【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品加工，具体涉及一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法。
技术介绍
1、螺旋藻是一种营养丰富、功能全面的绿色食品，联合国粮农组织(fao)已将它列入21世纪人类食品资源开发计划，更将其誉为“21世纪最理想的食品”。螺旋藻富含多糖、多酚、叶绿素、类胡萝卜素、不饱和脂肪酸等多种活性物质，具有抗病毒、抗肿瘤、抗疲劳和提高机体免疫力等多种保健作用，被誉为“微型绿色功能性营养宝库”。螺旋藻中的脂溶性色素叶绿素作为天然色素，不仅能够代替人工色素呈色，同时还具备抗氧化、抗肿瘤、抑菌消炎、抗诱变等多种良好的生物活性。因此，叶绿素在食品、营养、医药和化妆品等方面有着广泛的应用，具有较高的商业价值。
2、目前，提取叶绿素的方法主要是酶解或超声辅助有机溶剂萃取，提取过程中大量使用到甲醇、丙酮、石油醚等有机试剂，污染环境，危害人体健康，存在着一定的安全隐患。cn201910838715.7公开了使用乙醇、丙酮等有机试剂在花椒叶中同时提取出叶绿素和芳香油，提取过程减少了有机溶剂的添加量。cn201710650214.7中涉及一种采用加酶提取叶绿素的方法，主要是对预处理后的浒苔加纤维素酶破壁，使用甲醇、丙酮、异丙醇等有机溶剂提取其中的叶绿素。cn201610176075.4中展示了一种从绿色植物叶片中提取叶绿素的方法，主要包括原料准备、浸提、过滤、浓缩、洗脱、干燥等步骤，在提取过程中主要使用丙酮溶液提取原料中的叶绿素。cn201710169066.7公开了螺旋藻中活性物质的提取工艺，主要使用乙醇索式提取法得到叶绿素锌钠
3、深共晶溶剂(deep eutectic solvents，des)是一种原料简单易得、热稳定性高、挥发性低且易于合成的绿色溶剂，自2001年首次提出以来被广泛应用于生物、医药及绿色化学等多个领域，被认为是21世纪最重要的发现之一。深共晶溶剂一般是由氢键供体(hbd)和氢键受体(hba)组成的二元或三元体系，多元醇、尿素和羧酸等常充当氢键供体(hbd)，氯化胆碱、氨基酸等充当氢键受体(hba)。des可以与目标化合物形成氢键，所以很多化合物在des中都能表现出较高的溶解性。基于这种性质，des被广泛应用于生物活性物质的提取，主要成分是糖、氨基酸、有机酸等初级代谢产物的des被称为天然深共晶溶剂(natural deepeutectic solvents，nades)。nades的天然来源广泛、易于合成、可生物降解且绿色无毒，与有机试剂相比，它应用于食品工业展现出更高的安全性。由于传统叶绿素提取方法仍然存在着有机溶剂残留、污染环境及提取过程中的安全性等问题，与之相比，nades在绿色化学领域展现出了极大的潜力。
4、cn202011060450.1使用氯化胆碱、丙三醇、柠檬酸(摩尔比为1:2:1)，并且加入一定体积的超纯水制备nades，将nades结合超声提取技术对红车轴草的异黄酮提取工艺进行优化，使得成分提取过程更加绿色高效环保。cn202110812322.6使用了不同组分的nades(包括：氯化胆碱、柠檬酸、苹果酸、d-葡萄糖、d-果糖)辅助超声提取紫苏叶精油，发现相较于传统方法，使用超声辅助nades提取的得率更高，所得的紫苏叶精油抗氧化性更强、抑菌效果更好，认为超声辅助nades提取可以作为一种新型的提取方法在天然香原料提取领域中应用。cn202010034722.4将nades(氢键受体为氯化胆碱、dl-薄荷醇中的一种，氢键供体为葡萄糖酸、酒石酸、乳酸中的一种)用于提取杏渣、番茄渣、胡萝卜渣中的类胡萝卜素，该方法高效、环保、简单、快速。
5、从以上专利中可知，使用nades提取生物活性物质相较于传统提取方法更为清洁高效，但目前却未查到将nades用于叶绿素提取的相关报道。现有叶绿素的提取方法多是以超声、酶解等方法辅助有机溶剂萃取以提高提取效率，虽然减少了提取过程中有机溶剂的用量，但仍无法彻底摆脱有机溶剂的制约。基于nades自身易于和目标化合物形成氢键这一性质，使用nades提取生物活性物质已经广泛应用于天然产物提取领域，因此可以尝试将nades应用于螺旋藻叶绿素的提取，提取过程更加绿色环保。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供了一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法。本专利技术使用天然深共晶溶剂代替有机溶剂提取螺旋藻中的叶绿素，不仅可以避免使用有毒有害的有机试剂，解决传统提取方法污染环境、危害人体健康的问题；同时还可以提高叶绿素的稳定性，为拓宽叶绿素应用渠道、延长产品货架期提供了新思路。
