【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种抗新冠病毒的蛋白或mrna疫苗及其制备方法和应用。
技术介绍
1、冠状病毒(coronavirus，cov)是一类有包膜的单股正链rna病毒，宿主范围广泛，人和多种动物普遍易感，并且与许多疾病有关。已知的冠状病毒包括hcov-oc43、hcov-229e、hcov-nl63、hcov-hku1、sars-cov和/或mers-cov，研究表明，sars-cov-2病毒的基因序列(genbank accession:mn908947)与sars冠状病毒相比具有超过85％的序列相似度。
2、针对冠状病毒表面刺突蛋白抗原(s蛋白)，主要研发了重组蛋白疫苗、mrna疫苗、dna疫苗、非复制型病毒载体疫苗、复制型病毒载体疫苗、多肽疫苗、病毒样颗粒疫苗、减毒疫苗和灭活疫苗。但是现有疫苗存在对细胞的转染率低，表达效率低，刺激的免疫应答弱，临床需要的剂量高的问题，一方面导致生产成本高、病人用药费用高、经济负担重，另一方面高剂量用药会引入更多的杂质，可能会导致毒副作用增大，从而增加临床风险。
3、在新冠病毒感染的防治中，采用脂质纳米颗粒(lnp)递送系统的mrna疫苗取得了前所未有的成功。来自moderna(mrna-1273)和pfizer-biontech(bnt162b2)的两种mrna疫苗(编码新型冠状病毒的融合前稳定全长刺突s蛋白)目前正在广泛使用，其他几种候选mrna疫苗正在临床试验中。然而，随着病毒的不断进化，产生了新的变体，这两种mrna疫苗的效力正在显著减弱。因此亟
技术实现思路
1、为解决现有技术中缺乏有效或广谱性的预防和/或治疗sars-cov-2的疫苗的技术问题，本专利技术提供了一种抗新冠病毒的蛋白或mrna疫苗及其制备方法和应用。
2、本专利技术的第一方面提供一种s蛋白突变体的组合，所述组合包括第一突变体和第二突变体；所述第一突变体与所述第二突变体不同；
3、其中，所述第一突变体具有如seq id no:19或其变体所示的氨基酸序列；所述第二突变体具有如seq id no:20或其变体所示的氨基酸序列；
4、所述变体为与seq id no:19或seq id no:20具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，并且保留具有如seq idno:19或seq id no:20所示的氨基酸序列的s蛋白突变体的功能。
5、在一些优选的实施例中，所述第一突变体和/或第二突变体还包括信号肽。
6、优选地，所述信号肽位于所述第一突变体和/或第二突变体的n末端。
7、更优选地，所述信号肽的氨基酸序列如seq id no:1所示。
8、本专利技术的第二方面提供一种分离的核酸，所述核酸编码如第一方面所述的s蛋白突变体的组合。
9、在一些优选的实施例中，编码所述组合的核酸中，编码第一突变体的核酸与编码第二突变体核酸包含在同一或不同的核酸分子中。
10、在一些优选的实施例中，所述核酸为rna，例如mrna。
11、优选地，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:21-23任一所示或与如seq idno:21-23任一具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
12、优选地，编码第二突变体的核酸具有如seq id no:15-18任一所示或与如seq idno:15-18任一具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
13、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:23所示或与如seq id no:23具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:15所示或与如seq idno:15具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
14、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:23所示或与如seq id no:23具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:16所示或与如seq idno:16具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
15、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:23所示或与如seq id no:23具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:17所示或与如seq idno:17具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
16、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:23所示或与如seq id no:23具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:18所示或与如seq idno:18具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
17、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:22所示或与如seq id no:22具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:18所示或与如seq idno:18具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
18、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的核酸具有如seq id no:22所示或与如seq id no:22具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列；编码第二突变体的核酸具有如seq id no:15所示或与如seq idno:15具有少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
19、在一些优选的实施例中，编码第一突变体的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种S蛋白突变体的组合，其特征在于，所述组合包括第一突变体和第二突变体；所述第一突变体与所述第二突变体不同；
2.如权利要求1所述的组合，其特征在于，所述第一突变体和/或第二突变体还包括信号肽；
