单环刺螠无损伤DNA提取方法技术

本发明专利技术涉及遗传育种领域，具体涉及一种单环刺螠无损伤DNA提取方法，其具体是从单环刺螠的尾刚毛、体表粘液及体腔液中提取基因组DNA样本，对所提取的DNA进行验证，以确定所提取的DNA样本的最低用量，实现单环刺螠无损伤的DNA提取方法，所提取的DNA样本经检测符合遗传育种所需；经过后期养殖，采集过尾刚毛样本的单环刺螠成螠存活率为100%；刮取体表粘液的单环刺螠成螠存活率为100%，采集体腔液的单环刺螠成螠存活率为100%，幼螠存活率为89.67%；有效保障试验对象可继续应用于生产，为推动单环刺螠遗传育种研究和优良品种选育工作奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及遗传育种领域，具体涉及一种单环刺螠无损伤dna提取方法。

技术介绍

1、单环刺螠（ urechis unicinctus）俗称海肠子，是一种具有较高经济价值和潜在药用价值的海洋无脊椎动物，其体壁肌中富含蛋白质和多种人体必需氨基酸（许秀秀等，2019），已成为中国北方水产市场颇受欢迎并极具开发前景的海鲜食品。目前单环刺螠的人工育苗技术已趋成熟，人工养殖产量有了很大提升，但是工厂化养殖单环刺螠存在如夏季高温期管理、养殖发育停滞等问题亟待解决（黄栋等，2020），这都是缺乏单环刺螠优良品种的表现，为促进单环刺螠增养殖产业发展，加快遗传育种研究工作是非常必要的。

2、传统的单环刺螠基因组dna提取方法主要以体壁组织、肠道或者大量体腔液等为提取对象，抽取大量体腔液甚至杀死个体等取其组织用于dna提取，该方法往往造成较强的机械损伤或致死，无法使试验对象继续应用于生产，不利于单环刺螠遗传育种的研究工作。需要采用一种无损伤的dna提取方法，以免影响单环刺螠的存活能力和生产性能。因此，在遗传育种中无本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.单环刺螠无损伤DNA提取方法，其特征在于：选取从单环刺螠的尾刚毛、体表粘液及体腔液中提取基因组DNA样本，对所提取的DNA进行验证，以确定所提取的DNA样本的最低用量，具体操作如下：

2.根据权利要求1所述的单环刺螠无损伤DNA提取方法，其特征在于：所述尾刚毛样本，使用DNA提取试剂盒提取DNA，通过琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增实验，确定所提取的DNA样本的最低用量为：10根不含毛囊的尾刚毛仅体外部分，提取DNA电泳有明显条带，浓度为9.2 ng/μL；含毛囊的完整尾刚毛均可提取DNA，2根以上完整尾刚毛提取DNA，琼脂糖凝胶电泳显示条带清晰，DNA浓度大于8.62 ng/...

【技术特征摘要】

1.单环刺螠无损伤dna提取方法，其特征在于：选取从单环刺螠的尾刚毛、体表粘液及体腔液中提取基因组dna样本，对所提取的dna进行验证，以确定所提取的dna样本的最低用量，具体操作如下：

2.根据权利要求1所述的单环刺螠无损伤dna提取方法，其特征在于：所述尾刚毛样本，使用dna提取试剂盒提取dna，通过琼脂糖凝胶电泳、pcr扩增实验，确定所提取的dna样本的最低用量为：10根不含毛囊的尾刚毛仅体外部分，提取dna电泳有明显条带，浓度为9.2 ng/μl；含毛囊的完整尾刚毛均可提取dna，2根以上完整尾刚毛提取dna，琼脂糖凝胶电泳显示条带清晰，dna浓度大于8.62 ng/μl。

3.根据权利要求1所述的单环刺螠无损伤dna提取方法，其特征在于：所述体表粘液样本，使用dna提取试剂盒提取dna，通过琼脂糖凝胶电泳、pcr扩增实验，确定所提取的dna样本的最低用量为：体表粘液体积20µl开始有较明显条带，dna浓度为6.2 ng/μl。

4.根据权利要求1所述的单环刺螠无损伤dna提取方法，其特征在于：所述体腔...

【专利技术属性】
技术研发人员：林大伟，张龙，张志峰，陈宗涛，
申请(专利权)人：中国海洋大学三亚海洋研究院，
类型：发明
国别省市：