【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、视网膜色素上皮(rpe)是神经上皮衍生的色素细胞的单层，其位于光感受器外段(pos)与脉络膜脉管系统之间的布鲁赫膜(bruch's membrane)上。rpe单层对光感受器的功能和健康至关重要。视网膜色素上皮(rpe)细胞功能障碍、损伤和丧失是某些眼睛疾病和疾患的显著特征，诸如年龄相关性黄斑变性(amd)、遗传性黄斑变性，包括best病(卵黄样黄斑营养不良的早发形式)和视网膜色素变性(rp)的亚型。将rpe(和光感受器)移植至受此类疾病影响的人的视网膜中，可以用作rpe已退化的视网膜疾病的细胞置换疗法。
2、人胎儿和成人rpe已经被用作同种异体移植的供体来源。然而，在获得足够的组织供应方面的实际问题和关于使用来自流产胎儿的组织的伦理问题限制了这些供体来源的广泛使用。鉴于成人和胎儿rpe移植物供应的限制，已经研究了替代供体来源的潜力。
3、人多能干细胞作为用于移植的rpe细胞来源具有显著优势。其多能发育潜力使其能够分化成真正的功能性rpe细胞，并且鉴于其具有无限自我更新的潜力，其可以用作rpe细胞...
【技术保护点】
1.一种用于扩增视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤a)之前，在静态条件下在固体表面上扩增所述RPE细胞群。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述固体表面包含培养板。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤a)之前，在动态条件下在固体表面上扩增所述RPE细胞群。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述固体表面包含第二悬浮性细胞支持物基质。
6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述固体表面经涂覆。
7.根据权利要求2至6中任一项所...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于扩增视网膜色素上皮(rpe)细胞的方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤a)之前，在静态条件下在固体表面上扩增所述rpe细胞群。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述固体表面包含培养板。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤a)之前，在动态条件下在固体表面上扩增所述rpe细胞群。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述固体表面包含第二悬浮性细胞支持物基质。
6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述固体表面经涂覆。
7.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中在步骤a)之前，在静态条件下在所述固体表面上扩增所述rpe细胞群，进行一次传代。
8.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中用于在所述固体表面上进行扩增的所述rpe细胞群是从中间体细胞库获得的。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述悬浮性细胞支持物基质包含微载体。
10.根据权利要求1所述的方法，其中所述rpe细胞群从中间体细胞库提供。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述第一悬浮性细胞支持物基质未经涂覆。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述rpe细胞群从多能干细胞的分化包括：
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述固体表面为培养板。
14.根据权利要求12所述的方法，其中所述固体表面包含第二悬浮性细胞支持物基质并且所述多能干细胞在动态培养中扩增。
15.根据权利要求12至14中任一项所述的方法，其中步骤ii包括在动态培养中在第三悬浮性细胞支持物基质上分化所述扩增的多能干细胞。
16.根据权利要求15所述的方法，其中来自步骤i的所述扩增的多能干细胞在步骤ii中保持附着于所述第二悬浮性细胞支持物基质。
17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中所述第二悬浮性细胞支持物基质包含第二微载体。
18.根据权利要求15至17中任一项所述的方法，其中所述第三悬浮性细胞支持物基质包含第三微载体。
19.根据上述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一悬浮性细胞支持物基质、第二悬浮性细胞支持物基质和第三悬浮性细胞支持物基质中的至少两者是相同的。
20.根据上述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一悬浮性细胞支持物基质、第二悬浮性细胞支持物基质和第三悬浮性细胞支持物基质是不同的。
21.根据权利要求12至14中任一项所述的方法，其中步骤ii包括在静态培养中在培养板上分化所述扩增的多能干细胞。
22.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述多能干细胞生长成粘附于所述第二悬浮性细胞支持物基质和/或第三悬浮性细胞支持物基质的单层。
23.根据权利要求12至22中任一项所述的方法，其中用于维持多能性的条件是无饲养细胞的。
24.根据权利要求12至23中任一项所述的方法，其中用于维持多能性的条件包括饲养细胞群。
25.根据权利要求12至24中任一项所述的方法，其中分化试剂为烟酰胺。
26.根据权利要求12至25中任一项所述的方法，其中所述生长因子为tgfβ家族的成员。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中所述第一悬浮性细胞支持物基质、第二悬浮性细胞支持物基质和/或第三悬浮性细胞支持物基质包含聚苯乙烯、表面改性聚苯乙烯、化学改性聚苯乙烯、交联葡聚糖、纤维素、丙烯酰胺、胶原、藻酸盐、明胶、玻璃、deae-葡聚糖或其组合。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述第一微载体、第二悬浮性细胞支持物基质r和/或第三悬浮性细胞支持物基质是球形的、椭球形的、棒状的、盘状的、多孔的、无孔的、光滑的、平坦的、或其组合。
29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述第一悬浮性细胞支持物基质、第二悬浮性细胞支持物基质和/或第三悬浮性细胞支持物基质涂覆有层粘连蛋白、基质胶、胶原、聚赖氨酸、聚-l-赖氨酸、聚-d-赖氨酸、玻连蛋白、纤连蛋白、腱生蛋白、葡聚糖、肽、它们的衍生物、或其组合。
30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述固体表面未经涂覆或涂覆有层粘连蛋白、基质胶、胶原、聚赖氨酸、聚-...
【专利技术属性】
技术研发人员：拉维德·蒂科茨基，德娜·海扬尼曼，O·维泽，里拉赫·亚龙，
申请(专利权)人：谱系细胞疗法公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。