核苷酸的启动子，其中所述启动子选自以下一项或多项：癌调蛋白(ocm)启动子、prestin启动子、胆碱能受体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种包含编码多肽的多核苷酸的构建体，所述多核苷酸可操作地连接至在外毛细胞中表达所述多核苷酸的启动子，其中所述启动子选自由以下组成的组：癌调蛋白(OCM)启动子、prestin启动子、胆碱能受体烟碱α10(CHRNA10)启动子、动力蛋白3(DNM3)启动子、粘蛋白14(MUC15)启动子、磷脂酶D(PLDB1)启动子、RAR相关孤儿受体B(RORB)启动子、纹状蛋白相互作用蛋白2(STRIP2)启动子、水通道蛋白11(AQP11)启动子、钾电压门控通道亚家族Q成员4(KCNQ4)启动子、LBH启动子、硬纤毛蛋白(STRC)启动子、微管蛋白α8(TUBA8)启动子以及它们的任何组合。<...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种包含编码多肽的多核苷酸的构建体，所述多核苷酸可操作地连接至在外毛细胞中表达所述多核苷酸的启动子，其中所述启动子选自由以下组成的组：癌调蛋白(ocm)启动子、prestin启动子、胆碱能受体烟碱α10(chrna10)启动子、动力蛋白3(dnm3)启动子、粘蛋白14(muc15)启动子、磷脂酶d(pldb1)启动子、rar相关孤儿受体b(rorb)启动子、纹状蛋白相互作用蛋白2(strip2)启动子、水通道蛋白11(aqp11)启动子、钾电压门控通道亚家族q成员4(kcnq4)启动子、lbh启动子、硬纤毛蛋白(strc)启动子、微管蛋白α8(tuba8)启动子以及它们的任何组合。

2.一种包含编码多肽的多核苷酸的构建体，所述多核苷酸可操作地连接至在外毛细胞中表达所述多核苷酸的启动子，其中所述启动子与所述多核苷酸异源。

3.如权利要求1或2所述的构建体，其中所述启动子包含与seq id no:1-15中任一者具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的核酸序列。

4.一种包含编码多肽的多核苷酸的构建体，所述多核苷酸可操作地连接至在外毛细胞中表达所述多核苷酸的启动子，其中所述启动子包含与seq id no:1-15中任一者具有至少85％、至少90％、具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的核酸序列。

5.如权利要求1-4中任一项所述的构建体，其中所述启动子是人prestin启动子。

6.如权利要求1-4中任一项所述的构建体，其中所述启动子是人癌调蛋白(ocm)启动子。

7.如权利要求1-5中任一项所述的构建体，其中所述启动子包含与seq id no:3或15具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的核酸序列。

8.如权利要求1-5中任一项所述的构建体，其中所述启动子包含与seq id no:3具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的核酸序列。

9.如权利要求1-5中任一项所述的构建体，其中所述启动子包含与seq id no:1或2具有至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的核酸序列。

