一种酶活提高的精氨酸脱亚氨酶突变体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种酶活提高的精氨酸脱亚氨酶突变体及其制备方法与应用。所述精氨酸脱亚氨酶突变体在精氨酸脱亚氨酶氨基酸序列的基础上含有R117H、F122I、A128P、V134G四个氨基酸位点突变。通过实验证明：与野生型精氨酸脱亚氨酶相比，该精氨酸脱亚氨酶突变体的酶活性大大提高，可高效催化底物L‑精氨酸反应生成L‑瓜氨酸，具有非常高的转化率，为进一步L‑瓜氨酸大规模工业生产奠定了良好的基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种酶活提高的精氨酸脱亚氨酶突变体及其制备方法与应用。

技术介绍

1、瓜氨酸(citrulline)是一种非蛋白质氨基酸，它具有肽键形成的能力，但是不参与蛋白质的合成，仅存在于人类的少数几种蛋白(如丝集蛋白、中间丝集蛋白、人脑髓鞘碱性蛋白、聚角蛋白微丝蛋白及一些组蛋白)中。瓜氨酸在生物体内氨的代谢中起着重要作用，在医药(如制备防治前列腺疾病、治疗l-精氨酸缺乏引起的相关疾病等的药物)、化妆品(如制备防皱、祛斑、抗衰老等的美容化妆品)等领域也有重要应用。

2、瓜氨酸的生产方法主要有化学法、提取法、发酵法和酶法。由于酶法生产l-瓜氨酸具有生产周期短、专一性强、产物纯化容易等优点，目前已逐渐成为瓜氨酸的主要生产方式。酶法生产瓜氨酸是利用精氨酸脱亚胺酶直接转化精氨酸生产瓜氨酸。为了避免瓜氨酸全合成途径中复杂的反馈调节作用，使瓜氨酸可以积累到较高的浓度，酶法合成瓜氨酸大多采用一步酶促反应。但是目前报道的大部分精氨酸脱亚胺酶大肠杆菌发酵单位低，大部分以无活性包涵体形式存在，酶法催化前期过程需要包涵体变性复性过程，增加了生产成本，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蛋白质，所述蛋白质在序列表中序列4所示精氨酸脱亚氨酶氨基酸序列的基础上含有下述四个氨基酸位点突变：R117H、F122I、A128P、V134G。

2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质为如下(a1)-(a3)中任一所述的蛋白质：

3.编码权利要求1或2所述蛋白质的核酸分子。

4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下(b1)-(b3)中任一所述的DNA分子：

5.下述(c1)-(c3)中任一所述的生物材料：

6.根据权利要求5所述的生物材料，其特征在于：所述重组菌是将编码权利要求1...

【技术特征摘要】

1.一种蛋白质，所述蛋白质在序列表中序列4所示精氨酸脱亚氨酶氨基酸序列的基础上含有下述四个氨基酸位点突变：r117h、f122i、a128p、v134g。

2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质为如下(a1)-(a3)中任一所述的蛋白质：

3.编码权利要求1或2所述蛋白质的核酸分子。

4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下(b1)-(b3)中任一所述的dna分子：

5.下述(c1)-(c3)中任一所述的生物材料：

6.根据权利要求5所述的生物材料，其特征在于：所述重...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小溪，陈璐，钱李敏，张勇，石玉松，
申请(专利权)人：安徽华恒生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：