一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法、引物探针组及试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法、引物探针组及试剂盒，属于分子检测技术领域。本发明专利技术提供的方法是根据甘蔗白条黄单胞菌Xal的ITX基因序列设计特异性引物，构建标准品，获得线性回归方程，构建针对甘蔗白条黄单胞菌Xal的实时荧光定量PCR检测体系，实现对甘蔗白条黄单胞菌Xal的特异性检测。本发明专利技术的检测方法具有特异性好，灵敏度高的特点，比常规半定量PCR检测的灵敏度高10000倍，可准确检测甘蔗白条黄单胞菌Xal。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子检测，特别涉及一种检测甘蔗白条黄单胞菌xal的方法、引物探针组及试剂盒。

技术介绍

1、甘蔗是世界上最主要的糖料作物，甘蔗糖占世界食糖总量的80％，占我国食糖总量的90％。甘蔗白条病(sugarcane leaf scald disease)是甘蔗白条病菌引起的一种细菌性病害，在全球多数种植甘蔗的国家或者地区都普遍发生。甘蔗白条病菌产生的黏液会堵塞甘蔗维管束，影响水分和养分的运输，从而导致甘蔗生长缓慢、有效蔗茎减少、宿根年限缩短、造成甘蔗蔗茎产量严重受损以及糖分性状恶劣。甘蔗白条病菌多发于暴雨过后，其典型性状为在甘蔗叶片上出现一条或者多条白色的铅笔状条纹，条纹从叶片的叶鞘开始向叶片尾部延伸，与甘蔗主脉平行。近年来，甘蔗白条病的病程逐渐加重，亟需对甘蔗白条病进行深入研究。

2、在我国，甘蔗的主要分布在广西、广东和云南等地区，通过对广西和福建两地甘蔗白条病调查采样及病原菌的生物地理学研究，对所有采集样品的病原菌进行形态学鉴定和分子生物学鉴定，初步鉴定甘蔗白条病病原主要是单一种类甘蔗白条病菌(xanthomonasalbilinea本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中的ITX基因片段的核苷酸序列如Seq_4所示。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中的标准品为甘蔗白条黄单胞病原菌XalJG43的DNA。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述标准品溶液的浓度为0.001pg/μL～1ng/μL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中线性回归方程为：Y＝-0.395x+9.784，R2＝0.9829。

6.根据权利要求1所述的方法...

【技术特征摘要】

1.一种检测甘蔗白条黄单胞菌xal的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s2中的itx基因片段的核苷酸序列如seq_4所示。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s2中的标准品为甘蔗白条黄单胞病原菌xaljg43的dna。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述标准品溶液的浓度为0.001pg/μl～1ng/μl。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述s2中线性回归方程为：y＝-0.395x+9.784，r2＝0.9829。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述实时荧光定量pcr的反应体系为：mix10μl；0.5mmol/l的taqman探针fam-xal-p1 1μl；1ng/μl的模板dna 1μl；0.2mmol/l的fam-xal-...

【专利技术属性】
技术研发人员：张木清，李美霖，暴怡雪，姚伟，陈保善，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：