bvfA基因缺失株M5-90△bvfA及其构建和应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体为bvfA基因缺失株M5‑90△bvfA及其构建和应用，本发明专利技术成功构建了布鲁氏菌M5‑90△bvfA基因缺失株，可用于制备成区分自然感染和疫苗免疫的预防布鲁氏菌病的产品，较原始布鲁氏菌M5‑90的毒性减弱，安全性高，且因bvfA基因的缺失，使用该产品后动物没有产生针对该基因产生的抗体，因此只需要检测动物血液有无抗bvfA基因的抗体，有则为自然感染，无则为疫苗感染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体涉及bvfa基因缺失株m5-90△bvfa及其构建和应用。

技术介绍

1、针对农业农村部关于印发《畜间布鲁氏菌病防控五年行动方案(2022-2026年)》，坚持人病兽防、关口前移的原则，积极从源头切断传播途径。一些发达国家开展了布病根除计划，扑杀患病牲畜，但对于经济价值高、感染后损失大的牲畜在发展中国家不适合开展，因此，迫切需要开发更有效的预防布病的疫苗。布病是目前世界上重要的一种人畜共患病，由于马耳他b.melitensis是引起布病最常见的布鲁氏菌菌株，因此制备预防马耳他布病的产品尤其迫切。

2、bvfa基因是2005年发现的一个新的基因，也是布鲁氏菌属特有的一种基因。研究发现猪布鲁氏菌b.suis 1330bvfa::kan突变体在thp1细胞、j774细胞和hela内增殖显著少于亲本株，同时该研究发现猪布鲁氏菌b.suis 1330bvfa::kan突变体感染小鼠第4周和8周时，脾脏富集到的布鲁氏菌数量显著少于亲本株。猪布鲁氏菌b.suis 1330bvfa::kan突变体在体内和体外模型中毒力均高度减弱，表本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.bvfA基因缺失株M5-90△bvfA的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的bvfA基因缺失株M5-90△bvfA的构建方法，其特征在于，所述上游同源重组手臂打靶序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的bvfA基因缺失株M5-90△bvfA的构建方法，其特征在于，所述下游同源重组手臂打靶序列的核苷酸序列如SEQID2所示。

4.根据权利要求1所述的bvfA基因缺失株M5-90△bvfA的构建方法，其特征在于，所述打靶片段△bvfA::Kan的核苷酸序列如SEQID4。p>

5.根据权...

【技术特征摘要】

1.bvfa基因缺失株m5-90△bvfa的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的bvfa基因缺失株m5-90△bvfa的构建方法，其特征在于，所述上游同源重组手臂打靶序列的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的bvfa基因缺失株m5-90△bvfa的构建方法，其特征在于，所述下游同源重组手臂打靶序列的核苷酸序列如seqid2所示。

4.根据权利要求1所述的bvfa基因缺失株m5-90△bvfa的构建方法，其特征在于，所述打靶片段△bvfa::kan的核苷酸序列如seqid4。

5.根据权利要求1所述的bvfa基因缺失株m5-90△bvfa的构建方法，其特征在于，s2中...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾芳，杨江流，戴丽娜，
申请(专利权)人：内蒙古医科大学，
类型：发明
国别省市：