【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及核酸检测，具体涉及一种基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒。
技术介绍
1、现有的抗病毒治疗药物对cccdna无直接破坏作用，停药后往往出现高比例的病毒学反弹核疾病复发。随着分子检测技术的发展，研究人员发现患者血清中的hbv-rna实为未经转录的基因组rna（pregenomic rna，pgrna），存在于成熟病毒颗粒的核衣壳内，这种病毒颗粒被称为“hbv rna病毒样颗粒”。hbv-pgrna只能来自cccdna的转录表达，是一个较为理想的反应cccdna活性的病毒标志物。如果将肝组织内cccdna的清除或者处于转录静默状态看作一种阶段性治愈，则血清hbv rna持续消失可很好地反应这种阶段性治愈状态。hbv-pgrna作为病毒复制中间体，不仅可反映病毒的转录复制水平，而且在预测抗病毒治疗应答，指导停药以及监测病毒发生耐药方面均发挥了重要作用。
2、聚合酶链式反应（pcr）技术诞生于1985年，可在短短两小时内实现对靶标的百万倍放大，目前已成为核酸检测的“金标准”。但pcr检测试剂盒仍面临因灵敏度不...
【技术保护点】
1.一种基于CRISPR的HBVpgRNA检测试剂盒，其特征在于，包括一体化反应体系，所述一体化反应体系包括RT-LAMP扩增组分及Cas12b切割组分，所述RT-LAMP扩增组分包括模板DNA及RT-LAMP引物，所述Cas12b切割组分包括Cas12b、crRNA、荧光探针及RNA酶抑制剂，所述一体化反应体系用于与待测基因组核酸进行一体化反应，所述一体化反应包括RT-LAMP核酸扩增反应及Cas12b切割反应。
2.据权利要求1所述的基于CRISPR的HBVpgRNA检测试剂盒，其特征在于，所述Cas12b的工作浓度为0.1μM~0.5μM。
<...【技术特征摘要】
1.一种基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒，其特征在于，包括一体化反应体系，所述一体化反应体系包括rt-lamp扩增组分及cas12b切割组分，所述rt-lamp扩增组分包括模板dna及rt-lamp引物，所述cas12b切割组分包括cas12b、crrna、荧光探针及rna酶抑制剂，所述一体化反应体系用于与待测基因组核酸进行一体化反应，所述一体化反应包括rt-lamp核酸扩增反应及cas12b切割反应。
2.据权利要求1所述的基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒，其特征在于，所述cas12b的工作浓度为0.1μm~0.5μm。
3.根据权利要求1所述的基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒，其特征在于，所述crrna的设计步骤为：
4.根据权利要求3所述的基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒，其特征在于，所述pam序列包括ttn、tan、atn。
5.根据权利要求1所述的基于crispr的hbvpgrna检测试剂盒，其特征在于，所述rt-lamp引物包括f3引物、b3引物、fip引物、bip引物、lf引物及lb引物。
6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：王瑞，陈银芳，万蒙，
申请(专利权)人：江西乐成欣生生物技术研究有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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