检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物、试剂盒及方法技术

技术编号:41180385 阅读:21 留言:0更新日期:2024-05-07 22:14
本发明专利技术涉及一种检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物、试剂盒及方法,其中,检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物包括组合物1、组合物2和组合物3,组合物1、组合物2中的上游引物与下游引物的Tm值差异均为10℃,组合物3中的上游引物与下游引物的Tm值差异为15℃,组合物1、组合物2和组合物3中的引物探针的Tm值的范围为60‑72℃。本发明专利技术方法避免了常规上游引物和下游引物浓度不对称PCR检测方法所引起的检测灵敏度低的问题,同时结合熔解曲线分析可达到在同一通道中进行多重分析的目的,该方法具有操作简单、灵敏度高、可重复性好,特异性高的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,特别是涉及一种检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物、试剂盒及方法


技术介绍

1、结核病是由结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌和非洲分枝杆菌等引起的慢性传染性疾病,可累及全身各个器官,以肺结核最为多见。

2、耐药结核的出现,严重影响结核病的防治工作。结核分支杆菌耐药基因的变异是产生耐药结核病的主要原因,其中过氧化物酶(katg)和烯酰脂酰载体蛋白还原酶(inha)等多基因突变导致结核分支杆菌对抗结核药物异烟肼产生耐药性。

3、在结核分枝杆菌的检测中,荧光pcr技术相比涂片和培养方法具有更高的灵敏度和特异性,对含有结核分枝杆菌较低的样本也能检测出结核分枝杆菌的存在,提高了结核的检出率,加快医院对于结核病患者的干预时间。

4、pcr探针熔解曲线法分析在同一荧光通道中进行多靶标分析,可用于结核耐多药分析检测。其中,熔解曲线分析基础为采用不对称pcr产生大量的单链模板用与分子信标探针进行结合,常规的不对称pcr多采用上下游引物浓度不对称进行调节,但该方法调整难度大,引物浓度过低会导致检测灵敏度不够,浓度过高会导本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,包括组合物1、组合物2和组合物3,所述组合物1、所述组合物2中的上游引物与下游引物的Tm值差异均为10℃,所述组合物3中的上游引物与下游引物的Tm值差异为15℃,所述组合物1、所述组合物2和所述组合物3中的引物探针的Tm值的范围为60-72℃;

2.根据权利要求1所述的检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,所述引物探针1、所述引物探针2和所述引物探针3的荧光基团互不相同且互不干涉。

3.根据权利要求2所述的检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,所述引物探针1、所述引物探针2和所述引物...

【技术特征摘要】

1.一种检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,包括组合物1、组合物2和组合物3,所述组合物1、所述组合物2中的上游引物与下游引物的tm值差异均为10℃,所述组合物3中的上游引物与下游引物的tm值差异为15℃,所述组合物1、所述组合物2和所述组合物3中的引物探针的tm值的范围为60-72℃;

2.根据权利要求1所述的检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,所述引物探针1、所述引物探针2和所述引物探针3的荧光基团互不相同且互不干涉。

3.根据权利要求2所述的检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的组合物,其特征在于,所述引物探针1、所述引物探针2和所述引物探针3的所述荧光基团可以互不干涉地选自fam、hex、rox、vic、cy5.5、tamra、tet、cy3和joe中的任一种。

4.一种检测结核分枝杆菌和异烟肼耐药的试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1至3中任一项所述的组合物,所述组合物1、所述组合物2和所述组合物3的引物浓度为2...

【专利技术属性】
技术研发人员:张俊仙李晋孙雯娜柳丽萍梁艳石太平吴雪琼郭求真
申请(专利权)人:中国人民解放军总医院第八医学中心
类型:发明
国别省市:

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