【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞培养技术，具体为一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方。
技术介绍
1、细胞培养基是一种提供细胞生长和繁殖所需的营养物质、生长因子和环境条件的培养液。它模拟了细胞在体内的生长环境，为细胞的体外培养和研究提供了必要的条件。细胞培养基技术是细胞生物学和生物工程领域的重要组成部分。
2、细胞培养技术广泛应用于科学研究、生物制药、疫苗生产等领域，特别是在生物制药领域，由于其可以替代残忍和昂贵的动物实验，并且可以进行高通量实验以提供充分的临床前数据，因此被大规模使用。
3、细胞培养基是医药行业发展的基础，广泛应用于生物制药研发和生产各个环节。细胞培养基技术包括配方优化、血清替代物的研发、培养条件的优化等方面。通过对细胞的营养需求、生长因子、细胞因子等的深入研究，不断优化培养基的配方。同时，为了解决传统血清的问题，研究人员致力于开发无血清培养基和血清替代物，以提高细胞培养的效果和安全性。此外，优化培养条件如ph值、温度、气体组成等也是细胞培养基技术的重要方面。
4、细胞培养基的研究和生产在国内外都非常活跃。中国的医药培养基行业正在快速发展，国内企业在市场上占据一定份额，并取得了快速的发展。全球细胞培养基市场也在稳步增长，不断涌现出新的技术和产品。
5、传统的细胞培养技术是以基础培养基(basal media)和胎牛血清混合配制成的完全培养基为营养来源和生长的液体环境，控制环境洁净度、温度、气体供给等因素来完成的。基础培养基是由几十种成分按不同的量配合而成，包括氨基酸、
6、基础培养基配方中的一种成分l-谷氨酰胺，是“必需氨基酸”的一种，是基础培养基的必需成分，也是主要的不稳定成分。在水溶液中持续分解，不仅造成自身作为一种营养成分的逐渐损失，而且分解的产物氨，对于细胞是有毒性的。这是基础培养基必须在冷藏条件下储存，并且不能长期储存的主要原因。因此我们需要提出一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，解决常规基础培养基中l-谷氨酰胺分解产物氨对细胞培养的的毒性问题，l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽缓慢分解，可保证培养基中l-谷氨酰胺始终维持较低的浓度水平；解决常规培养基因l-谷氨酰胺分解，而不能长期储存的问题，l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽性质相对稳定，改进后的培养基，有效期可长达3年，极大地方便了流通环节；用l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽替代l-谷氨酰胺培养基适用于贴壁和悬浮哺乳动物细胞的培养，几乎无需适应；在细胞培养基领域，为使用者提供了高性价比的新选择，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，基于高糖dmem培养基，按质量组分计，包括氨基酸1750-2000份、无机盐10000-12000份、维生素25-35份和其他组分4000-5000份，所述氨基酸包括l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽和辅助氨基酸，所述l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽的分子量为217、浓度为800-100mg/l、摩尔浓度为3.687-4.608mm，所述其他组分包括葡萄糖、酚红；
3、在水溶液中不会自发降解的所述l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽在细胞培养过程中，肽酶逐渐释放，培养基中的二肽逐渐水解，将l-谷氨酰胺连续释放到培养基中，且l-谷氨酰胺保持低浓度水平，培养的细胞获得有效的能量代谢和高生长量。
4、优选的，所述辅助氨基酸包括甘氨酸、l-盐酸精氨酸、l-盐酸胱氨酸、l-盐酸组氨酸、l-异亮氨酸、l-亮氨酸、l-盐酸赖氨酸、l-左旋蛋氨酸、l-苯丙氨酸、l-丝氨酸、l-苏氨酸、l-左旋色氨酸、l-酪氨酸二钠盐二水合物、l-缬氨酸。
5、优选的，按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25-35份、l-盐酸精氨酸80-90份、l-盐酸胱氨酸58-68份、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽800-100份、l-盐酸组氨酸37-47份、l-异亮氨酸95-115份、l-亮氨酸95-115份、l-盐酸赖氨酸140-150份、l-左旋蛋氨酸25-35份、l-苯丙氨酸60-70份、l-丝氨酸37-47份、l-苏氨酸85-105份、l-左旋色氨酸10-20份、l-酪氨酸二钠盐二水合物100-110份、l-缬氨酸90-100份；
