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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药,具体涉及nkain1基因在诊断和治疗结直肠癌中的应用。
技术介绍
1、结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一。结肠直肠癌属于胃肠道中常见的恶性肿瘤,早期症状不明显,随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状,晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。尽管结直肠癌有40%-50%的患者可通过手术治愈,但其余的患者会发生转移或复发并最终死于本病,而转移性的结直肠癌患者不进行治疗的话,中位生存时间仅为5-6个月。目前,手术治疗仍然是治疗大肠癌的主要手段。但是,对于晚期肿瘤或无法手术切除的患者,如何延长生存期是临床需要解决的重大问题。随着化疗方法的改进、分子靶向药物的应用,对于延长晚期、无法手术切除、复发、转移或常规放化疗无效的结直肠患者生存期有良好的效果。尽管目前我们有多种多样的治疗手段,但如何在这些策略中选择适合患者的最佳治疗方案,又有哪些预后因子或疗效预测因子可以用来指导临床治疗依然是个难题。
2、结直肠癌是一类临床上非常常见的消化系统肿瘤。根据最新公开的中国中晚期结直肠癌患者诊疗现状调查结果,83%的患者确诊时已经发展至中晚期,44%的患者发生了肝、肺等部位的转移,因此药物治疗方案、全身治疗方案在结直肠癌的治疗中占据着非常重要的地位。药物靶标是药物作用而实现疗效的目标分子,新靶标的发现对于创新药物的研发具有重大的促进作用。结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,其发病与生活方式的改变及膳食结构不合理密切相关,构建合适的小鼠结肠癌模型是研究人类疾病机理、发现药物研发中的新靶标的好工具。近
3、钠/钾转运atp酶相互作用(sodiμm/potassiμm transporting atpaseinteracting 1,简称nkain1;μniprot id:(hμman)q4kmz8;entrez gene id:(hμman)203102)基因是一个蛋白质编码基因,其属于na,k-atpase的β亚基相互作用的新型跨膜蛋白家族成员,利用能量泵维持细胞内外离子和渗透压平衡,目前未有关于nkain1与结直肠癌关联以及nkain1在筛选用于防治结直肠癌药物中的用途的报道。
技术实现思路
1、针对目前临床上对靶向新靶标的防治结直肠癌药物的需求,本专利技术的目的在于提供nkain1基因在诊断和治疗结直肠癌中的应用,可有效解决现有技术中筛选适合用于防治结直肠癌药物困难的问题,为结直肠癌的治疗提供了一条有效的新途径。
2、为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案为:
3、第一方面,本专利技术提供了一种标志物检测试剂在制备诊断结直肠癌的产品中的应用,所述标志物为nkain1基因。nkain1基因在结直肠癌细胞株中高表达。
4、本专利技术首次确定了nkain1基因和结直肠癌的关系,抑制nkain1表达具有延缓结直肠癌进程、延长病人生存期的作用。
5、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述标志物检测试剂是用于测定nkain1基因表达量的试剂。
6、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述测定nkain1基因表达量的试剂包括检测nkain1基因的信使rna(mrna)或其片段的试剂、检测nkain1基因的互补dna(cdna)或其片段的试剂、检测nkain1基因编码的蛋白质或其变体的试剂。
7、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述产品选自芯片、试剂盒或试纸。本专利技术的产品不仅限于此,所选用的产品为本领域中常制备的产品类型,只要能实现本专利技术的目的即可。
8、第二方面,本专利技术提供了一种抑制标志物表达的试剂在制备治疗结直肠癌的药物中的应用,所述标志物为nkain1基因。
9、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述抑制标志物表达的试剂包括特异于nkain1基因的sirna、特异于nkain1基因的反义寡核苷酸、特异于nkain1基因的核酶、nkain1基因的抑制性抗体。
10、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述特异于nkain1基因的sirna包括sirna1、sirna2和sirna3中的至少一种;
11、所述sirna1的正义链的核苷酸序列如seq id no:1所示,所述sirna1的反义链的核苷酸序列如seq id no:2所示;
12、所述sirna2的正义链的核苷酸序列如seq id no:3所示,所述sirna2的反义链的核苷酸序列如seq id no:4所示;
