【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种肿瘤类器官进行药物敏感性评价的方法。
技术介绍
1、卵巢癌症(oc)是女性常见的癌症，占所有女性癌症病例的2.5％，死亡率极高。由于早期诊断困难，oc往往诊断到晚期，导致治疗棘手。parp是一种在单链dna修复途径和碱基切除修复途径中发挥重要作用的蛋白质。parpi阻止dna单链断裂(ssb)的修复，并允许ssb的积累发展为需要同源重组的双链断裂(dsb)(hr)。这一过程导致hr缺乏的癌症细胞的合成致死性，并已被广泛研究。parpi已被批准为卵巢癌症的一种新的治疗选择，并表现出了极大的兴奋性。几种parpi抑制剂已经在临床环境中使用，即奥拉帕尼、尼拉帕利和鲁卡帕利。
2、然而，parpi的临床治疗仍然存在棘手的问题。在接受parpi 5治疗的人群中，45％的人出现复发。据报道，一名gbrcamt复发性卵巢癌症患者在出现parpi耐药后出现铂耐药。因此，在临床实践中越来越多地使用parpi引起了parpi耐药性的问题。迫切需要了解parpi抵抗的机制，以应对这一更棘手的问题，并为早期预防提供指导。
3、hr恢复、dna复制叉稳定、brca逆转突变、药物外排增加、parp1和标准杆数糖水解酶(parg)分离以及表观遗传分子修饰是parpi耐药的最常见机制。尽管已知涉及多种机制，但这些只是导致parpi耐药性的机制的一部分。随着越来越多的患者接受parpi的初始治疗和潜在的再治疗，需要更好地了解肿瘤获得parpi耐药性的机制。
4、因此，本领域迫切需要开发与
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供与临床oc组织高度相似的类器官模型用来检测药物敏感性。
2、本专利技术的第一方面，提供了一种肿瘤类器官在用于制备检测药物敏感性的模型中的用途。
3、在另一优选例中，所述药物包括化疗药物。
4、在另一优选例中，所述药物包括parp抑制剂。
5、在另一优选例中，所述药物包括卡铂(奥拉帕尼)。
6、在另一优选例中，所述肿瘤类器官用如下方法制备获得：
7、(a)在肿瘤类器官培养基的存在下，培养肿瘤组织，从而获得肿瘤类器官；其中，所述肿瘤类器官培养基包括卵巢癌类器官培养基、肠癌类器官培养基、胶质瘤类器官培养基、肝癌类器官培养基和皮肤癌类器官培养基。
8、在另一优选例中，所述卵巢癌类器官培养基包括dmem/f12(gibco11330-033)/n2(gibco 17502-048)/b27(gibco 17504-044)/glutamax(gibco35050061)/bfgf(humanzymehz-1272)/epidermal growth factor(egf；r&d systems 236-eg)/heparin(sigmah3393)/penicillin/streptomycin(gibco c14-15070-063)。
9、在另一优选例中，所述方法还包括以下步骤：
10、(b)在肿瘤类器官培养基的存在下，对步骤(a)获得的肿瘤类器官进行传代培养，获得经传代的肿瘤类器官。
11、在另一优选例中，所述培养为混合培养。
12、在另一优选例中，所述步骤(a)中，还包括获得2d贴壁细胞和3d细胞球的步骤。
13、在另一优选例中，在步骤(a)中，在肿瘤类器官培养基的存在下，培养5-50天，较佳地，10-30天，更佳地，15-25天。
14、在另一优选例中，所述方法不需要添加免疫细胞共培养。
15、在另一优选例中，所述肿瘤组织来自卵巢癌。
16、在另一优选例中，所述肿瘤类器官包括卵巢癌肿瘤类器官。
17、本专利技术第二方面提供了一种体外进行药物敏感性评价的方法，包括步骤：
18、(a)提供一肿瘤类器官；
19、(b)使用所述肿瘤类器官进行药物敏感性评价。
20、在另一优选例中，所述方法是非诊断和非治疗的。
21、在另一优选例中，所述肿瘤类器官包括卵巢癌肿瘤类器官。
22、在另一优选例中，在步骤(b)中，还包括步骤：用药物处理所述肿瘤类器官，从而判断肿瘤类器官对药物的敏感性。
23、在另一优选例中，所述药物包括化疗药物。
24、在另一优选例中，所述药物包括parp抑制剂。
25、在另一优选例中，所述药物包括卡铂(奥拉帕尼)。在另一优选例中，当选自下组的一种或多种指标发生如下变化时，则表明所述肿瘤类器官对药物更敏感：
26、(i)肿瘤类器官的大小和贴壁细胞的数量减少；
27、(ii)ki67阳性细胞在贴壁细胞中的比例显著下降；
28、(iii)早期细胞凋亡显著增加；
29、(iv)碱基切除修复相关基因表达下调；
30、(v)细胞循环相关基因表达发生改变(包括上调、下调)。
31、在另一优选例中，所述碱基切除修复相关基因包括：ung、pola2、pole4、smug1、fen1、pole3。
32、在另一优选例中，所述细胞循环相关基因包括：mcm10、cdkl5、mcm2、cdkn2b、cdk7、cdkn1c。
33、应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。限于篇幅，在此不再一一累述。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种肿瘤类器官在用于制备检测药物敏感性的模型中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物包括PARP抑制剂。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物包括卡铂(奥拉帕尼)。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤类器官用如下方法制备获得：
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述培养为混合培养。
6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤(a)中，还包括获得2D贴壁细胞和3D细胞球的步骤。
7.如权利要求4所述的用途，其特征在于，在步骤(a)中，在肿瘤类器官培养基的存在下，培养5-50天，较佳地，10-30天，更佳地，15-25天。
8.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述方法不需要添加免疫细胞共培养。
9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤类器官包括卵巢癌肿瘤类器官。
10.一种体外进行药物敏感性评价的方法，其特征在于，包括步骤：
【技术特征摘要】
1.一种肿瘤类器官在用于制备检测药物敏感性的模型中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物包括parp抑制剂。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物包括卡铂(奥拉帕尼)。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤类器官用如下方法制备获得：
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述培养为混合培养。
6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述步骤(a)中...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩欣欣，蔡春晖，曹琦，李蓝杨，王晨，
申请(专利权)人：上海礼升生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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