一种生产四氢嘧啶的基因工程菌、制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及基因工程及发酵工程技术领域,具体公开了一种生产四氢嘧啶的基因工程菌、制备方法及应用，通过对E.coli、Bacillus subtilis和Halomonas venusta的糖酵解、天冬氨酸等代谢相关途径进行分析，以野生型E.coli.W3110为底盘微生物，并通过基因组整合过表达异源四氢嘧啶生物合成途径关键酶基因和异源丙酮酸羧化酶基因，弱化分解途径等相关分子改造获得E.coli‑ect09，具有遗传背景清晰、可持续改造等优点，该菌株发酵生产四氢嘧啶操作简单、能以廉价碳源直接合成四氢嘧啶，采用分批补料发酵法在发酵罐中48h发酵四氢嘧啶产量可达到76.5g/L，具有很好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程及发酵工程，尤其涉及一种生产四氢嘧啶的基因工程菌、制备方法及应用。

技术介绍

1、四氢嘧啶，又称依克多因，是一种氨基酸衍生物，属于极端酶组分。最新研究发现，在极端条件下，如高盐、高温和高紫外线辐射下，四氢嘧啶能有效保护嗜盐菌免受伤害。同时，研究证明四氢嘧啶对皮肤具有良好的修复保护作用，因此在保健、生命科学和化妆品行业得到广泛应用。在有机合成中，四氢嘧啶促进酯化、缩合、烷基化等反应。在聚合物工业中，作为聚氨酯、聚丙烯酰胺等高分子材料的溶剂和反应介质。在药物制备中，作为溶剂有助于药物反应和结晶。四氢嘧啶还被广泛应用为通用有机溶剂，用于溶解和处理各种有机化合物，以及在实验室技术中的使用。

2、生产上，四氢嘧啶的制备大都通过化学合成的方式实现，制备方法始于丙烯，经过氧化、缩合、脱水和脱氧等步骤生成最终产品。然而，传统制备方法存在一些弊端，包括反应条件苛刻、催化剂复杂以及中间产物毒性。同时，传统制备方法依赖非可再生的石油化工原料，不符合可持续发展要求，因此迫切需要环保、高效的新技术路径。

3、微生物发酵法已经被作为大多数本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于，该菌种为E.coli-ect09，以野生型E.coli.W3110为底盘微生物，并通过基因组整合过表达异源四氢嘧啶生物合成途径关键酶基因和异源丙酮酸羧化酶基因，弱化分解途径等相关分子改造获得。

2.根据权利要求1所述的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于，野生型E.coli.W3110的保藏号为ATCC 273250。

3.根据权利要求1或2所述的的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌的制备方法，其特征在于，该制备方法包括：

4.根据权利要求3所述的的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌的制备方法，其特征在于，

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【技术特征摘要】

1.一种生产四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于，该菌种为e.coli-ect09，以野生型e.coli.w3110为底盘微生物，并通过基因组整合过表达异源四氢嘧啶生物合成途径关键酶基因和异源丙酮酸羧化酶基因，弱化分解途径等相关分子改造获得。

2.根据权利要求1所述的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于，野生型e.coli.w3110的保藏号为atcc 273250。

3.根据权利要求1或2所述的的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌的制备方法，其特征在于，该制备方法包括：

4.根据权利要求3所述的的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌的制备方法，其特征在于，

5.根据权利要求3所述的的一种生产四氢嘧啶的基因工程菌的制备方法，其特征在于，

6.利用权利要求3制备的基因工程菌e.coli-ect09在发酵生产四氢嘧啶中的应用。

7.利用权利要求3制备的基因工程菌e.coli-ect09发酵生产四氢嘧啶的方法，其特征在于，发酵方法包括以下步骤：

8.根据权利要求7所述的发酵生产四氢嘧啶的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁峰，
申请(专利权)人：台州市益善生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：