【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体药物领域，具体地，涉及一种5t4纳米抗体及其应用。
技术介绍
1、5t4是一种细胞外高度糖基化的i型单次跨膜蛋白，包含420个氨基酸。其又称滋养层糖蛋白，是一种快速内化的细胞表面抗原。5t4具有阻断经典wnt/β-catenin通路和非经典wnt信号通路的双重作用。wnt信号通路在正常成熟的细胞中处于关闭状态，但在肿瘤细胞中活性增强，一方面5t4通过与lrp6的相互作用来抑制wnt/β-catenin经典通路的激活传导；另一方面其又通过激活非经典wnt信号通路来影响wnt通路。在正常成人组织中，5t4仅在几种上皮细胞中有表达，如基底层复层鳞状上皮、腺体和导管上皮，以及视网膜次级神经元。然而5t4在多种癌细胞中(如子宫癌、结肠癌、胃癌、卵巢癌、口腔癌、前列腺癌、肺癌或肾癌组织)都高表达。因此，该靶点被认为是理想的治疗靶点。
2、靶向5t4的药物开发已进入到临床研究阶段，包括治疗性疫苗、双抗、三抗、adc、car-nk等类型。其中由genmab开发的5t4/cd3双抗用于治疗膀胱癌、食管癌、非小细胞肺癌等正在进行ii期临床研究。由asana bioscience llc开发的adc药物用于治疗多种实体瘤正在进行i期临床研究。此类药物已被报道具有良好的治疗前景。
3、纳米抗体是一类源自驼科和鲨鱼科动物体内的小分子抗体，其大小仅有常规单抗的十分之一，具有良好的稳定性和成药性。与此同时，纳米抗体结构简单，易于改造成多价或多功能抗体，还可利用各种细胞体系进行表达生产。因此，纳米抗体被认为是新一代抗体
4、基于现有技术，本专利技术制备获得了靶向5t4的纳米抗体，具有良好的功能活性和成药性，为后续不同类型药物的开发奠定良好的基础。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供靶向5t4的纳米抗体及其药物偶联物，以及所述抗体和其药物偶联物在疾病诊断和治疗中的应用。
2、在本专利技术的第一方面，提供了一种抗5t4纳米抗体的vhh链，所述vhh链包含选自下组的互补决定区cdr：
3、(1)seq id no:1所示的cdr1、seq id no:2所示的cdr2和seq id no:3所示的cdr3；
4、(2)seq id no:10所示的cdr1、seq id no:11所示的cdr2和seq id no:12所示的cdr3；或
5、(3)seq id no:17所示的cdr1、seq id no:18所示的cdr2和seq id no:19所示的cdr3。
6、在另一优选例中，所述vhh链还包含框架区fr。
7、在另一优选例中，所述框架区fr包括骆驼源fr和人源fr。
8、在另一优选例中，所述框架区fr选自下组：
9、(1)seq id no:4所示的fr1、seq id no:5所示的fr2、seq id no:6所示的fr3和seq id no:7所示的fr4；
10、(2)seq id no:4所示的fr1、seq id no:13所示的fr2、seq id no:14所示的fr3和seq id no:7所示的fr4；或
11、(3)seq id no:20所示的fr1、seq id no:21所示的fr2、seq id no:22所示的fr3和seq id no:7所示的fr4。
12、在另一优选例中，所述框架区fr选自下组：
13、(1)seq id no:25所示的fr1、seq id no:26所示的fr2、seq id no:6所示的fr3和seq id no:27所示的fr4；
14、(2)seq id no:25所示的fr1、seq id no:30所示的fr2、seq id no:14所示的fr3和seq id no:27所示的fr4；或
15、(3)seq id no:33所示的fr1、seq id no:34所示的fr2、seq id no:22所示的fr3和seq id no:27所示的fr4。
16、在另一优选例中，所述抗5t4纳米抗体的vhh链具有如seq id no:8、15、23、28、31或38中任一项所示的氨基酸序列。
17、本专利技术的第二方面，提供了一种抗5t4纳米抗体，所述纳米抗体具有如本专利技术第一方面所述的vhh链。
18、在另一优选例中，所述抗5t4纳米抗体包括骆驼源纳米抗体、嵌合纳米抗体或人源化纳米抗体。
19、在另一优选例中，所述抗5t4纳米抗体包括单体、二价体(二价抗体)、四价体(四价抗体)、和/或多价体(多价抗体)。
20、在另一优选例中，所述抗5t4纳米抗体包括一条或多条具有如seq id no:8、15、23、28、31或38所示的氨基酸序列的vhh链。
