【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生物技术和制药工业领域，特别是涉及获得针对寨卡病毒的重组蛋白抗原和疫苗组合物。
技术介绍
1、寨卡病毒属于黄病毒科黄病毒属(kuno&chang,2007,arch virol,152:687-696)，其包括如黄热病病毒、日本脑炎病毒、西尼罗病毒、蜱传脑炎病毒和登革热病毒等其它病原体。寨卡病毒通过伊蚊属被感染的蚊子的叮咬传播给人(kindhauser等人,2016,bullworld health organ,94:675-686c)，所述蚊子主要分布在热带和亚热带地区(sharma&lal,2017,front microbiol,8:110-)。寨卡病毒是具有正单链rna的包膜病毒，所述正单链rna被翻译成多蛋白，该多蛋白在翻译中和翻译后被切割成十种单独的蛋白(kuno&chang,2007,arch virol,152:687-696)：三种结构蛋白和七种非结构蛋白，所述蛋白参与病毒复制、病毒组装和免疫系统逃避(sirohi等人,2016,science,352:467-470)。结构蛋白是：衣壳蛋白(c)、包膜蛋白(e)和膜蛋白(m)或膜前体蛋白(prm))。非结构蛋白被称为ns1、ns2a、ns2b、ns3、ns4a、ns4b和ns5。
2、迄今为止，已有三次寨卡病毒的重大疫情，第一次发生于2007年的密克罗尼西亚联邦，约有7,000人感染，但未出现严重并发症(duffy等人,2009,n engl j med,360:2536-2543)。2013年，法属波利尼西亚
3、2016年，世界卫生组织(who)宣布寨卡病毒引起的疾病为“国际关注的公共卫生紧急事件”。2017年，48个国家报告了该疾病通过蚊子感染的传播，累计510,000例疑似病例和超过170,000例确诊病例(yun&lee,2017,j microbiol,55:204-219)。截至2019年，分布在六个who地区中的四个地区(非洲、东南亚、西太平洋和美洲)的87个国家报告了寨卡病毒通过受感染的蚊虫叮咬的本地传播。特别式对于这种病毒，除了病媒传播之外，其它传播途径诸如性传播、怀孕期间的母婴传播和输血也是可能的(frank等人,2016,euro surveill,21)。
4、感染后，人会出现“登革热样综合征”的临床表现，所述临床表现可能是轻微的或无症状的，大约80％的感染是无症状的(grossi-soyster&labeaud,2017,curr opinpediatr,29:102-106)。一般来说，症状性病例是轻微的，并且可包括皮疹、发热状态、关节炎、关节痛、非化脓性结膜炎和四肢水肿(calvet等人,2016,curr opin infect dis,29:459-466)。还可能出现其它症状，诸如：头痛、肌痛、眶后疼痛、下背痛、淋巴结肿大和呕吐(brasil等人,2016,plos negl trop dis,10:e0004636)。这种疾病通常是轻微的；然而，有死亡病例的报告(特别是在患有潜在疾患的人中)(arzuza-ortega等人,2016,emerginfect dis,22:925-927)。
5、早期数据表明，对寨卡病毒的免疫反应与其它黄病毒相似，其中针对e蛋白的中和抗体(fernandez&diamond,2017,curr opin virol,23:59-67)，构成了保护免受感染的主要要素(sapparapu等人,2016年,nature,540:443-447)。e蛋白在病毒体表面暴露最多的蛋白质，其参与病毒融合和进入宿主细胞(larocca等人,2016,nature,536:474-478)。然而，黄病毒之间，尤其是登革热病毒与寨卡病毒之间的高水平交叉反应性阻碍了抗体区分两种病毒感染的作用(kostyuchenko等人,2016,nature,533:425-428)。
6、到目前为止，还不确定针对寨卡病毒产生的抗体是否可通过抗体依赖性感染增强现象促进对另一种相关黄病毒的病毒感染，如对于登革病毒所充分记载的。也不知道针对寨卡病毒产生的免疫反应是否会影响随后的登革热病毒感染或反之亦然，也不知道神经学损伤(诸如在一些患者中观察到的吉兰-巴雷综合征)是直接病毒感染的后果还是免疫反应的继发效应(poland等人,2018,lancet infect dis,18:e211-e219)。
7、另一方面，最近的研究表明，t细胞对寨卡病毒感染的反应具有重要作用。使用来自对病毒免疫的人的外周血单核细胞(pbmc)，已经鉴定了细胞免疫反应的主要靶标。其主要针对结构蛋白c和prm以及非结构蛋白ns2和ns5(xu等人,2016,plos curr,8:,elong等人,2017,cell host microbe,21:35-46)。