10.如权利要求1或3-9中任一项所述的构建体，其中所述启动子与所述多核苷酸异源。

11.如前述权利要求中任一项所述的构建体，其中所述多肽是外毛细胞多肽、治疗性多肽或报告多肽。

12.如前述权利要求中任一项所述的构建体，其中编码外毛细胞多肽的多核苷酸包括选自以下的基因：肌动蛋白γ1(actg1)、腺苷酸环化酶1型(adcy1)、钙结合蛋白2(cabp2)、含卷曲螺旋结构域的50(ccdc50)、钙粘蛋白相关23(cdh23)、癌胚抗原相关细胞粘附分子16(ceacam16)、染色质结构域解旋酶dna结合蛋白7(chd7)、钙和整联蛋白结合家族成员2(cib2)、封闭蛋白14(cldn14)、氯离子细胞内通道5(clic5)、酪蛋白水解线粒体基质肽酶蛋白水解亚单位(clpp)、clarin 1(clrn1)、pejvakin(dfnb59)、内皮素3(edn3)、含elmo结构域的蛋白3(elmod3)、表皮生长因子受体激酶底物8(eps8)、espin(espn)、雌激素相关受体β(esrrb)、眼缺失同源物1(eya1)、含gipc pdz结构域的家族成员3(gipc3)、g蛋白偶联受体98(gpr98)、g蛋白信号传导调节剂2(gpsm2)、富含半胱氨酸的谷氧还蛋白1(grxcr1)、富含半胱氨酸的谷氧还蛋白2(grxcr2)、含免疫球蛋白样结构域的受体1(ildr1)、赖氨酰-trna合成酶(kars)、钾电压门控通道kqt样亚家族成员4(kcnq4)、脂肪瘤hmgic融合配偶体样5(lhfpl5)、富含亮氨酸的含跨膜和o-甲基转移酶结构域的蛋白(lrtomt1comt2)、三细胞紧密连接跨膜蛋白(marveld2)、微小rna 96(mir96)、甲硫氨酸亚砜还原酶b3(msrb3)、非肌肉肌球蛋白重链9(myh9)、非肌肉肌球蛋白重链14(myh14)、非常规肌球蛋白iiia(myo3a)、非常规肌球蛋白vi(myo6)、非常规肌球蛋白viia(myo7a)、非常规肌球蛋白xva(myo15a)、耳畸蛋白(otof)、耳胶蛋白样蛋白(otogl)、嘌呤能受体p2x配体门控离子通道2(p2rx2)、原钙粘蛋白15(pcdh15)、含pdz结构域的7(pdzd7)、线粒体多核糖核苷酸核苷酸基转移酶1(pnpt1)、pou结构域4类转录因子3(pou4f3)、磷酸核糖焦磷酸合成酶1(prps1)、受体型蛋白酪氨酸磷酸酶q(ptprq)、radixin(rdx)、含支架的锚蛋白重复序列和sam结构域(sans)、丝氨酸蛋白酶抑制剂肽酶抑制剂进化枝b成员6(serpinb6)、six同源盒1(six1)、six同源盒5(six5)、prestin(slc26a5)、第二线粒体源性半胱天冬酶激活剂(smac/diablo)、x连锁小肌肉蛋白(smpx)、硬纤毛蛋白(strc)、核膜血影重复蛋白4(syne4)、tbc1结构域家族成员24(tbc/d24)、紧密连接蛋白xo 2(tjp2)、跨膜通道样蛋白1(tmc1)、跨膜内耳表达蛋白(tmie)、跨膜蛋白酶丝氨酸3(tmprss3)、taperin(tprn)、trio和f-肌动蛋白结合蛋白(triobp)、血小板反应蛋白型层粘连蛋白g结构域和ear重复序列(tspear)、harmonin(ush1c)、usherin(ush2a)、wolframin(wfs1)和旋蛋白(whrn)，或它们的任何组合。

13.如权利要求1-12中任一项所述的构建体，其中编码外毛细胞多核苷酸的多核苷酸包括选自以下的基因：钙粘蛋白相关23(cdh23)、clarin 1(clrn1)、pejvakin(dfnb59)、钾电压门控通道kqt样亚家族成员4(kcnq4)、耳畸蛋白(otof)、原钙粘蛋白15(pcdh15)、pou结构域4类转录因子3(pou4f3)、prestin(slc26a5)、硬纤毛蛋白(strc)、跨膜通道样蛋白1(tmc1)、trio和f-肌动蛋白结合蛋白(triobp)、harmonin(ush1c)、usherin(ush2a)、wolframin(wfs1)和旋蛋白(whrn)。