6、所述无机盐包括氯化钙180-220份、硝酸铁0.05-0.15份、硫酸镁92-102份、氯化钾380-420份、碳酸氢钠3600-3800份、氯化钠6300-6500份、磷酸钠一碱100-150份；
7、所述维生素包括氯化胆硷3-5份、d-泛酸钙3-5份、叶酸3-5份、无旋光肌醇6-8份、烟酰胺3-5份、盐酸吡哆醇3-5份、核黄素0.3-0.5份、盐酸硫胺素3-5份；
8、所述其他组分包括葡萄糖4400-4600份、酚红12-18份。
9、优选的，按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25份、l-盐酸精氨酸80份、l-盐酸胱氨酸58份、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽800份、l-盐酸组氨酸37份、l-异亮氨酸95份、l-亮氨酸95份、l-盐酸赖氨酸140份、l-左旋蛋氨酸25份、l-苯丙氨酸60份、l-丝氨酸37份、l-苏氨酸85份、l-左旋色氨酸10份、l-酪氨酸二钠盐二水合物100份、l-缬氨酸90份；
10、所述无机盐包括氯化钙180份、硝酸铁0.05份、硫酸镁92份、氯化钾380份、碳酸氢钠3600份、氯化钠6300份、磷酸钠一碱100份；
11、所述维生素包括氯化胆硷3份、d-泛酸钙3份、叶酸3份、无旋光肌醇6份、烟酰胺3份、盐酸吡哆醇3份、核黄素0.3份、盐酸硫胺素3份；
12、所述其他组分包括葡萄糖4400份、酚红12份。
13、优选的，将上述氨基酸、无机盐、维生素和其他组分与1l的水溶液混合后，各组分的浓度分别为：
14、甘氨酸25mg/l、l-盐酸精氨酸80mg/l、l-盐酸胱氨酸58mg/l、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽800mg/l、l-盐酸组氨酸37mg/l、l-异亮氨酸95mg/l、l-亮氨酸95mg/l、l-盐酸赖氨酸140mg/l、l-左旋蛋氨酸25mg/l、l-苯丙氨酸60mg/l、l-丝氨酸37mg/l、l-苏氨酸85mg/l、l-左旋色氨酸10mg/l、l-酪氨酸二钠盐二水合物100mg/l、l-缬氨酸90mg/l；
15、氯化钙180mg/l、硝酸铁0.05mg/l、硫酸镁92mg/l、氯化钾380mg/l、碳酸氢钠3600mg/l、氯化钠6300mg/l、磷酸钠一碱100mg/l；
16、氯化胆硷3mg/l、d-泛酸钙3mg/l、叶酸3mg/l、无旋光肌醇6mg/l、烟酰胺3mg/l、盐酸吡哆醇3mg/l、核黄素0.3mg/l、盐酸硫胺素3mg/l；
本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，基于高糖DMEM培养基，按质量组分计，包括氨基酸1750-2000份、无机盐10000-12000份、维生素25-35份和其他组分4000-5000份，其特征在于：所述氨基酸包括L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽和辅助氨基酸，所述L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽的分子量为217、浓度为800-100mg/L、摩尔浓度为3.687-4.608mM，所述其他组分包括葡萄糖、酚红；
2.根据权利要求1所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：所述辅助氨基酸包括甘氨酸、L-盐酸精氨酸、L-盐酸胱氨酸、L-盐酸组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-左旋蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-左旋色氨酸、L-酪氨酸二钠盐二水合物、L-缬氨酸。
3.根据权利要求2所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25-35份、L-盐酸精氨酸80-90份、L-盐酸胱氨酸58-68份、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽800-100份、L-
4.根据权利要求3所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25份、L-盐酸精氨酸80份、L-盐酸胱氨酸58份、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽800份、L-盐酸组氨酸37份、L-异亮氨酸95份、L-亮氨酸95份、L-盐酸赖氨酸140份、L-左旋蛋氨酸25份、L-苯丙氨酸60份、L-丝氨酸37份、L-苏氨酸85份、L-左旋色氨酸10份、L-酪氨酸二钠盐二水合物100份、L-缬氨酸90份；
