一种基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法及其应用，所述基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法包括：取抗原免疫后小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行电融合，筛选后得到所述杂交瘤细胞，所述抗原为血清淀粉样蛋白A。本发明专利技术通过电融合方式获得能够产生血清淀粉样蛋白A抗体的杂交瘤细胞，提高了杂交瘤细胞的融合效率，解决了因杂交瘤细胞融合效率低下导致的抗体产量降低的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学工程领域，尤其涉及一种基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法及其应用。

技术介绍

1、血清淀粉样蛋白a(saa)是一种主要来自肝脏细胞的非特异性急性时相反应蛋白，健康时saa血液浓度极低，但当机体发生感染或损伤时，其在血液中的浓度会快速升高，可在4-6小时内迅速升高约1000倍，清除病原体后又可迅速降低至正常水平。因此临床上常将saa水平测定用于感染性疾病的诊断和病情监测，如儿童肺炎、腮腺炎等。

2、在生物技术、免疫学和重组蛋白表达
，荧光免疫层析技术是一种广泛应用的检测技术，其利用荧光标记的抗体来特异性地识别和结合目标抗原，从而实现对目标抗原的定性或定量检测。利用荧光免疫层析技术测量血清中saa蛋白含量是快速诊断机体是否具有病毒、细菌感染的有效方法。

3、实现该方法的关键步骤之一是获得具有高亲和力和高灵敏度的荧光微球标记抗体和包被抗体，传统方法主要是通过动物免疫获得多克隆抗体，但这种方法存在批次间差异大、稳定性差等问题，单克隆抗体由于其特异性强、稳定性好，逐渐成为替代多克隆抗体的首选。然而，单克隆抗体的制备本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法包括：取抗原免疫后小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行电融合，筛选后得到所述杂交瘤细胞，所述抗原为血清淀粉样蛋白A。

2.根据权利要求1所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述电融合的融合电压为700-1000V，优选为800-900V；

3.根据权利要求1或2所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述筛选包括使用HAT培养基筛选、ELISA筛选和荧光免疫层析试纸条筛选；

4.如权利要求1-3任一项所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备...

【技术特征摘要】

1.一种基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法包括：取抗原免疫后小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行电融合，筛选后得到所述杂交瘤细胞，所述抗原为血清淀粉样蛋白a。

2.根据权利要求1所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述电融合的融合电压为700-1000v，优选为800-900v；

3.根据权利要求1或2所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法，其特征在于，所述筛选包括使用hat培养基筛选、elisa筛选和荧光免疫层析试纸条筛选；

4.如权利要求1-3任一项所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法在制备用于荧光免疫层析技术的包被抗体和标记抗体中的应用。

5.一种包被抗体，其特征在于，所述包被抗体由权利要求1-3任一项所述的基于电融合技术的杂交瘤细胞制备方法制备得到的杂交瘤细胞中纯化得到。

6.根据权利要求5所述的包被抗体，其特征在于，所述包被抗体的重链可变区的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列分别包括seq id no.5、...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶成章，朱兆奎，周云波，沙海，付永亮，
申请(专利权)人：上海方源标品生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：