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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及兽药抗生素生产,特别涉及一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法。
技术介绍
1、泰万菌素为新一代的大环内酯类抗生素,该抗生素为耐热链霉菌通过对泰乐菌素乙酰化及异戊酰化后得到,是一种不易产生耐药性的高效兽药抗生素,其药效远远大于泰乐菌素。目前泰万菌素发酵工艺仅可以适用于大生产中,由于泰万发酵过程中需要补加无菌的泰乐菌素溶液,而泰乐菌素作为一种抗生素不可以进行高温高压灭菌。在大生产过程中,通过0.22um的过滤膜进行加压过滤达到无菌的目的,但对于发酵菌种验证及发酵工艺的优化,在发酵小试上设备投入费用高且操作存在一定的危险性,用真空泵进行0.22um滤膜抽滤可以达到无菌效果,但泰乐浓度高,真空抽滤压力小,滤速非常慢,压力高容易将滤膜冲破,达不到无菌效果,且无菌过滤不易操作,因此制约着泰万菌素小试发酵罐对于菌种的验证工作,且行业内至今也没有相关方法报道,对于新菌种的验证由于发酵工艺的受限无法通过小试实验罐进行验证,只能在中试发酵罐上进行验证,无疑增加了发酵的成本及风险。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:
3、一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,如图1所示,包括如下步骤:
4、步骤a:实验前计算实验用泰乐菌素干粉的量,用天平按照泰乐菌素干粉:纯化水为1:4的比例称取溶解用纯化水,将纯化水倒入发酵罐
5、步骤b:将步骤a所得到的无菌水及无菌补料瓶、漏斗放置于生物安全柜中进行无菌冷却降温,待温度降至50℃进行步骤d操作;
6、步骤c:在无菌间内用天平按照步骤a的比例称取实验所需泰乐菌素干粉;
7、步骤d:将实验步骤c得到的泰乐菌素干粉在生物安全柜中用高温高压灭菌好的无菌漏斗溶于步骤b中,同时在补料瓶中加入过氧化氢溶液;
8、步骤e:将步骤d得到的溶解液拧好补料瓶盖置于预设好温度的烘箱中。
9、进一步地,步骤a中高温高压灭菌的温度设置为125℃,压力0.140mpa,时间35min。
10、进一步地,所述泰乐菌素干粉的纯度≥90%。
11、进一步地,步骤e中烘箱调节温度60-80℃,静置保温30min,滤液无菌正常。
12、进一步地,所述发酵罐中装液量的容积占发酵罐的容积的一半。
13、进一步地,步骤d中在补料瓶中加入与所用无菌水体积比为1000:1的过氧化氢溶液。
14、进一步地,过氧化氢溶液为1%过氧化氢溶液。
15、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:
16、本专利技术实验得到的泰乐菌素溶液为泰万发酵过程中所需要补加的物料,本专利技术补入发酵罐后无菌正常,是一种操作简单,成本较低,用时较少,打破了行业内泰万菌素优化后菌种无法在发酵小试罐上的菌种验证工作,同时降低了发酵的成本风险。
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1.一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,步骤A中高温高压灭菌的温度设置为125℃,压力0.140Mpa,时间35min。
3.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,所述泰乐菌素干粉的纯度≥90%。
4.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,步骤E中烘箱调节温度60-80℃,静置保温30min,滤液无菌正常。
5.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,所述发酵罐中装液量的容积占发酵罐的容积的一半。
6.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,步骤D中在补料瓶中加入与所用无菌水体积比为1000:1的过氧化氢溶液。
7.如权利要求6所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,过氧化氢溶液为1%过氧化氢溶液。
【技术特征摘要】
1.一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,步骤a中高温高压灭菌的温度设置为125℃,压力0.140mpa,时间35min。
3.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,所述泰乐菌素干粉的纯度≥90%。
4.如权利要求1所述的一种泰万菌素小试发酵过程中泰乐补料灭菌方法,其特征在于,步骤e中烘箱调节...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨耀刚,党福军,樊乐,白文锦,
申请(专利权)人:齐鲁制药内蒙古有限公司,
类型:发明
国别省市:
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