3.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合。
4.如权利要求3所述的核酸，其特征在于，编码所述组合的核酸中，编码第一突变体的核酸与编码第二突变体核酸包含在同一或不同的核酸分子中。
5.如权利要求3或4所述的核酸，其特征在于，所述核酸为DNA；
6.如权利要求3或4所述的核酸，其特征在于，所述核酸为RNA，例如mRNA；
7.如权利要求6所述的核酸，其特征在于，当所述核酸为mRNA时，所述mRNA的5’端包括5’UTR；和/或，所述mRNA的3’端包括3’UTR和/或3’poly(A)；
8.如权利要求6或7所述的核酸，其特征在于，其在选自下组的一个或多个位置包含修饰：5’UTR、开放阅读框、3’UTR和3’poly(A)；
9.一种重组表达载体，其
10.一种转化体，其特征在于，其包含权利要求3-8任一项所述的核酸，或权利要求9所述的重组表达载体；
11.一种制备S蛋白突变体的组合的方法，其特征在于，所述方法包括在适合S蛋白突变体表达的条件下，培养如权利要求10所述的转化体。
12.一种组合物，其特征在于，其包含(1)如权利要求3-8任一项所述的核酸，或如权利要求9所述的重组表达载体，或如权利要求10所述的转化体，和(2)递送载体；
13.如权利要求12所述的组合物，其特征在于，所述脂质纳米颗粒包括阳离子脂质和非阳离子脂质；
14.如权利要求12或13所述的组合物，其特征在于，所述递送载体还包括胆固醇；
15.如权利要求12-14任一项所述的组合物，其特征在于，所述递送载体包含阳离子脂质、胆固醇、磷脂和脂质缀合物；
16.如权利要求12-15任一项所述的组合物，其特征在于，所述核酸为mRNA，且包载在所述递送载体中。
17.一种药物组合物，其特征在于，其包含权利要求12-16任一项所述的组合物，以及
18.一种疫苗，其特征在于，其包含如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合、如权利要求3-8任一项所述的核酸、如权利要求9所述的重组表达载体、如权利要求10所述的转化体、如权利要求12-16任一项所述的组合物和/或如权利要求17所述的药物组合物，以及药学上可接受的佐剂。
19.如权利要求18所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗为蛋白疫苗；
20.一种试剂盒或药盒，其特征在于，所述试剂盒或药盒包含如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合、如权利要求3-8任一项所述的核酸、如权利要求9所述的重组表达载体、如权利要求10所述的转化体、如权利要求12-16任一项所述的组合物、如权利要求17所述的药物组合物和/或如权利要求18或19所述的疫苗。
21.一种如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合、如权利要求3-8任一项所述的核酸、如权利要求9所述的重组表达载体、如权利要求10所述的转化体、如权利要求12-16任一项所述的组合物、如权利要求17所述的药物组合物、如权利要求18或19所述的疫苗和/或权利要求20所述的试剂盒或药盒在制备用于缓解、预防和/或治疗新型冠状病毒引起的疾病的药物中的用途。
22.如权利要求21所述的用途，其特征在于，所述药物为疫苗；
23.一种如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合、如权利要求3-8任一项所述的核酸、如权利要求9所述的重组表达载体、如权利要求10所述的转化体、如权利要求12-16任一项所述的组合物、如权利要求17所述的药物组合物、如权利要求18或19所述的疫苗和/或权利要求20所述的试剂盒或药盒用于缓解、预防和/或治疗新型冠状病毒引起的疾病。
24.一种缓解、预防和/或治疗新型冠状病毒引起的疾病的方法，其特征在于，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的如权利要求1或2所述的S蛋白突变体的组合、如权利要求3-8任一项所述的核酸、如权利要求9所述的重组表达载体、如权利要求10所述的转化体、如权利要求12-16任一项所述的组合物、如权利要求17所述的药物组合物、如权利要求18或19所述的疫苗和/或权利要求20所述的试剂盒或药盒。
...【技术特征摘要】
1.一种s蛋白突变体的组合，其特征在于，所述组合包括第一突变体和第二突变体；所述第一突变体与所述第二突变体不同；
2.如权利要求1所述的组合，其特征在于，所述第一突变体和/或第二突变体还包括信号肽；
3.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1或2所述的s蛋白突变体的组合。
4.如权利要求3所述的核酸，其特征在于，编码所述组合的核酸中，编码第一突变体的核酸与编码第二突变体核酸包含在同一或不同的核酸分子中。
5.如权利要求3或4所述的核酸，其特征在于，所述核酸为dna；
6.如权利要求3或4所述的核酸，其特征在于，所述核酸为rna，例如mrna；
7.如权利要求6所述的核酸，其特征在于，当所述核酸为mrna时，所述mrna的5’端包括5’utr；和/或，所述mrna的3’端包括3’utr和/或3’poly(a)；
8.如权利要求6或7所述的核酸，其特征在于，其在选自下组的一个或多个位置包含修饰：5’utr、开放阅读框、3’utr和3’poly(a)；
9.一种重组表达载体，其特征在于，其包含权利要求3-8任一项所述的核酸；
10.一种转化体，其特征在于，其包含权利要求3-8任一项所述的核酸，或权利要求9所述的重组表达载体；
11.一种制备s蛋白突变体的组合的方法，其特征在于，所述方法包括在适合s蛋白突变体表达的条件下，培养如权利要求10所述的转化体。
12.一种组合物，其特征在于，其包含(1)如权利要求3-8任一项所述的核酸，或如权利要求9所述的重组表达载体，或如权利要求10所述的转化体，和(2)递送载体；
13.如权利要求12所述的组合物，其特征在于，所述脂质纳米颗粒包括阳离子脂质和非阳离子脂质；
14.如权利要求12或13所述的组合物，其特征在于，所述递送载体还包括胆固醇；
15.如权利要求12-14任一项所述的组合物，其特征在于，所述递送载体包含阳离子脂质、胆固醇、磷脂和脂质缀合物；
16.如权利要求12-15任一项所述的组合物，其特征在于，所述核酸为mrna，且包载在所述递送载体中。
17.一种药...
【专利技术属性】
技术研发人员：林金钟，卢静，谭舒丹，赵京华，俞航，王冰，周辉，
申请(专利权)人：上海蓝鹊生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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