8、目前，使用多种抗原递送方法开发超过40种抗寨卡病毒的候选疫苗，包括灭活病毒疫苗、减毒疫苗、dna和mrna疫苗、基于病毒载体的疫苗和亚单位疫苗(barouch等人,2017,immunity,46:176-182)。然而，其中一些方法存在诸如其生产成本高和安全性低等不利方面，这为亚单位疫苗开辟了道路。
9、在亚单位疫苗中，获得了含有80％的e蛋白(liang等人,2018,plos one,13:e0194860-；qu等人,2018,antiviral res,154:97-103)或e蛋白结构域iii(ediii)(qu等人,2018,antiviral res,154:97-103)的重组变体。具体而言，根据将该区域作为其他黄病毒的候选区域所取得的结果，ediii区域作为一种有前途的免疫原出现(beltramello等人,2010,cell host microbe,8:271-283)。使用重组ediii区域的几项研究表明，在小鼠中诱导了抗病毒攻击的体液和细胞免疫反应并提供保护作用(yang等人,2017,sci rep,7:7679-；qu等人,2018,antiviral res,154:97-103)。然而，并非所有这些策略都能够在更接近人的动物模型中本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种重组嵌合抗原，其在其多肽链中包含对应于寨卡病毒衣壳蛋白的第2至第104个氨基酸的多肽或具有与寨卡病毒衣壳蛋白的所述区域具有几乎90％的同一性的氨基酸序列的多肽。
2.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原额外包含对应于包膜蛋白结构域III的多肽或具有与寨卡病毒包膜蛋白的该结构域具有几乎90％的同一性的氨基酸序列的多肽。
3.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原在其多肽链的N末端中额外包含六个组氨酸残基的区段。
4.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原具有标识为SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
5.一种疫苗组合物，其包含根据权利要求1至4的重组嵌合抗原和药学上批准的疫苗佐剂。
6.根据权利要求5的疫苗组合物，其中所述佐剂是铝盐。
7.根据权利要求5的疫苗组合物，其中所述抗原以每剂量10-150微克的量存在。
8.根据权利要求5的疫苗组合物，所述疫苗组合物额外包含具有标识为SEQ ID NO:11的核苷酸序列的核酸。
9.根据权利要求1至4中任一项
10.一种用于在人中诱导抗寨卡病毒的免疫反应的方法，其中施用药物有效量的根据权利要求1至4中任一项的重组嵌合抗原和药学上批准的佐剂。
11.权利要求10的方法，其中所述佐剂是铝盐。
12.权利要求10的方法，其中所述重组嵌合抗原的药物有效量在每剂量10-150微克的范围内。
13.权利要求10的方法，其中与所述重组嵌合抗原组合额外施用具有标识为SEQ IDNO:11的核苷酸序列的核酸。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种重组嵌合抗原，其在其多肽链中包含对应于寨卡病毒衣壳蛋白的第2至第104个氨基酸的多肽或具有与寨卡病毒衣壳蛋白的所述区域具有几乎90％的同一性的氨基酸序列的多肽。
2.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原额外包含对应于包膜蛋白结构域iii的多肽或具有与寨卡病毒包膜蛋白的该结构域具有几乎90％的同一性的氨基酸序列的多肽。
3.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原在其多肽链的n末端中额外包含六个组氨酸残基的区段。
4.根据权利要求1的嵌合抗原，所述嵌合抗原具有标识为seq id no:9或seq id no:10的氨基酸序列。
5.一种疫苗组合物，其包含根据权利要求1至4的重组嵌合抗原和药学上批准的疫苗佐剂。
6.根据权利要求5的疫苗组合物，其中所述佐剂是铝盐。
【专利技术属性】
技术研发人员：I·瓦尔德斯普拉多，L·吉尔冈萨雷斯，L·拉索巴斯克斯，L·赫米达克鲁兹，G·E·古兰尼托，K·科瓦斯阿科斯塔，Y·罗梅罗费尔南德斯，A·J·布鲁诺达德尔，E·苏扎尔特波尔塔尔，Y·D·L·C·佩雷斯富恩特斯，
申请(专利权)人：遗传工程与生物技术中心，
类型：发明
国别省市：
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