一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速制备单层caco‑2细胞渗透模型的方法，属于细胞渗透模型技术领域，用0.012mg/mL的Ⅰ型胶原蛋白溶于0.006M乙酸得到Ⅰ型胶原蛋白包被液，将Ⅰ型胶原蛋白包被液包被到无菌的玻璃爬片上于37℃过夜，日次用无菌双蒸水清洗玻璃爬片两遍后晾干备用，将培养至汇合度达到70％的对数生长期的caco‑2细胞用胰蛋白酶消化，离心并丢弃上清液，用培养基打散后用70微米孔径的细胞过滤器将成团的caco‑2细胞筛选出来并计数，将caco‑2细胞接种在细胞小室的上室中，接种密度为35000细胞/cm<supgt;2</supgt;，将接种caco‑2细胞的玻璃爬片放入37℃、5%CO<subgt;2</subgt;的培养箱中培养，在接种后第2d更换培养基。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种细胞渗透模型，特别是涉及一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，属于细胞渗透模型。

技术介绍

1、辅料技术是一种产业成熟度较高的口服大分子药物（如多肽、单克隆抗体）改良型新药的创新路径。

2、目前存在的辅料产品，如tpe，snac技术的核心均采用了一种或多种脂溶性分子帮助促进药物渗透通过单层肠道/胃上表皮细胞。

3、这类辅料分子的具体作用机制目前尚未明确，其大致为扰动磷酸双分子层，以帮助药物跨膜进入细胞以穿过单层细胞，或打开细胞间的紧密连接蛋白以帮助药物穿过细胞旁通路。

4、不同的大分子药物间的分子量、水/脂溶性、作用机制性质存在较大差异，辅料的选用需根据缩递送的药物进行差异化组合。

5、目前药企普遍使用现有的辅料技术来研发大分子口服改良型新药，达到的效果有限，成功概率较低，而新辅料分子的发现进行很缓慢。

6、体外实验是发现新的潜在辅料分子的高效快速的方法（此处相较于动物实验），目前主流使用的体外模型为生长在可穿透性细胞小室上面的单层caco-2细胞模型。

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【技术保护点】

1.一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：培养基采用普诺赛PM150410；

3.根据权利要求2所述的一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：在步骤六中膜材质采用Polyester。

4.根据权利要求3所述的一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：培养基：普诺赛PM150410；

【技术特征摘要】

1.一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速制备单层caco-2细胞渗透模型的方法，其特征在于：培养基采用普诺赛pm150410；

3.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：随宇声，袁邦皓，窦浏，何超，邵海彬，
申请(专利权)人：深圳奥礼生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：