【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物传感检测，具体涉及一种展青霉素适配体及其传感检测应用。
技术介绍
1、展青霉素(patulin，pat)是一种由真菌(如葡萄曲霉属aspergillus属)产生的具有生物活性的有毒次级代谢产物，主要存在于苹果、葡萄和番茄等蔬果中，对人体有一定的危害。摄入过量的展青霉素可能导致恶心、呕吐、腹泻、腹痛等消化道症状。对于儿童、孕妇和免疫功能低下的人群，摄入过量的展青霉素可能会导致肝脏损伤、肾脏损伤等严重的健康问题。此外，展青霉素还具有致癌性，长期摄入过量的展青霉素可能增加患癌症的风险。为了保障食品安全，目前已有多种方法用于检测pat，例如高效液相色谱法，液相色谱-串联质谱法，酶联免疫分析法。这些方法虽然灵敏度高，但仪器昂贵，样品前处理复杂，耗时长。因此，需要建立一种低成本的食品中展青霉素的快速检测方法。
2、核酸适配体是一种能够与特定目标分子特异性结合的寡核苷酸序列。具有高特异性、高亲和力、低毒性、稳定性好等优点。目前，针对同一靶标采用不同方法筛选得到的不同序列的适配体，其亲和力有区别。而且，不是每个核酸适配体序列都参与和靶标的结合。去除多余的序列不仅降低合成成本，减少对反应的干扰，还可以提高核酸适配体的亲和力。
3、分子对接和分子动力学模拟在适配体筛选过程中发挥重要作用。分子对接主要通过计算机模拟技术预测小分子配体与受体之间的结合模式，利用结合模式的信息预测这两个分子的结合强弱。分子动力学可以模拟分子体系在时间和空间上的运动，揭示分子体系的微观演变过程。利用分子动力学可以评估反应体系的稳定性
4、纳米酶作为一种新型模拟酶，与天然酶相比具有成本低、稳定性好、使用效率高及适用条件广等优点。自2007年首次报道fe3o4具有类过氧化物酶活性之后。开发了一些基于fe3o4类酶活性的检测方法，用于检测h2o2、葡萄糖、抗体和肿瘤细胞等物质。然而，基于fe3o4和适配体检测pat以前没有报道。
技术实现思路
1、本专利技术的第一目的是提供了一种特异性强、亲和力高的展青霉素适配体。本专利技术的第二目的是提供了一种上述展青霉素适配体的应用。本专利技术的第三目的是提供了一种含有上述展青霉素适配体的试剂盒。本专利技术的第四目的是提供了一种检测展青霉素的方法。
2、技术方案：本专利技术提供了展青霉素适配体，其核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、本专利技术还提供了上述展青霉素适配体在制备检测展青霉素检测试剂、试剂盒或传感器中的应用。
4、本专利技术还提供了检测展青霉素的试剂盒，包括含有上述的展青霉素适配体的生物传感器。
5、其中，所述生物传感器还包括四氧化三铁纳米溶液。
6、其中，所述试剂盒还包括醋酸钠缓冲液、tmb和h2o2。
7、本专利技术还提供了检测展青霉素的方法，包括以下步骤：
8、(1)将权利要求1所述的展青霉素适配体与不同浓度的展青霉素标准溶液混合，振荡孵育；加入四氧化三铁纳米溶液和醋酸钠缓冲液，振荡孵育；加入tmb和h2o2，反应结束后检测不同浓度的展青霉素标准溶液吸光度，绘制标准曲线；
9、(2)将展青霉素标准溶液换为待检测溶液，与展青霉素适配体混合，振荡孵育；加入四氧化三铁纳米溶液和醋酸钠缓冲液，振荡孵育；加入tmb和h2o2，反应结束后检测溶液吸光度，代入标准曲线即可获得待测溶液中展青霉素的浓度。
10、其中，所述振荡孵育时间至少为30min。
11、其中，所述检测吸光度的波长为652nm。
12、其中，所述加入tmb和h2o2后的反应时间为10min。
13、其中，所述待检测溶液包括苹果汁、葡萄汁。
14、其中，所述四氧化三铁纳米溶液的制备步骤包括：取六水氯化铁溶解于乙二醇中，搅拌至完全溶解；加入naac和peg-4000，搅拌，高温反应；反应结束后固液分离，用无水乙醇和去离子水洗涤，所得固体加入醋酸钠缓冲液即得四氧化三铁纳米溶液。
15、在上述检测方法中，当四氧化三铁与展青霉素适配体复合物体系中不存在靶标时，向体系中加入tmb和h2o2后，由于适配体吸附在fe3o4表面，体系中的吸光度值降低。当四氧化三铁与展青霉素适配体复合物体系中存在靶标时，向体系中加入tmb和h2o2后，由于靶标和适配体特异性结合，体系中的吸光度相较于不存在靶标时有所恢复，对两种情况下的吸光度进行计算，从而实现对展青霉素的检测。
16、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下突出的显著优点：本专利技术的展青霉素适配体具有高特异性及亲和力，与四氧化三铁纳米酶构成的生物传感器用于检测展青霉素，检测成本低、检测过程操作简单、检测时间短，适用性更为广泛。
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1.一种展青霉素适配体，其特征在于，所述展青霉素适配体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的展青霉素适配体在制备检测展青霉素检测试剂、试剂盒或传感器中的应用。
3.一种检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，包括含有权利要求1所述的展青霉素适配体的生物传感器。
4.根据权利要求3所述的检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，所述生物传感器还包括四氧化三铁纳米溶液。
5.根据权利要求4所述的检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括醋酸钠缓冲液、TMB和H2O2。
6.一种检测展青霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的检测展青霉素的方法，其特征在于，所述振荡孵育时间至少为30min；所述加入TMB和H2O2后的反应时间为10 min。
8.根据权利要求6所述的检测展青霉素的方法，其特征在于，所述检测吸光度的波长为652 nm。
9.根据权利要求6所述的检测展青霉素的方法，其特征在于，所述待检测溶液包括苹果汁、葡萄汁。
10.根
...【技术特征摘要】
1.一种展青霉素适配体，其特征在于，所述展青霉素适配体核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的展青霉素适配体在制备检测展青霉素检测试剂、试剂盒或传感器中的应用。
3.一种检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，包括含有权利要求1所述的展青霉素适配体的生物传感器。
4.根据权利要求3所述的检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，所述生物传感器还包括四氧化三铁纳米溶液。
5.根据权利要求4所述的检测展青霉素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括醋酸钠缓冲液、tmb和h2o2。
6.一种检测展青霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要...
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