14.如权利要求1-13中任一项所述的构建体，其中编码外毛细胞多核苷酸的所述多核苷酸包括kqt样亚家族成员4(kcnq4)。

15.如权利要求11-14中任一项所述的构建体，其中所述治疗性多肽是跨膜蛋白、酶、生长因子、细胞因子、受体、受体配体、激素、膜蛋白、膜相关蛋白、抗原或抗体。

16.如权利要求11-15中任一项所述的构建体，其中所述治疗性多肽是跨膜蛋白。

17.如权利要求11-15中任一项所述的构建体，其中编码所述治疗性多肽的多核苷酸包括选自以下的基因：肌动蛋白γ1(actg1)、腺苷酸环化酶1型(adcy1)、钙结合蛋白2(cabp2)、含卷曲螺旋结构域的50(ccdc50)、钙粘蛋白相关23(cdh23)、癌胚抗原相关细胞粘附分子16(ceacam16)、染色质结构域解旋酶dna结合蛋白7(chd7)、钙和整联蛋白结合家族成员2(cib2)、封闭蛋白14(cldn14)、氯离子细胞内通道5(clic5)、酪蛋白水解线粒体基质肽酶蛋白水解亚单位(clpp)、clarin 1(clrn1)、pejvakin(dfnb59)、内皮素3(edn3)、含elmo结构域的蛋白3(elmod3)、表皮生长因子受体激酶底物8(eps8)、espin(espn)、雌激素相关受体β(esrrb)、眼缺失同源物1(eya1)、含gipc pdz结构域的家族成员3(gipc3)、g蛋白偶联受体98(gpr98)、g蛋白信号传导调节剂2(gpsm2)、富含半胱氨酸的谷氧还蛋白1(grxcr1)、富含半胱氨酸的谷氧还蛋白2(grxcr2)、含免疫球蛋白样结构域的受体1(ildr1)、赖氨酰-trna合成酶(kars)、钾电压门控通道kqt样亚家族成员4(kcnq4)、脂肪瘤hmgic融合配偶体样5(lhfpl5)、富含亮氨酸的含跨膜和o-甲基转移酶结构域的蛋白(lrtomt1comt2)、三细胞紧密连接跨膜蛋白(marveld2)、微小rna 96(mir96)、甲硫氨酸亚砜还原酶b3(msrb3)、非肌肉肌球蛋白重链9(myh9)、非肌肉肌球蛋白重链14(myh14)、非常规肌球蛋白iiia(myo3a)、非常规肌球蛋白vi(myo6)、非常规肌球蛋白viia(myo7a)、非常规肌球蛋白xva(myo15a)、耳畸蛋白(otof)、耳胶蛋白样蛋白(otogl)、嘌呤能受体p2x配体门控离子通道2(p2rx2)、原钙粘蛋白15(pcdh15)、含pdz结构域的7(pdzd7)、线粒体多核糖核苷酸核苷酸基转移酶1(pnpt1)、pou结构域4类转录因子3(pou4f3)、磷酸核糖焦磷酸合成酶1(prps1)、受体型蛋白酪氨酸磷酸酶q(ptprq)、radixin(rdx)、含支架的锚蛋白重复序列和sam结构域(sans)、丝氨酸蛋白酶抑制剂肽酶抑制剂进化枝b成员6(serpinb6)、six同源盒1(six1)、six同源盒5(six5)、prestin(slc26a5)、第二线粒体源性半胱天冬酶激活剂(smac/diablo)、x连锁小肌肉蛋白(smpx)、硬纤毛蛋白(strc)、核膜血影重复蛋白4(syne4)、tbc1结构域家族成员24(tbc/d24)、紧密连接蛋白xo 2(tjp2)、跨膜通道样蛋白1(tmc1)、跨膜内耳表达蛋白(tmie)、跨膜蛋白酶丝氨酸3(tmprss3)、taperin(tprn)、trio和f-肌动蛋白结合蛋白(triobp)、血小板反应蛋白型层粘连蛋白g结构域和ear重复序列(tspear)、harmonin(ush1c)、usherin(ush2a)、wolframin(wfs1)和旋蛋白(whrn)，或它们的任何组合。

18.如权利要求11-15或17中任一项所述的构建体，其中编码所述治疗性多肽的所述多核苷酸包括选自以下的基因：钙粘蛋白相关23(cdh23)、clarin 1(clrn1)、pejvakin(dfnb59)、钾电压门控通道kqt样亚家族成员4(kcnq4)、耳畸蛋白(otof)、原钙粘蛋白15(pcdh15)、pou结构域4类转录因子3(pou4f3)、prestin(slc26a5)、硬纤毛蛋白(strc)、跨膜通道样蛋白1(tmc1)、trio和f-肌动蛋白结合蛋白(triobp)、harm...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·D·格里布尔，D·R·伦茨，R·吴，姜昊，
申请(专利权)人：阿库斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：