一种检测羟基自由基的内质网靶向长波长荧光探针及其制备方法与应用技术

一种检测羟基自由基的内质网靶向长波长荧光探针及其制备方法与应用。所述荧光探针的结构如式I所示。本发明专利技术同时提供了所述荧光探针的制备方法及其在羟基自由基检测中的应用。本发明专利技术提供的荧光探针可在640nm的长分析波长区域对羟基自由基进行灵敏、特异的检测，同时还具有选择性靶向内质网、生物背景荧光信号低、对生物样品的光损伤小、生物相容性好、制备和使用方便等优点，在化学、生物学、医药等领域中有着巨大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化分析，具体涉及一种检测羟基自由基的内质网靶向长波长荧光探针及其制备方法与应用。

技术介绍

1、内质网是真核细胞内一种重要的细胞器，在蛋白质、糖类、脂质等重要生物大分子的合成、修饰和运输中起着重要作用。此外，内质网还参与了细胞死亡(如凋亡、铁死亡)过程的调控。例如，由于其自身的大脂膜结构特征，已有研究表明内质网是铁死亡过程中脂质过氧化(铁死亡执行步骤)的最早及主要位点。脂质过氧化是指细胞内的多不饱和脂肪酸(pufa)在活性氧物种(ros)和脂肪氧合酶等作用下发生的一系列脂质氧化反应。羟基自由基(·oh)是生物体内最具破坏性的ros之一，极强的氧化性和脱氢能力使其成为最重要的脂质过氧化引发剂之一。因此，发展实时原位的内质网·oh检测方法对相关生理病理过程的研究具有十分重要的意义。然而，由于·oh的反应活性高、寿命短(纳秒级)、浓度低(纳摩尔级)等特点，其准确、高效且实时、原位的分析检测仍十分困难。

2、荧光探针成像分析技术由于其高灵敏度、低成本、操作简便、无创成像、实时成像、超高时空分辨率等优势而具有良好的应用前景，已被广泛用于·本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测羟基自由基的内质网靶向长波长荧光探针，其特征在于，所述荧光探针的结构如式I所示，

2.如权利要求1所述荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下反应步骤：(1)由N-Boc哌嗪和4-氟-2-羟基苯甲醛在有机溶剂中，经碱催化反应得化合物1；(2)化合物1和乙酰乙酸乙酯在有机溶剂内，经碱催化，发生缩合反应，得化合物2；(3)化合物2在有机溶剂中，经酸催化，脱去Boc保护基团，得化合物3；(4)化合物3与对甲苯磺酰氯在有机溶剂内，经碱催化发生亲核取代反应，得化合物4；(5)化合物4与3-醛基-1-甲基喹啉鎓，在水/有机混合溶剂中，经碱催化，发生亲电加成反应，得到式I所示荧...

【技术特征摘要】

1.一种检测羟基自由基的内质网靶向长波长荧光探针，其特征在于，所述荧光探针的结构如式i所示，

2.如权利要求1所述荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下反应步骤：(1)由n-boc哌嗪和4-氟-2-羟基苯甲醛在有机溶剂中，经碱催化反应得化合物1；(2)化合物1和乙酰乙酸乙酯在有机溶剂内，经碱催化，发生缩合反应，得化合物2；(3)化合物2在有机溶剂中，经酸催化，脱去boc保护基团，得化合物3；(4)化合物3与对甲苯磺酰氯在有机溶剂内，经碱催化发生亲核取代反应，得化合物4；(5)化合物4与3-醛基-1-甲基喹啉鎓，在水/有机混合溶剂中，经碱催化，发生亲电加成反应，得到式i所示荧光探针；见以下反应路线，

3.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机溶剂为二甲基亚砜，甲苯和n,n二甲基甲酰胺中的至少一种，为反应温度为80～130℃，反应时间为1～24h；步骤(2)所述有机溶剂为乙醇、乙酸和甲醇中的至少一种，所述碱为哌啶、吡啶和碳酸钾中的至少一种，反应温度为30～120℃，反...

【专利技术属性】
技术研发人员：李洪玉，袁泽利，罗雪，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：