【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药及护肤品，具体涉及芍药提取物—芍药苷在改善敏感性皮肤的临床治疗与医疗美容中的新用途。
技术介绍
1、敏感性皮肤是皮肤对外界刺激产生的一种不愉悦的感觉(刺痛、烧灼感、疼痛、瘙痒、刺麻等)，而正常情况下这类刺激并不会导致皮肤出现此类症状，且该症状不能完全用其他皮肤病的皮损解释。患处皮肤外观可正常，也可伴有红斑。敏感性皮肤可累及全身皮肤，但面部尤为常见。目前，敏感性皮肤患病率逐年升高，其全球患病率接近40％(36.9％)，部分地区可达到50％-70％。敏感性皮肤的病理生理机制非常复杂，当前的研究共识认为主要与三个方面有关：皮肤屏障功能降低，皮肤感觉神经障碍，免疫反应增强。由于敏感性皮肤给病人生活和心理带来巨大的困扰，而目前又缺乏强有效的治疗方法，因此对于敏感性皮肤治疗方法的研究与探索十分迫切。
2、角质形成细胞是最主要的表皮细胞类型，与敏感性皮肤的病理生理有密切联系。在敏感性皮肤条件下，角质形成细胞角质细胞分泌多种免疫调节因子，如神经生长因子(ngf)、白介素-1(il-1)、白介素-6(il-6)、白介素-8(il-8)、前列腺素e2(pge2)、环氧合酶2(cox2)等炎症因子，导致皮肤局部炎症。角质形成细胞也表达存在于感觉神经元上的各种感觉受体，如瞬时受体电位(trp)家族的受体，包括trpv1和trpv4，参与痛觉的感受与传导。现有研究表明，在敏感性皮肤患者的角质形成细胞中，trpv-1活化程度较正常角质形成细胞明显升高，且trpv-1活化程度与敏感性皮肤症状严重程度成正比。当敏感性皮肤受到h+、
3、芍药苷是植物芍药的提取物，属于水溶性单萜类糖苷，呈白色无定形粉末状，具有吸湿性，毒副作用小，是中药赤芍的主要活性成分。既往研究证实，芍药苷具有明确的抗炎作用，可以通过减少il-1β、il-6、il-8、tnf-α、pge2等炎症因子合成、减少细胞内钙离子流、减少炎症小体产生、和降低nf-κb通路等方式抑制细胞的炎症反应。并且芍药苷对组织的刺激性小，对神经末梢具有保护作用，能降低皮肤表面对外界刺激的反应，因此芍药苷也有缓解敏感性皮肤对外界刺激高反应状态的可能。目前已有研究表明，芍药苷对trpv-1受体有抑制作用，但是芍药苷用于改善敏感性皮肤方面未见有报道。本专利技术通过研究芍药苷对人类角质形成细胞的生物学特性的影响，探索抑制人类角质形成细胞炎症反应及trpv-1介导皮肤高反应状态的新途径，从细胞学层面阐释芍药苷改善、治疗敏感性皮肤的机制，用于敏感性皮肤的临床治疗与医疗美容。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种芍药提取物——芍药苷在改善敏感性皮肤的临床治疗与医疗美容中的新用途。
2、本专利技术通过细胞模型实验，结果证实芍药苷在安全浓度下不影响人类角质形成细胞的细胞活性，且在正常生理条件下不促进人类角质形成细胞的炎症反应、不上调trpv-1受体的表达；并且在敏感性皮肤条件下，可有效抑制人类角质形成细胞的炎症反应、下调trpv-1受体的表达。本专利技术公开了一种利用芍药提取物治疗黄褐斑的技术，并从细胞学层面阐释具体机制，能够作为敏感性皮肤的潜在治疗手段。
3、本专利技术具体筛选步骤如下：
4、(1)人类角质形成细胞培养：选取代表人类角质形成细胞的细胞系——人类永生化表皮细胞(hacat)，以2×105/ml的密度接种于t25，37℃培养，定期更换培养基【90％dmem+10％fbs+双抗(链霉素、青霉素)】，根据细胞生长状态2-3天传代一次；
5、(2)芍药提取物干预：使用分析纯芍药苷结晶，根据后续实验剂量需要，用上述培养基溶解为不同浓度，分别替代原培养基进行干预，干预时间为24小时；干预完毕后取细胞样本进行后续实验；
6、(3)芍药苷安全剂量的筛选：使用光学显微镜观察细胞形态，使用cck8法测定细胞活性和凋亡情况，检测不同浓度芍药苷干预24小时后对细胞活性的影响，筛选出芍药苷对人类角质形成细胞活性无影响的浓度：0.01-0.2mg/ml；该浓度是指芍药苷溶解在水溶液中的浓度；
7、(4)根据步骤3的筛选结果，应用含芍药苷0.01-0.2mg/ml的培养基培养hacat细胞，通过rt-pcr和elisa检测炎症因子il-1、il-6、il-8基因和蛋白水平的表达，rt-pcr和western blot检测trpv-1受体基因和蛋白水平的表达；
8、(5)根据步骤3的筛选结果，先用含天然辣椒素0.01mg/ml的培养基培养hacat细胞24小时，构建敏感性皮肤模型，随后应用含芍药苷0.01-0.2mg/ml的培养基培养hacat细胞模拟治疗过程，通过rt-pcr和elisa检测炎症因子il-1、il-6、il-8基因和蛋白水平的表达，rt-pcr和western blot检测trpv-1受体基因和蛋白水平的表达。
9、基于本专利技术的实验研究证明，芍药提取物——芍药苷可用于制备改善敏感性皮肤药物。
10、所述药物可以是治疗敏感性皮肤疾病的临床药物，也可以是改善敏感性皮肤症状的医疗美容用品。
11、所述药物，还可以包含医学上可接收辅助物，比如：润肤霜、护手霜、面膜、精华露等。
12、所述芍药苷作为药物，其优选的浓度为0.01-0.2mg/ml。优选为0.1-0.2mg/ml。更优选为0.2mg/ml。
13、本专利技术提供了一种利用芍药苷改善敏感性皮肤的新方法，0.01-0.2mg/ml浓度的芍药苷可在不影响人类角质形成细胞正常生物活性的情况下，下调敏感性皮肤状态下人类角质形成细胞炎症因子和trpv-1的表达，说明芍药苷可以作为一种药物，安全有效地改善敏感性皮肤的炎症反应和皮肤高反应性，适用于敏感性皮肤的临床治疗和医疗美容。
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1.一种芍药提取物—芍药苷在制备改善敏感性皮肤药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为临床治疗药物或医疗美容用品。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芍药苷作为药物，其浓度为：0.01-0.2mg/mL。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芍药苷不影响人类角质形成细胞的细胞活性。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芍药苷不促进正常生理条件下人类角质形成细胞的炎症反应。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芍药苷不上调正常生理条件下人类角质形成细胞的TRPV-1受体表达。
【技术特征摘要】
1.一种芍药提取物—芍药苷在制备改善敏感性皮肤药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为临床治疗药物或医疗美容用品。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芍药苷作为药物，其浓度为：0.01-0.2mg/ml。
4.根据权利要求1所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁力盛，项蕾红，金尚霖，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，
类型：发明
国别省市：
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