21、本专利技术的第三方面，提供了一种抗5t4纳米抗体fc融合蛋白，所述融合蛋白从n端到c端的结构如式ia或ib所示：
22、a-l-b(ia)；
23、b-l-a(ib)；
24、其中，
25、a为如本专利技术第二方面所述的抗5t4纳米抗体；
26、b为igg的fc片段；和
27、l为无或柔性接头。
28、在另一优选例中，所述柔性接头为肽接头。
29、在另一优选例中，所述肽接头具有1-50个氨基酸，较佳地1-20个氨基酸。
30、在另一优选例中，所述igg的fc片段包括人的igg的fc片段。
31、在另一优选例中，所述肽接头具有(ggggs)n的结构，其中n为1-5的正整数。
32、在另一优选例中，所述igg的fc片段包括人的igg的fc片段。
33、在另一优选例中，所述igg的fc片段选自下组：igg1、igg2、igg3、igg4的fc片段、或其组合。
34、在另一优选例中，所述igg的fc片段为igg4。
35、本专利技术的第四方面，提供了一种多特异性抗体，所述多特异性抗体包含如本专利技术第一方面所述的抗5t4纳米抗体的vhh链、如本专利技术第二方面所述的抗5t4纳米抗体、和/或如本专利技术第三方面所述的抗5t4纳米抗体fc融合蛋白。
36、在另一优选例中，所述多特异抗体包括双特异性抗体、三特异性抗体等。
37、本专利技术的第五方面，提供了一种抗5t4纳米抗体的长效抗体，所述长效抗体包含如本专利技术第一方面所述的抗5t4纳米抗体的vhh链或如本专利技术第二方面所述的抗5t4纳米抗体，以及抗血清白蛋白纳米抗体部分。
38、在另一优选例中，所述长效抗体从n端到c端的结构如式iia或iib所示：
39、ab1-p-ab2(iia)；
40、ab2-p-ab1(iib)；
41、其中，
42、ab1包含如本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗5T4纳米抗体的VHH链，其特征在于，所述VHH链包含选自下组的互补决定区CDR：
2.一种抗5T4纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体具有如权利要求1所述的VHH链。
3.一种抗5T4纳米抗体Fc融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白从N端到C端的结构如式Ia或Ib所示：
4.一种多特异性抗体，其特征在于，所述多特异性抗体包含如权利要求1所述的抗5T4纳米抗体的VHH链、如权利要求2所述的抗5T4纳米抗体、和/或如本权利要求3所述的抗5T4纳米抗体Fc融合蛋白。
5.一种抗5T4纳米抗体的长效抗体，其特征在于，所述长效抗体包含如权利要求1所述的抗5T4纳米抗体的VHH链或如权利要求2所述的抗5T4纳米抗体，以及抗血清白蛋白纳米抗体部分。
6.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的蛋白：如权利要求1所述的抗5T4纳米抗体的VHH链、如权利要求2所述的抗5T4纳米抗体、如本权利要求3所述的抗5T4纳米抗体Fc融合蛋白、如权利要求4所述的多特异性抗体、或如权利要求5所述的抗5T4纳米抗体的长效抗体。
...【技术特征摘要】
1.一种抗5t4纳米抗体的vhh链，其特征在于，所述vhh链包含选自下组的互补决定区cdr：
2.一种抗5t4纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体具有如权利要求1所述的vhh链。
3.一种抗5t4纳米抗体fc融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白从n端到c端的结构如式ia或ib所示：
4.一种多特异性抗体，其特征在于，所述多特异性抗体包含如权利要求1所述的抗5t4纳米抗体的vhh链、如权利要求2所述的抗5t4纳米抗体、和/或如本权利要求3所述的抗5t4纳米抗体fc融合蛋白。
5.一种抗5t4纳米抗体的长效抗体，其特征在于，所述长效抗体包含如权利要求1所述的抗5t4纳米抗体的vhh链或如权利要求2所述的抗5t4纳米抗体，以及抗血清白蛋白纳米抗体部分。
6.一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：万亚坤，朱敏，盖军伟，李光辉，
申请(专利权)人：上海洛启生物医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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