System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒及检测方法技术_技高网

呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒及检测方法技术

技术编号:41207093 阅读:3 留言:0更新日期:2024-05-07 22:33
本发明专利技术提供一种呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒及检测方法,根据呼吸道合胞体病毒核衣壳蛋白N基因序列,设计LAMP扩增引物。本发明专利技术的呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒性能符合质量标准的要求,检测限可达到10<supgt;3</supgt; copies/mL,特异性和干扰试验均符合产量质量要求,与甲型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感1型病毒、肺炎链球菌、肺炎衣原体、肺炎克雷伯菌、嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、呼吸道腺病毒、鼻病毒不存在交叉反应,试剂盒不受布地奈德、异丙托溴铵、硫酸沙丁胺醇、阿奇霉素、罗红霉素、妥布霉素干扰药物的影响。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供一种呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒及检测方法,属于分子生物学领域。


技术介绍

1、呼吸道合胞病毒(英文简称:rsv)属副粘液病毒科,肺炎病毒属,是一种下呼吸道感染最主要的rna病毒,rsv感染极广且为母传抗体,因而不能完全预防感染发生,2岁以下儿童感染极为常见且感染率高达97%,rsv主要以3种方式传播:飞沫、直接接触和分泌排泄物,感染后由咳嗽、流鼻涕等上呼吸道症状渐变为下呼吸道感染,引起支气管等病理变化,更为严重的是可引起哮喘、呼吸衰竭等重症表现,目前还没有安全有效的产品应用于rsv的临床治疗,对感染rsv的患儿快速识别并采取有效的预防措施可降低rsv感染患儿的发病率和病率。

2、目前市面上针对呼吸道合胞病毒(rsv)的检测手段,主要有pcr加电泳凝胶的检测模式、qpcr荧光定量检测模式和基因测序等。这些检测手段需要依赖较多的仪器,且耗时相对较长。


技术实现思路

1、本专利技术要解决的技术问题是提供一种利用恒温扩增法的呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒及检测方法。

2、本专利技术技术方案如下:

3、本专利技术首先提供呼吸道合胞病毒核酸检测lamp引物组,所述的引物的序列如下:

4、rsv-f3:5’- tcaagaagtgcagtgctag -3’;

5、rsv-b3:5’- tgtgttgggttgagtgtt -3’;

6、rsv-fip:5’- tatgccagcttgcttctttcatatgcccagcaaatttacca -3’;

7、rsv-bip:5’- caccctgtgaaatcaaggcattcatagtgagatctttaactgtag -3’;

8、rsv-lf:5’- ccaaggacacattggcacata -3’。

9、本专利技术还提供一种呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒,包括所述的引物序列。

10、本专利技术还一种呼吸道合胞病毒核酸检测方法:根据呼吸道合胞病毒基因序列的保守区域,设计lamp引物组,并配置lamp的反应体系,按照检测反应条件进行扩增。

11、所述的呼吸道合胞病毒核酸检测方法反应体系为:

12、10×lamp buffer:2.5µl;

13、ts lamp green:0.45µl;

14、mgso4(100mm) :2.5µl;

15、dntp(10mm) :5.5µl;

16、dutp(100mm) :0.02µl;

17、f3(10um) :0.5µl;

18、b3(10um) :0.5µl;

19、fip(100um) :0.4µl;

20、bip(100um) :0.4µl;

21、lf(10um) :2µl;

22、bst(rt) :0.2µl;

23、udgase:0.05µl;

24、水:补足20µl。

25、有益效果

26、本专利技术的呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒(恒温扩增法)产品性能符合质量标准的要求,检测限可达到103 copies/ml,特异性和干扰试验均符合产量质量要求,与甲型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感1型病毒、肺炎链球菌、肺炎衣原体、肺炎克雷伯菌、嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、呼吸道腺病毒、鼻病毒不存在交叉反应,试剂盒不受布地奈德、异丙托溴铵、硫酸沙丁胺醇、阿奇霉素、罗红霉素、妥布霉素干扰药物的影响。

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【技术保护点】

1.呼吸道合胞病毒核酸检测LAMP引物组,其特征在于,所述的引物的序列如下:

2.一种呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物序列。

3.一种呼吸道合胞病毒核酸检测方法,其特征在于:根据呼吸道合胞病毒基因序列的保守区域,设计LAMP引物组,并配置LAMP的反应体系,按照检测反应条件进行扩增。

4.按照权利要求3所述的呼吸道合胞病毒核酸检测方法,其特征在于:所述的呼吸道合胞病毒核酸检测方法反应体系为:

【技术特征摘要】

1.呼吸道合胞病毒核酸检测lamp引物组,其特征在于,所述的引物的序列如下:

2.一种呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物序列。

3.一种呼吸道合胞病毒核酸检测方法,其特征在于:...

【专利技术属性】
技术研发人员:滕新栋于滢泉刘迪张瑾刘万建
申请(专利权)人:青岛国际旅行卫生保健中心青岛海关口岸门诊部
类型:发明
国别省市:

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