一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法技术

本发明专利技术公开了一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，具体包括如下操作步骤：S1：种子挑选；S2：种子灭菌；S3：种子萌发；S4：农杆菌的活化；S5：侵染液的制备；S6：外植体的制备、侵染、共培养；S7：毛状根诱导。通过在侵染前，从冰箱中取出低温农杆菌菌液，融化后用接种环蘸取少量的菌种在LB培养基上划线，随后在无菌的50mL离心管中倒入40mL左右的LCCM，用接种环将LB平板上的菌全部挑到管中，重悬菌液，测出OD值，最后用液体LCCM重悬沉淀使OD650＝0.6～0.7，从而对菌液的质量精准控制，避免菌液内部菌种含量出现偏差，相对于现有方法，本申请可以对发根农杆菌介导进行控制保证转化效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于种植领域，具体涉及一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法。

技术介绍

1、大豆发根转化是一种遗传转化技术，利用发状根农杆菌的转化侵染能力，将外源基因导入大豆的基因组中。这种转化体系具有周期短、转化效率高且不易产生变异等优点，因此在基因功能研究和品种改良等领域得到了广泛应用。

2、且现有的大豆发根转化方法流程为：

3、1、选取种皮完好、无病斑、无虫害的大豆种子。

4、2、对大豆种子进行灭菌处理。

5、3、将灭菌后的大豆种子接种在发芽培养基中，在特定的温度和光照条件下萌发。

6、4、制备侵染菌液。取原菌液，并侵染大豆的子叶节。

7、但是现有方法中，不能够精准控制菌液内部含量，从而导致在后续侵染时，因菌种含量比例偏差过大，进而影响到大豆发根转化的效果，为此本申请设计了一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，使得发根农杆菌可以精准的与大豆进行侵染转化。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，以解本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于，具体包括如下操作步骤：

2.根据权利要求1所述的一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于：所述步骤3中无菌水淹没大豆的浸泡时间为9～16h，所述步骤3中种子萌发温度为25℃，萌发时间为12h。

3.根据权利要求1所述的一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于：所述步骤4中LB培养基1L标配PH＝7主要成分为：

4.根据权利要求1所述的一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于：所述步骤6中LCCM1L标配PH＝5.4主要成分为：

5.根据权利要求1所述的一种发根农杆...

【技术特征摘要】

1.一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于，具体包括如下操作步骤：

2.根据权利要求1所述的一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其特征在于：所述步骤3中无菌水淹没大豆的浸泡时间为9～16h，所述步骤3中种子萌发温度为25℃，萌发时间为12h。

3.根据权利要求1所述的一种发根农杆菌介导的大豆发根转化方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：童飞，王幸，王好让，李思梦，徐泽俊，齐玉军，邢兴华，晋彤彤，
申请(专利权)人：江苏徐淮地区徐州农业科学研究所江苏徐州甘薯研究中心，
类型：发明
国别省市：