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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药,具体是一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶及其制备方法。
技术介绍
1、胶原蛋白是细胞外基质的主要成分,由三条左旋多肽α-链缠绕而成,主要存于人体皮肤中,可在皮肤角质层形成胶原膜,防止内在水分向外界蒸发,起到保湿的作用,改善角质层含水量,维持角质细胞正常功能,从而保护皮肤免受损伤。根据三肽链组成的不同,胶原蛋白可分成28种胶原蛋白分子。皮肤中的胶原蛋白主要是存在于真皮层中的ⅰ、ⅲ和ⅴ型胶原蛋白,基底膜中的ⅳ、ⅶ和ⅹⅶ型胶原蛋白。最常见的是ⅰ和ⅲ型胶原蛋白,ⅰ型胶原纤维粗大,在真皮层中含量丰富,ⅲ型胶原原纤维纤细,能够引导ⅰ型胶原的有序排列,使皮肤富有弹性。
2、近年来,胶原蛋白越来越多地被应用于伤口敷料,其作为细胞外基质重要组成成分可促进多种细胞如成纤维细胞、内皮细胞的迁移和增殖,促进生长因子等细胞因子的产生,从而促进伤口愈合。
3、动物源胶原蛋白提取成本高,且因异源性的原因,安全风险相对较高,故重组人源化胶原蛋白成为胶原蛋白类产品的首选。重组胶原蛋白原是由基因工程菌制备,无病毒隐患、生物相容性高、水溶性优良,被广泛用于组织工程、生物医学、药物释放等领域。重组胶原蛋白具有很高的生物学活性、良好的组织相容性,能促进真皮层纤维母细胞增生,提高细胞活性,并被成纤维细胞作为合成胶原蛋白的原料吸收,刺激细胞更多的合成胶原蛋白,使受损的皮肤得到填充和修复。重组ⅲ型人源化胶原蛋白(recombinant human collagenⅲ,rhc-ⅲ)是利用基因工程技术将人ⅲ型胶原蛋白的原始基因序列经过
4、皮肤组织相对脆弱,日常生活中不可避免会受到不同程度的损伤,常见有机械创伤、烧伤、烫伤、刮伤、术后伤口及糖尿病伤口等。创伤愈合是一个皮肤组织再生的过程,主要包括出血期、炎症期、细胞增殖期和组织重塑期。如果不加以干预,会出现局部血流减少,随之炎性细胞浸润,进而诱发肌肉痉挛,严重影响创伤愈合,更甚者会发展成慢性伤口,如何加速创伤愈合已成为全球普遍性治疗问题。因此,良好的促修复产品不仅需要能促进皮肤细胞增生,也需要能抑制炎症的发生和发展。重组人源ⅲ型胶原蛋白凝胶剂为胶原蛋白外敷,为患者面部细胞提供了湿润的生长环境,同时能有效清除肌肤不健康组织,抑制细菌繁殖,增强细胞分子生长能力,对于增强患者治疗效果具有重要作用。
5、凝胶剂是药物与适宜的辅料制成均一或混悬的半固体制剂,因凝胶剂的生物粘附性高、与皮肤接触面积大和药物局部浓度高的优点常用作伤口敷料。凝胶基质一般分为水性和油性两种基质,常用的水性凝胶基质有卡波姆、hpmc、cmc-na和pva等,油性凝胶基质有液体石蜡和聚乙烯等。水性凝胶剂易于涂展,黏度小、利于药物释放而被广泛应用。
6、目前应用于非慢性伤口(慢性伤口为伤口超过一个月未愈合或没有愈合倾向的难治性伤口)的医用敷料的研究相对较少,而能防止炎症发生(即防止感染)和抑制炎症发展从而协同促进伤口快速修复的重组ⅲ型人源化胶原蛋白凝胶更是少见报道。因此,开发一种稳定的胶原蛋白敷料有着广大的应用前景。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题,本专利技术提供了一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶及其制备方法。
2、本专利技术的技术方案如下:
3、一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,按质量百分比计,该凝胶由以下成分组成:
4、重组ⅲ型人源化胶原蛋白0.05%;
5、卡波姆0.1%~1.0%;
6、甘油0~20%;
7、吐温80 0.1%~0.5%;
8、三乙醇胺1.0%~1.5%;
9、d-甘露糖0.1%~2.0%;
10、余量为水。
11、所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,所述重组ⅲ型人源化胶原蛋白的分子量为55kda。
12、所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆包括卡波姆940、卡波姆941、卡波姆980、卡波姆981、卡波姆934p、卡波姆971p、卡波姆974p、卡波姆71g、卡波姆5984和卡波姆1342中的一种或多种。
13、所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为1~10:10~15。
14、优选地,所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为5:12。
15、所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,所述甘油、吐温80和d-甘露糖的质量比为0~200:1~5:1~20。