2、本专利技术的技术方案是：一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，
3、(1)nades提取液的制备
4、将hbd(氢键供体)和hba(氢键受体)混合均匀，加入去离子水，在70～80℃下磁力搅拌至形成无色透明的澄清液体，即得nades提取液；
5、(2)螺旋藻叶绿素的制备
6、将nades提取液和螺旋藻粉混合，均质机破壁，30～70℃下磁力搅拌萃取，萃取完成后冷冻离心，取上清液，即得到螺旋藻叶绿素nades提取液。
7、其中hbd为甜菜碱；hba为三甘醇、甘油、木糖醇中的一种，优选木糖醇。当hbd为甜菜碱，hba为木糖醇时，其具体步骤优选为：
8、(1)nades提取液的制备
9、按照物质的量之比(摩尔比)1：2取甜菜碱和木糖醇混合均匀，加入适量的去离子水，在70～80℃下磁力搅拌至形成无色透明的澄清液体，使其含水量30～35％；
10、(2)螺旋藻叶绿素的制备
11、将制备好的nades提取液与螺旋藻粉混合均匀(料液比1:100～150)，使用均质机破壁，在40～60℃下水浴辅助磁力搅拌下进行萃取，磁力搅拌90～150min完成萃取过程，经4℃冷冻离心除去藻渣，取上清液，即得到螺旋藻叶绿素nades提取液备用。
12、将藻渣按照步骤(2)重复进行提取，以提高螺旋藻叶绿素的提取率。
13、经试验证明，上述方法制备的螺旋藻叶绿素nades提取液，明显改善了叶绿素的光稳定性和热稳定性。
14、本专利技术还公开了上述方法制备的螺旋藻叶绿素nades提取液在制备功能性果冻、功能性饮料以及抗氧化爽肤水方面的应用。
15、本专利技术的技术效果是：
16、1、本专利技术首次将价廉易得、绿色环保的nades应用于螺旋藻叶绿素的提取，使用nades不仅成功提取出了叶绿素，且提取率高达65％，兼顾经济效益、高效提取、绿色环保三方面优点；
17、2、现有技术大多关注于如何提取出叶绿素，而回避了所提取出的叶绿素稳定性这一影响叶绿素应用的关键问题。本专利技术在高效提取出叶绿素的前提下，成功改善了叶绿素的光稳定性及热稳定性，解决了这一关键问题，延长了天然色素产品的货架期，有利于叶绿素产品的进一步应用；
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【技术保护点】
1.一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，
2.如权利要求1所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，所述HBD为甜菜碱；HBA为三甘醇、甘油、木糖醇中的一种。
3.如权利要求2所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，所述HBD为甜菜碱；HBA为木糖醇。
4.如权利要求3所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，
5.如权利要求4所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，所述螺旋藻粉与制备好的NADES提取液的质量体积比为1:50～150。
6.如权利要求4所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，将藻渣按照步骤(2)重复进行提取，以提高螺旋藻叶绿素的提取率。
7.权利要求4-6中任一项所述方法制备的螺旋藻叶绿素NADES提取液。
8.权利要求7所述的螺旋藻叶绿素NADES提取液在制备功能性果冻、功能性饮料以及抗氧化爽肤水中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，
2.如权利要求1所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，所述hbd为甜菜碱；hba为三甘醇、甘油、木糖醇中的一种。
3.如权利要求2所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，所述hbd为甜菜碱；hba为木糖醇。
4.如权利要求3所述的一种绿色提取螺旋藻叶绿素并提高叶绿素稳定性的方法，其特征是，
5.如权利要求4所述的一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：李方巍，王淑玉，曾名湧，
申请(专利权)人：中国海洋大学三亚海洋研究院，
类型：发明
国别省市：
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