用于诊断桑细菌性枯萎病的引物及诊断方法技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断桑细菌性枯萎病的引物，上游引物的碱基序列如ＳＥＱ？ＩＤ？ＮＯ：１所示，下游引物的碱基序列如ＳＥＱ？ＩＤ？ＮＯ：２所示。本发明专利技术还公开了一种利用该引物诊断细菌性枯萎病的方法，包括以下步骤：将经表面消毒的桑树根去皮、切碎，置于无菌水中，离心振荡制得水悬液，以水悬液为模板，利用所述的引物进行ＰＣＲ扩增，扩增产物经凝胶电泳分离后用指示剂显色，如凝胶上存在ＤＮＡ条带，则桑树感染了细菌性枯萎病，如无ＤＮＡ条带，则桑树未感染细菌性枯萎病。发明专利技术引物特异性高，利用该引物检测桑细菌性枯萎病，检测周期短，比用常规方法节省时间９０％以上，灵敏度和准确率较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农作物防病治病及植物检疫领域，尤其涉及一种PCR法诊断桑细菌性 枯萎病的引物及诊断方法。
技术介绍
自2006年开始在桑树主栽区浙江杭嘉湖地区发现一种严重的桑树病，桑农在夏 伐整枝后出现大面积桑树树枯死现象，被称为桑树瘟。经过对桑园的发病情况与病株症 状的细致观察及深入研究，发现该病为一种全新的桑树细菌病害，中文命名为桑细菌性枯 萎病，病原菌为Enterobacter morus(朱勃，王国芬，谢关林，周勤，徐福寿，李斌，陈建 锋 2009. Enterobacter s卯.:引起桑枯萎病的新证据.中国科学C辑211-219.)。 近年来由于该病不断蔓延而且发病程度日趋严重，已对蚕农造成了重大的经济损 失，然而目前已报道的桑树细菌病害已达8种，特别是桑细菌性枯萎病的田间症状难以与 桑(细菌性)青枯病和桑树因失水引起的生理性凋萎相区别，桑农和一般技术人员很 难用常规的方法直接区分，进而导致防治措施没有针对性，不但浪费人力物力，更延误了防 治该病的最佳时机以致造成重大损失。对田间桑细菌性枯萎病的早期诊断与病原检测刻不 容缓。 传统病害诊断采用肉眼症状识别、病原菌分离、本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于诊断桑细菌性枯萎病的引物，其特征在于：上游引物的碱基序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示，下游引物的碱基序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示。

【技术特征摘要】
用于诊断桑细菌性枯萎病的引物，其特征在于上游引物的碱基序列如SEQ ID NO1所示，下游引物的碱基序列如SEQ ID NO2所示。2. —种利用权利要求1所述的引物诊断桑细菌性枯萎病的方法，包括以下步骤将经表面消毒的桑树根去皮、切碎，置于无菌水中，离心振荡制得水悬液，以水悬液为模板，利用所述的引物进行PCR扩增，扩增产物经凝胶电泳分离后用指示剂显色，如凝胶上存在DNA条带，则桑树感染了细菌性枯萎病，如无DNA条带，则桑树未感染细菌性枯萎病。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱勃，谢关林，楼妙苗，王国芬，周勤，余山红，李斌，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]