一种抗人tIgE单克隆抗体及其制备方法与应用技术

技术编号:41013012 阅读:21 留言:0更新日期:2024-04-18 21:49
本发明专利技术公开了一种抗人tIgE单克隆抗体及其制备方法与应用,属于体外诊断领域。通过人IgE抗体重链末端蛋白免疫小鼠后进行鼠单克隆抗体的筛选,将筛选到的阳性克隆细胞进行基因测序,得到抗体的基因序列之后构建至真核表达载体,进行体外重组表达及纯化。将此重组抗体应用于本公司微阵列化学发光平台,具有高通量、高灵敏等优点,能够实现对tIgE的定量检测,同时结合特异性IgE检测,能够实现对过敏性疾病的精准诊断,能够对过敏性疾病的检测和治疗起到很好的辅助作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗人tige单克隆抗体及其制备方法与应用,属于体外诊断领域。


技术介绍

1、免疫球蛋白e(ige)是一类免疫球蛋白(ig),分子量约为188kda,血清中含量极低,仅占血清总ig的0.002%,在个体发育中合成较晚。免疫球蛋白分子的基本结构ig分子由四肽链组成,其中二条相同的分子量较小的肽链称为轻链,二条相同的分子量较大的肽链称为重链,轻链与重链由二硫键连接。ig单体中四条肽链两端游离的氨基或羧基的方向是一致的,分别命名为氨基端(n端)和羧基端(c端)。ε链有4个ch(cε1~cε4),无铰链区,含有较多的半胱氨酸和甲硫氨酸,对热敏感,56℃、30分钟可使ige丧失生物学活性。ige主要由鼻咽部、扁桃体、支气管、胃肠等粘膜固有层的浆细胞产生,这些部位常是变应原入侵和i型变态反应发生的场所。ige为亲细胞抗体,cε2和cε3功能区可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞膜上高亲和力fcεrⅰ结合。变应原再次进入机体与已固定在嗜碱性粒细胞、肥大细胞上ige结合,可引起ⅰ型变态反应。寄生虫感染或过敏反应发作时,局部的外分泌液和血清中ige水平都明显升高,因此本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗人IgE的重组抗体,其特征在于,所述重组抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.编码权利要求1所述重组抗体的基因,其特征在于,编码所述重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,编码所述轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.制备权利要求1所述重组抗体的方法,其特征在于,包括以下步骤:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将所述HEK 293细胞在35-40℃,4-8%CO2,90-130rpm,培养5-7天。

5.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.一种抗人ige的重组抗体,其特征在于,所述重组抗体重链可变区的氨基酸序列如seq id no.3所示,轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示。

2.编码权利要求1所述重组抗体的基因,其特征在于,编码所述重链可变区的核苷酸序列如seq id no.1所示,编码所述轻链可变区的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.制备权利要求1所述重组抗体的方法,其特征在于,包括以下步骤:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将所述hek 293细胞在35-40℃,4-8%co2,90-130rpm,培养5-7天。

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,将培养上清用proteina亲和层析进行纯化。

6.一种制备ige...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈博阳陆郁潘维华丁俊杰施启尧
申请(专利权)人:江苏三联生物工程股份有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1