靶向清除allo-B淋巴细胞的CAR-T细胞的构建方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞的构建方法和应用，属于移植排斥治疗领域。本发明专利技术结合第二代CAR结构，构建靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞。Allo‑B细胞的BCR可与上述构建的靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞结合，可通过CAR‑T细胞的作用特异性杀伤产生抗HLA抗体的Allo‑B淋巴细胞。本发明专利技术制备的CAR‑T细胞通过减轻或消除抗HLA抗体介导的移植排斥反应，从而实现移植免疫耐受的目的。本发明专利技术为开发靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞杀伤Allo‑B细胞在移植排斥领域中的应用奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于移植排斥治疗领域，具体涉及一种靶向清除allo-b淋巴细胞的car-t细胞的构建方法及其应用。

技术介绍

1、器官移植是终末期器官衰竭患者的最佳治疗选择。尽管取得了部分成功，器官移植仍然面临许多困难，例如供体器官的来源有限、免疫抑制药物的副作用和免疫排斥反应。最理想的要求是需要供体和患者的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，hla)完全匹配(零错配)，但由于hla具有多态性，达到供受者hla零错配是非常困难的。为了防止患者针对不匹配的hla产生体液免疫排斥反应，当前治疗移植排斥反应的措施是终身服用免疫抑制剂，和用抗cd20单克隆抗体清除所有的b淋巴细胞，但此类方法会引起许多副作用，例如心血管并发症，慢性感染和发生恶性肿瘤的风险。

2、allo-反应性b细胞(allo-b细胞)是人体针对同种异体抗原发生免疫反应的一类b细胞，其产生的抗体称为抗同种异型抗体，如抗hla-ⅰ类和ⅱ类抗体。移植前预存的针对错配供体hla的抗体可介导超急性体液排斥反应。因此控制或清除allo-反应性b细胞可减少抗hla抗体的产生，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向清除allo-B淋巴细胞的CAR-T细胞，其特征在于：CAR结构包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域的3个功能区域；所述胞外结构域包括CD8信号肽、HLA-Ⅰ类分子、CD8铰链区，所述跨膜结构域包括CD8跨膜结构域，所述胞内结构域包括4-1BB共刺激分子和免疫受体酪氨酸活化基序CD3zeta。

2.根据权利要求1所述的靶向清除allo-B淋巴细胞的CAR-T细胞，其特征在于：所述HLA-Ⅰ类分子结构包括α1、α2、α3和β2m片段；所述HLA-Ⅰ类分子能特异性结合抗HLA-Ⅰ类分子抗体。

3.根据权利要求1所述的靶向清除allo-B淋巴细胞的CAR-...

【技术特征摘要】

1.一种靶向清除allo-b淋巴细胞的car-t细胞，其特征在于：car结构包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域的3个功能区域；所述胞外结构域包括cd8信号肽、hla-ⅰ类分子、cd8铰链区，所述跨膜结构域包括cd8跨膜结构域，所述胞内结构域包括4-1bb共刺激分子和免疫受体酪氨酸活化基序cd3zeta。

2.根据权利要求1所述的靶向清除allo-b淋巴细胞的car-t细胞，其特征在于：所述hla-ⅰ类分子结构包括α1、α2、α3和β2m片段；所述hla-ⅰ类分子能特异性结合抗hla-ⅰ类分子抗体。

3.根据权利要求1所述的靶向清除allo-b淋巴细胞的car-t细胞，其特征在于：所述的cd8信号肽氨基酸序列，如seq id no.1所示；

4.根据权利要求1所述的靶向清除allo-b淋巴细胞的car-t细胞，其特征在于：所述car结构的核苷酸序列由依次排列的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹义洲，陆小芳，位磊艳，郭俊爽，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：