5.根据权利要求4所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：将上述氨基酸、无机盐、维生素和其他组分与1L的水溶液混合后，各组分的浓度分别为：
6.根据权利要求5所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸35份、L-盐酸精氨酸90份、L-盐酸胱氨酸68份、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽100份、L-盐酸组氨酸47份、L-异亮氨酸115份、L-亮氨酸115份、L-盐酸赖氨酸150份、L-左旋蛋氨酸35份、L-苯丙氨酸70份、L-丝氨酸47份、L-苏氨酸105份、L-左旋色氨酸20份、L-酪氨酸二钠盐二水合物110份、L-缬氨酸100份；
7.根据权利要求6所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：将上述氨基酸、无机盐、维生素和其他组分与1L的水溶液混合后，各组分的浓度分别为：
8.根据权利要求7所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸30份、L-盐酸精氨酸84份、L-盐酸胱氨酸63份、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽868份、L-盐酸组氨酸42份、L-异亮氨酸105份、L-亮氨酸105份、L-盐酸赖氨酸146份、L-左旋蛋氨酸30份、L-苯丙氨酸66份、L-丝氨酸42份、L-苏氨酸95份、L-左旋色氨酸16份、L-酪氨酸二钠盐二水合物104份、L-缬氨酸94份；
9.根据权利要求8所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：将上述氨基酸、无机盐、维生素和其他组分与1L的水溶液混合后，各组分的浓度分别为：
10.根据权利要求9所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：将上述氨基酸、无机盐、维生素和其他组分与1L的水溶液混合后，各组分的摩尔浓度分别为：
...【技术特征摘要】
1.一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，基于高糖dmem培养基，按质量组分计，包括氨基酸1750-2000份、无机盐10000-12000份、维生素25-35份和其他组分4000-5000份，其特征在于：所述氨基酸包括l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽和辅助氨基酸，所述l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽的分子量为217、浓度为800-100mg/l、摩尔浓度为3.687-4.608mm，所述其他组分包括葡萄糖、酚红；
2.根据权利要求1所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：所述辅助氨基酸包括甘氨酸、l-盐酸精氨酸、l-盐酸胱氨酸、l-盐酸组氨酸、l-异亮氨酸、l-亮氨酸、l-盐酸赖氨酸、l-左旋蛋氨酸、l-苯丙氨酸、l-丝氨酸、l-苏氨酸、l-左旋色氨酸、l-酪氨酸二钠盐二水合物、l-缬氨酸。
3.根据权利要求2所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25-35份、l-盐酸精氨酸80-90份、l-盐酸胱氨酸58-68份、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽800-100份、l-盐酸组氨酸37-47份、l-异亮氨酸95-115份、l-亮氨酸95-115份、l-盐酸赖氨酸140-150份、l-左旋蛋氨酸25-35份、l-苯丙氨酸60-70份、l-丝氨酸37-47份、l-苏氨酸85-105份、l-左旋色氨酸10-20份、l-酪氨酸二钠盐二水合物100-110份、l-缬氨酸90-100份；
4.根据权利要求3所述的一种可提高培养效果和延长保质期的细胞培养基配方，其特征在于：按质量组分计，所述氨基酸包括甘氨酸25份、l-盐酸精氨酸80份、l-盐酸胱氨酸58份、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽800份、l-盐酸组氨酸37份、l-异亮氨酸95份、l-亮氨酸95份、l-盐酸赖氨酸140份、l-左旋蛋氨酸25份、l-苯丙氨酸60份、l-丝氨酸37份、l-苏氨酸85份、l-左旋色氨酸1...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱延文，陈丹丹，黄培泽，
申请(专利权)人：北京同创正业生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。