一种耐高盐酰胺酶、基因、载体、重组菌及应用制造技术

本发明专利技术涉及重组蛋白技术技术领域，具体涉及一种耐高盐酰胺酶、基因、载体、重组菌及应用，所述酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该酰胺酶具有极高的耐盐性及良好的乙醇耐受性。本发明专利技术制备的重组酰胺酶，为未来实现高盐发酵食品及酒精饮料中氨基甲酸乙酯的消除，实现氨基甲酸乙酯水解酶工业化应用奠定了基础，具有巨大的经济及社会效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重组蛋白，尤其涉及一种耐高盐酰胺酶、基因、载体、重组菌及应用。

技术介绍

1、氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate或urethane,简称ec)，是一种具有遗传毒性及较强致癌性的物质(可以引起肺肿瘤、淋巴癌、肝癌、皮肤癌等)，广泛存在于多种发酵食品(如酱油、食醋、泡菜)和酒精饮料(如黄酒、白酒、葡萄酒等、日本清酒、白兰地)中。人体摄取氨基甲酸乙酯主要是通过饮用酒精饮料和食物。氨基甲酸乙酯已成为影响人类健康的一个不可忽视的因素。采取有效方法消除发酵食-品或酒精饮料中的氨基甲酸乙酯迫在眉睫。

2、氨基甲酸乙酯水解酶可直接高效的将ec降解为无毒性的乙醇、氨和二氧化碳，是最有希望彻底解决传统发酵食品中因ec而存在的食品安全问题的方法。然而目前尚无可有效应用于传统发酵食品(如酱油)中ec直接降解的酶，主要是目前所发现的ec水解酶生化特性存在重大缺陷：其一，由于尿素与ec分子结构相似，目前所发现的大部分酰胺酶类ec水解酶可同时降解尿素和ec。发酵食品中尿素(约50mg/l)含量是ec(10-750μg/l)含量的50-1000倍，它们本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种耐高盐酰胺酶，其特征在于，所述酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述耐高盐酰胺酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种含权利要求2所述基因的重组表达载体。

4.一种含有权利要求3所述重组表达载体的重组菌。

5.根据权利要求4所述重组菌，其特征在于，所述重组菌为重组大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、乳酸乳球菌、谷氨酸棒杆菌或酵母菌中的任意一种，其中优选大肠杆菌BL21DE3。

6.权利要求1所述耐高盐酰胺酶、权利要求3所述重组表达...

【技术特征摘要】

1.一种耐高盐酰胺酶，其特征在于，所述酰胺酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述耐高盐酰胺酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.一种含权利要求2所述基因的重组表达载体。

4.一种含有权利要求3所述重组表达载体的重组菌。

5.根据权利要求4所述重组菌，其特征在于，所述重组菌为重组大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、乳酸乳球菌、谷氨酸棒...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘庆涛，汪涵，田淑芳，李丹丹，王天文，钱森和，陶董墨农，周阿成，朱司宝，李元昊，
申请(专利权)人：安徽工程大学，
类型：发明
国别省市：