13、所述sirna3的正义链的核苷酸序列如seq id no:5所示,所述sirna3的反义链的核苷酸序列如seq id no:6所示。
14、sirna1、sirna2和sirna3可以干扰nkain1基因,抑制nkain1基因的表达,干扰效率高,特异性好,为研究nkain1基因奠定了基础。
15、优选地,所述特异于nkain1基因的sirna为sirna2。
16、sirna2干扰nkain1基因的效果最优,更佳的抑制nkain1基因的表达。nkain1基因干扰后的sw480细胞凋亡率大大增加,细胞周期阻滞在g0/g1期。
17、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述nkain1基因的抑制性抗体为单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体。
18、作为本专利技术所述应用的优选实施方式,所述nkain1基因的抑制性抗体为多克隆抗体,所述的多克隆抗体抗原是hμman nkain1:31-130/207<extracellμlar>。
19、特异性nakin1抗体能够抑制结直肠癌的增值、迁移、浸袭。
20、在一些实施例中,nkain1抗体对sw480细胞和ht29细胞有抑制作用,抗体最佳抑制浓度约在30μg/ml;nkain1基因干扰后的sw480细胞增值率降低率约30%;nkain1基因干扰后的sw480细胞迁移率降低率约20%;nkain1基因干扰后的sw480细胞浸袭能力降低约30%。
21、第三方面,本专利技术提供了一种药物筛选系统,所述药物筛选系统包括:
22、(1)检测模块,所述检测模块用于检测药物对于nkain1基因表达的抑制作用。
23、(2)分析模块,所述分析模块用于根据所述检测模块输出数据,输出所述药物用于治疗结直肠癌的效果。
24、第四方面,本专利技术提供了一种结直肠癌诊断系统,所述诊断系统包括:
25、(1)检测装置,其中所述检测装置用于检测nkain1基因表达量。
26、(2)分析装置,其中所述分析装置用于根据所述检本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种标志物检测试剂在制备诊断结直肠癌的产品中的应用,其特征在于,所述标志物为NKAIN1基因。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述标志物检测试剂是用于测定NKAIN1基因表达量的试剂。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述测定NKAIN1基因表达量的试剂包括检测NKAIN1基因的信使RNA或其片段的试剂、检测NKAIN1基因的互补DNA或其片段的试剂、检测NKAIN1基因编码的蛋白质或其变体的试剂。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述产品选自芯片、试剂盒或试纸。
5.一种抑制标志物表达的试剂在制备治疗结直肠癌的药物中的应用,其特征在于,所述标志物为NKAIN1基因。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述抑制标志物表达的试剂包括特异于NKAIN1基因的siRNA、特异于NKAIN1基因的反义寡核苷酸、特异于NKAIN1基因的核酶、NKAIN1基因的抑制性抗体。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述特异于NKAIN1基因的siRNA包括siRNA1、siRNA2
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述NKAIN1基因的抑制性抗体为单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体。
9.一种药物筛选系统,其特征在于,所述药物筛选系统包括:
10.一种结直肠癌诊断系统,其特征在于,所述诊断系统包括:
...【技术特征摘要】
1.一种标志物检测试剂在制备诊断结直肠癌的产品中的应用,其特征在于,所述标志物为nkain1基因。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述标志物检测试剂是用于测定nkain1基因表达量的试剂。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述测定nkain1基因表达量的试剂包括检测nkain1基因的信使rna或其片段的试剂、检测nkain1基因的互补dna或其片段的试剂、检测nkain1基因编码的蛋白质或其变体的试剂。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述产品选自芯片、试剂盒或试纸。
5.一种抑制标志物表达的试剂在制备治疗结直肠癌的药物中的应用,其特征在于,所述标志物为nkain1...
【专利技术属性】
技术研发人员:张红雨,曾凡新,全源,陈白雪,刘琴,李洁,
申请(专利权)人:华中农业大学,
类型:发明
国别省市:
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