【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学或生物制药，更具体地涉及抗il-13长效纳米抗体序列及其应用。
技术介绍
1、白细胞介素-13(interleukin-13)是白介素家族的重要成员，是由il-13基因编码生成的蛋白质，分子量约10kd。il-13可由多种细胞分泌，如cd4+t细胞、cd8+t细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和自然杀伤细胞。特别是2型辅助性t细胞(th2)。il-13对单核巨噬细胞、b淋巴细胞、nk细胞和血管内皮细胞等具有多种生物学作用，是机体免疫反应的调节的介质。在th2炎症中，th2细胞产生一系列细胞因子如il-4、il-5、il-9和il-13等，其中il-13被认为是最为核心的因子，几乎参与到th2炎症所有的并发过程。目前已经有大量试验证明，il-13在th2炎症发病机制中起到中轴的作用。
2、多项研究表明il-13与th2免疫应答相关的自身免疫性疾病有关，例如哮喘、特异性皮炎(ad)、慢性阻塞性肺疾病(copd)、变应性鼻炎、炎性肠病等。il-13作为自身免疫性疾病的靶点之一，已有相关的生物制剂进入临床研究，例如：leo pharma公司的adtralza(tralokinumab，已上市)，在研适应症为特应性皮炎、斑秃、哮喘、溃疡性结肠炎、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病；罗氏的lebrikizumab(临床iii期在研)，在研适应症为特应性皮炎、湿疹、哮喘、霍奇金淋巴瘤、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病；bms的cendakimab(临床ii期在研)，在研适应症为嗜酸粒细胞性食管炎、哮喘。
3、众多因子中，il-13及其信号途径作为有前景的治疗靶位点展现了其在临床上的重要价值。基于此，应用il-13的对抗物阻断th2相关疾病中大量表达的il-13的生物活性，对与改善th2炎症应该是一个好的方法。来源于骆驼科动物体内的一种天然缺失轻链的纳米抗体(nanobody)，是目前已知最小抗原结合片段，基于其特性优势开展的抗体药物研究逐渐受到关注。因此，研发针对il-13靶点的纳米抗体，将具有较大的临床价值，为哮喘、特异性皮炎等自身免疫性疾病的治疗提供新思路。
4、综上所述，本领域仍需开发出一种高亲和力和高特异性的抗il-13长效纳米抗体。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种高亲和力和高特异性的抗il-13长效纳米抗体。
2、本专利技术的另一目的是提供抗il-13长效纳米抗体的应用。
3、在本专利技术的第一方面，提供了一种抗il-13纳米抗体，所述纳米抗体中的vhh链的互补决定区cdr区为选自下组的一种或多种：
4、(1)seq id no:2所示的cdr1、seq id no:4所示的cdr2、和seq id no:6所示的cdr3；和
5、(2)seq id no:11所示的cdr1、seq id no:13所示的cdr2、和seq id no:15所示的cdr3。
6、在另一优选例中，所述的cdr1、cdr2和cdr3由vhh链的框架区fr1、fr2、fr3和fr4所隔开。
7、在另一优选例中，所述vhh链还包括框架区fr，所述的框架区fr为选自下组的一种或多种：
8、(1)seq id no:1所示的fr1、seq id no:3所示的fr2、seq id no:5所示的fr3、和seq id no:7所示的fr4；和
9、(2)seq id no:10所示的fr1、seq id no:12所示的fr2、seq id no:14所示的fr3、和seq id no:16所示的fr4。
10、在另一优选例中，所述的纳米抗体vhh链的cdr区包含与seq id no:2、4和6、seqid no:11、13和15任一具有至少80％、优选地至少90％、更优选地至少95％、甚至更优选地至少99％的序列相似性的氨基酸序列。
11、在另一优选例中，所述的纳米抗体vhh链cdr区的氨基酸序列与seq id no:2、4和6、seq id no:11、13和15中任一相比包含一个或多个氨基酸取代，优选保守氨基酸取代。
12、在另一优选例中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个(如1-3个，较佳地1-2个，更佳地1个)氨基酸并能保留与il-13特异性结合能力的衍生序列。
13、在另一优选例中，所述纳米抗体能够特异性结合il-13。
14、在另一优选例中，所述il-13为人或非人哺乳动物的il-13。
15、在另一优选例中，所述il-13为人、小鼠、大鼠、或非人灵长类动物(如猴)的il-13。
16、在另一优选例中，所述的纳米抗体包括人源化抗体、骆驼源抗体、嵌合抗体。
17、在另一优选例中，所述纳米抗体的vhh链的氨基酸序列选自下组：seq id no:8、seq id no:17、或其组合。
