核酸适配体、传感器、检测试剂盒及其在检测四氢叶酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了核酸适配体、传感器、检测试剂盒及其在检测四氢叶酸中的应用。本发明专利技术利用指数级富集配体的系统进化技术，以磁珠为分离介质以及以四氢叶酸为靶标，通过9轮筛选获得与靶标特异结合的多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示的核酸适配体，该核酸适配体与四氢叶酸亲和力极高，解离常数达到μM，对四氢叶酸的主要干扰物质叶酸和五甲基四氢叶酸不能进行结合，只特异性结合四氢叶酸，具有良好的亲和力和特异性；本发明专利技术提供的核酸适配体可人工合成、成本低、生产周期短、易于化学修饰，可将该适核酸配体制备成传感器、分子探针或检测试剂等用于生物样本中四氢叶酸的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸适配体，尤其涉及特异识别四氢叶酸的核酸适配体以及含有该核酸适配体的传感器、检测探针或检测试剂盒及其在检测四氢叶酸中的应用，属于核酸适配体及其应用领域。

技术介绍

1、四氢叶酸（thf)是叶酸在体内的活性形态之一，是一碳基团转移酶的辅酶，具有传递一碳基团的作用，是许多生物合成反应所必需的辅酶。若生物体内缺乏四氢叶酸，会使多种生物合成反应受阻，最典型的表现为血红细胞的发育和成熟受到影响，易发生巨幼红细胞性贫血症等。因此，在生物组织中监测thf，对早期疾病的发生有重要作用。

2、目前，检测叶酸及其活性形态的主要检测方法是采用高效液相质谱（hplc-ms）法，联用技术基于高效液相质谱法检测，但是其成本高，操作复杂，很大程度限制了其在检测行业的广泛应用。市场上销售的快速检测试剂盒，多针对叶酸受体进行检测，几乎未见针对叶酸或者四氢叶酸直接检测的试剂盒。鉴于目前四氢叶酸检测难度大、成本高等问题，因此，发展一种新型识别分子，对生物样品中四氢叶酸含量测定具有重要的实践意义，可进一步开发四氢叶酸快速检测方法，如试剂盒等。>

3、核酸适配本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.特异性识别四氢叶酸的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体选自以下(a)-(d)所述的任何一种核苷酸序列：

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的多核苷酸序列与SEQ ID No.1的多核苷酸序列至少有80%以上同源性，且该多核苷酸序列仍能特异性结合四氢叶酸。

3.根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的多核苷酸序列与SEQ ID No.1的多核苷酸序列至少有90%以上同源性，且该多核苷酸序列仍能特异性结合四氢叶酸。

4.根据权利要求1-3任何一项所述的核酸适配体，其特征在于，将所述核酸适配体序列...

【技术特征摘要】

1.特异性识别四氢叶酸的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体选自以下(a)-(d)所述的任何一种核苷酸序列：

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的多核苷酸序列与seq id no.1的多核苷酸序列至少有80%以上同源性，且该多核苷酸序列仍能特异性结合四氢叶酸。

3.根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的多核苷酸序列与seq id no.1的多核苷酸序列至少有90%以上同源性，且该多核苷酸序列仍能特异性结合四氢叶酸。

4.根据权利要求1-3任何一项所述的核酸适配体，其特征在于，将所述核酸适配体序列进行修饰，其中，所述修饰的方式包括磷酸化、甲基化、氨基化、羧基化、巯基化或同位素化修饰；或者所述的修饰的方式是将所述核酸适配体的序列的5’端或3’端连接荧光标记物、放射性物质、生物素、链霉亲和素、地高辛、纳米发光材料或酶。

5.一种检测四氢叶酸的核酸适配体传感器，该核酸适配体传感器包括pcr引物以及特异结合四氢叶酸的核酸适配体；其特征在于，所述的特异结合四氢叶酸的核酸适配体是权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：余雅男，张军民，秦玉昌，汤超华，赵青余，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：