【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物基因，具体涉及一种扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因p mdr783分子标记的引物及其应用。
技术介绍
1、小麦是全球重要的粮食作物，其生产受到各种病害威胁，其中小麦白粉病是由禾本科布氏白粉菌（blumeria graminis f.sp. tritici）引发的一种气传真菌性病害，该病害具有生理小种多样和变异快的特点。在抗病育种领域，虽然目前小麦推广品种中有效抗白粉病基因如pm2、pm4a、pm4b和pm21仍在发挥作用，但品种抗性丧失频繁，新抗病基因的发掘和利用尤为迫切。
2、栽培二粒小麦（triticum dicoccum，2n=4x=28，aabb）作为普通小麦的近缘种，具有丰富的遗传多样性，是发掘优异抗病基因和拓宽小麦遗传基础的重要基因源。研究表明，栽培二粒小麦在抗病性上优异于普通小麦，尤其是对条锈病、白粉病、散粉病的抗性，部分品种还具有较高的抗旱能力。目前，利用栽培二粒小麦（triticum dicoccum）丰富的遗传资源，已成功发掘了多个优异的抗白粉病基因，为小麦遗传改良和品种抗性的提高提供了新动力。
3、分子育种技术的应用大幅提高了育种效率。通过分子标记辅助选择，可以精准地将目标基因整合到新品种中，同时减少不需要的基因引入，加速育种过程。在此过程中，发展与目标基因紧密连锁的分子标记成为关键步骤。栽培二粒小麦dr783苗期和成株期均高抗白粉病。因此，开发抗白粉病基因 pmdr783的分子标记，应用
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783分子标记的引物及其应用，以利用引物扩增分子标记对小麦抗白粉病基因 pmdr783进行定位和检测，在小麦选育中对其亲本进行有目的地选择，为选育抗白粉病类型的小麦新品种提供指导依据。
2、本专利技术是通过以下方法实现的：一种扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783分子标记的引物，该分子标记引物包括上游引物henu744-f和下游引物henu744-r；所述上游引物henu744-f的核苷酸序列如seq id no:1所示，所述下游引物henu744-r的核苷酸序列如seq id no:2所示。
3、本专利技术提供的扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783分子标记的引物在基因 pmdr783的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
4、本专利技术还提供了一种检测小麦样品中是否携带栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783的方法，包括以下步骤：
5、（1）提取待测小麦样品的基因组dna；
6、（2）利用分子标记引物对待测小麦样品的基因组dna进行pcr扩增，获得扩增产物；该分子标记引物包括上游引物henu744-f和下游引物henu744-r；所述上游引物69-2b-025-f的核苷酸序列如seq id no:1所示，所述下游引物69-2b-025-r的核苷酸序列如seq idno:2所示；
7、（3）对所述扩增产物进行电泳、检测，若能扩增出182 bp的特异条带，说明待测小麦样品中携带栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783；否则，待测小麦样品中不携带栽培二粒小麦抗白粉病基因 pmdr783。
8、本专利技术提供的方法中所述pcr扩增的体系为10 μl，包括：50 ng/μl小麦基因组dna1.0 μl，5 μl pcr master mix，5μm上游引物0.4 μl，5μm下游引物0.4 μl，无菌去离子水3.2 μl。
9、本专利技术提供的方法中所述pcr扩增的程序为：94℃预变性3分钟；94℃变性15秒，55℃退火20秒，延伸40秒，30个循环；72℃延伸10 min；4℃保存。
10、本专利技术提供的小麦抗白粉病基因 pmdr783的分子标记henu744的引物经过遗传分离群体检测，与基因 pmdr783的遗传距离仅为1.18 cm，与 pmdr783紧密连锁，应用于基因 pmdr783的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助选择育种。扩增小麦抗白粉病基因 pmdr783的分子标记引物应用于抗白粉病小麦育种中，不仅筛选快速精准，不受环境影响，选择目标明确，而且节约了生产成本，大大提高了优质抗白粉病小麦品种或品系的选择效率和质量。
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1.一种扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因PmDR783分子标记的引物，其特征在于，该分子标记引物包括上游引物HENU744-F和下游引物HENU744-R；所述上游引物HENU744-F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游引物HENU744-R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种权利要求1所述的扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因PmDR783分子标记的引物在基因PmDR783的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
3.一种检测小麦样品中是否携带栽培二粒小麦抗白粉病基因PmDR783的方法，其特征在于，包括以下步骤：
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为10 μL，包括：50ng/μL小麦基因组DNA 1.0 μL，5 μL PCR Master Mix，5μM上游引物0.4 μL，5μM下游引物0.4 μL，无菌去离子水3.2 μL。
5. 根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：94℃预变性3分钟；94℃变性15秒，55℃退火
...【技术特征摘要】
1.一种扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因pmdr783分子标记的引物，其特征在于，该分子标记引物包括上游引物henu744-f和下游引物henu744-r；所述上游引物henu744-f的核苷酸序列如seq id no:1所示，所述下游引物henu744-r的核苷酸序列如seq id no:2所示。
2.一种权利要求1所述的扩增栽培二粒小麦抗白粉病基因pmdr783分子标记的引物在基因pmdr783的检测、鉴定及辅助鉴定小麦抗白粉病性状以及分子标记辅助育种中的应用。
3.一种检测小麦样品中是否携带栽培二粒...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖蓓，孙妮娜，马朋涛，靳玉丽，袁堂玉，王冬梅，李林志，
申请(专利权)人：烟台大学，
类型：发明
国别省市：
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