18、在另一优选例中，所述抗il-13纳米抗体包括单体、二价体(二价抗体)、四价体(四价抗体)、和/或多价体(多价抗体)。
19、在另一优选例中，所述抗il-13纳米抗体包括一条或多条具有如seq id no:8、seqid no:17所示的氨基酸序列的vhh链。
20、在另一优选例中，所述抗il-13纳米抗体包括两个具有如seq id no:8、seq idno:17所示的氨基酸序列的vhh链。
21、在另一优选例中，所述vhh链之间通过连接肽进行连接。
22、在另一优选例中，所述连接肽选自以下序列：(gasb)x，其中a，b，x＝0或1或2或3或4或5或6或7或8或9或10(较佳地，a＝4而b＝1，x＝4)。
23、在另一优选例中，所述连接肽的序列如seq id no:28所示。
24、在本专利技术的第二方面，提供了一种抗il-13抗体，它是针对il-13表位的抗体，并且具有本专利技术第一方面所述的抗il-13纳米抗体。
25、在另一优选例中，所述抗il-13抗体包括一个或多个抗il-13纳米抗体。
26、在另一优选例中，所述抗il-13抗体包括单体、二价体(二价抗体)、四价体(四价抗体)、和/或多价体(多价抗体)。
27、在另一优选例中，所述抗il-13抗体包括一条或多条具有如seq id no:8或seq idno:17所示的氨基酸序列的vhh链。
28、在另一优选例中，所述抗il-13抗体包括两条具有如seq id no:8或seq idno:17所示的氨基酸序列的vhh链。
29、在另一优选例中，所述的抗体能够特异性结合il-13。
30、在另一优选例中，所述的抗体具有能够有效阻断il-13诱导的hek-bluetm il-4/il-13细胞中seap的释放，且阻断活性显著优于对照抗体lebri本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗IL-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体中的VHH链的互补决定区CDR区为选自下组的一种或多种：
2.如权利要求1所述的抗IL-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的VHH链还包括框架区FR，所述的框架区FR为选自下组的一种或多种：
3.如权利要求1所述的抗IL-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的VHH链的氨基酸序列选自下组：SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:17、或其组合。
4.一种抗IL-13抗体，其特征在于，它是针对IL-13表位的抗体，并且具有权利要求1所述的抗IL-13纳米抗体。
5.如权利要求1所述的抗IL-13抗体，其特征在于，所述抗IL-13抗体包括一个或多个抗IL-13纳米抗体。
6.如权利要求4或5所述的抗IL-13抗体，其特征在于，所述抗IL-13抗体包括单体、二价体(二价抗体)、四价体(四价抗体)、和/或多价体(多价抗体)。
7.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的蛋白质：权利要求1所述的抗IL-13纳米抗体或权利要求4所述的抗IL-13
8.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求7所述的多核苷酸。
9.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求8所述的表达载体，或其基因组中整合有权利要求7所述的多核苷酸。
10.一种产生抗IL-13纳米抗体的方法，其特征在于，包括步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种抗il-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体中的vhh链的互补决定区cdr区为选自下组的一种或多种：
2.如权利要求1所述的抗il-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的vhh链还包括框架区fr，所述的框架区fr为选自下组的一种或多种：
3.如权利要求1所述的抗il-13纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体的vhh链的氨基酸序列选自下组：seq id no:8、seq id no:17、或其组合。
4.一种抗il-13抗体，其特征在于，它是针对il-13表位的抗体，并且具有权利要求1所述的抗il-13纳米抗体。
5.如权利要求1所述的抗il-13抗体，其特征在于，所述抗il-13抗体...
【专利技术属性】
技术研发人员：万亚坤，朱敏，盖军伟，李光辉，
申请(专利权)人：上海洛启生物医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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