一种非基因编辑诱导间充质干细胞生成IPS细胞的方法技术

技术编号:41881322 阅读:22 留言:0更新日期:2024-07-02 00:35
本发明专利技术属于再生医学领域,具体涉及一种非基因编辑诱导间充质干细胞生成IPS细胞的方法。所述方法包括以下步骤:使脂肪干细胞与诱导剂相接触,由此所述脂肪干细胞发生细胞重编程,产生诱导多潜能干细胞;所述诱导剂包含姜黄素、雌激素、cAMP激活剂、丝裂原激活蛋白激酶抑制剂或TGF‑beta受体抑制剂中的至少一种。本发明专利技术的方法避免了基因编辑方式,安全无风险,易于操作,且诱导效率极高,非常适合工业化生产,在再生医学领域的应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于再生医学领域,具体涉及一种非基因编辑诱导间充质干细胞生成ips细胞的方法。


技术介绍

1、干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞,根据不同的分化潜能分类可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞,其具有多向分化潜能、无限地分裂、增殖等特性。而诱导多能干细胞(ipsc)具有类似于胚胎干细胞的全能性,而且来源广泛,避免了免疫排斥反应,为整个干细胞生物学领域和临床再生医学提供了新的研究方向。诱导多能干细胞,又称人工诱导多能干细胞,是将一系列诱导因子导入到成熟体细胞中,并重编程为具有类似胚胎干细胞特征的一种多能干细胞。

2、2006年8月,日本京都大学中山伸弥教授(shinya yamanaka)所领导的实验室,首次证明通过逆转录病毒载体向已经分化的小鼠体细胞中过表达四个基因(oct4、sox2、klf4和c-myc)就可以获得拥有多潜能性的细胞,称为诱导的多潜能干细胞(inducedpluripotent stem cells,ipscs)。在该实验中获得的ipscs拥有胚胎干细胞类似的特征,具有碱性磷酸酶活性(ap)以及小鼠esc特异的sse本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种非基因编辑方式诱导脂肪干细胞生成诱导多能干细胞的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述cAMP激活剂包括Forskolin,IBMX,Rolipram,8BrcAMP,PGE2,NKH 477,dibutyryl-cAMP或Sp-8-Br-cAMPs中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述cAMP激活剂为PGE2。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于,所述丝裂原激活蛋白激酶抑制剂为PD0325901。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,...

【技术特征摘要】

1.一种非基因编辑方式诱导脂肪干细胞生成诱导多能干细胞的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述camp激活剂包括forskolin,ibmx,rolipram,8brcamp,pge2,nkh 477,dibutyryl-camp或sp-8-br-camps中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述camp激活剂为pge2。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于,所述丝裂原激活蛋白激酶抑制剂为pd0325901。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述tgf-beta受体抑制剂包括616452,repsox,sb431542,a8301,gw788388,sd208,sb525334,ly364947、d4476或sb505124中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述tgf-beta受体抑制剂为ly364947。

7.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述诱导剂包含姜黄素、雌激素、pge2、pd0325901和ly364947。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述诱导剂还包含β-巯基乙醇。

9.根据权利要求1或8所述的方法,其特征在于,所述诱导剂添加在基础培养基中。

10. 根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述基础培养基包括mesencult-xfmedium、essential 8 medium、stempro hesc sfm、cts essential 6 medium、dmem-f12或knockout dmem中的至少一种。

11. 根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述基础培养基为mesencult-xfmedium和dmem-f12。

12.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,所述基础培养基还包含氨基酸、维生素或无机盐中的至少一种。

13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述基础培养基还包含维生素c、α-酮戊二酸、fe2+或谷氨酰胺中的至少一种。

14.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述基础培养基还包含白血病抑制因...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈风辉
申请(专利权)人:广东金专生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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