16、优选地,所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,所述甘油、吐温80 和d-甘露糖的质量比为75:2:1。
17、优选地,所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,按质量百分比计,该凝胶由以下成分组成:
18、重组ⅲ型人源化胶原蛋白0.05%;
19、卡波姆0.5%;
20、甘油15%;
21、吐温80 0.4%;
22、三乙醇胺1.2%;
23、d-甘露糖0.2%;
24、余量为水。
25、所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶的制备方法,包括如下步骤:
26、1)将卡波姆与水混合均匀,搅拌一定时间,得到第一溶液;
27、2)将甘油、吐温80、d-甘露糖与水混合均匀,得到第二溶液;
28、3)将第二溶液加入到第一溶液中,搅拌均匀,得到第三溶液;
29、4)向第三溶液中加入重组ⅲ型人源化胶原蛋白和三乙醇胺,并调整ph值,搅拌一定时间出料,灌装后环氧乙烷灭菌即得。
30、优选地,步骤1)中,所述搅拌速度为400r·min-1,搅拌时间为12h;步骤2)中,搅拌速度为300r·min-1,搅拌30min;步骤3)中,搅拌速度为300r·min-1,搅拌30min;步骤4)中,搅拌速度为600r·min-1,搅拌1h。
31、本专利技术的有益效果如下:
32、1)本专利技术通过加入卡波姆和三乙醇胺的比例,以改变该凝胶的粘稠度,从而使该凝胶具有优良的粘附性和延展性;通过加入甘油使其具有很强的保湿性,能形成凝胶膜覆盖在伤口处,从而能保护伤口免受感染;加入d-甘露糖使得该凝胶具有一定抗炎的活性,使伤口处微环境得到改善,进而增快创面的修复速度。
33、2)本专利技术加入一定比例的甘油来调节该凝胶的保湿性,使其能快速在创面形成保护膜,为创面提供湿性愈合环境;通过加入适宜浓度的d-甘露糖使该凝胶具有明显的抗炎活性,抵抗伤口创面感染,协同促进胶原蛋白对创面的修复作用。
34、3)本专利技术人源化胶原蛋白凝胶的制备方法将甘油和d-甘露本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于按质量百分比计,该凝胶由以下成分组成:
2.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的分子量为55kDa。
3.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆包括卡波姆940、卡波姆941、卡波姆980、卡波姆981、卡波姆934P、卡波姆971P、卡波姆974P、卡波姆71G、卡波姆5984和卡波姆1342中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为1~10:10~15。
5.如权利要求4所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为5:12。
6.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述甘油、吐温80和D-甘露糖的质量比为0~200:1~5:1~20。
7.如权利要求6所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述甘油、吐温80和D-甘露糖的质量比为
8.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于按质量百分比计,该凝胶由以下成分组成:
9.如权利要求1至8中任一项所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
10.如权利要求9所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶的制备方法,其特征在于步骤1)中,所述搅拌速度为400r·min-1,搅拌时间为12h;步骤2)中,搅拌速度为300r·min-1,搅拌30min;步骤3)中,搅拌速度为300r·min-1,搅拌30min;步骤4)中,搅拌速度为600r·min-1,搅拌1h。
...【技术特征摘要】
1.一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于按质量百分比计,该凝胶由以下成分组成:
2.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述重组ⅲ型人源化胶原蛋白的分子量为55kda。
3.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆包括卡波姆940、卡波姆941、卡波姆980、卡波姆981、卡波姆934p、卡波姆971p、卡波姆974p、卡波姆71g、卡波姆5984和卡波姆1342中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为1~10:10~15。
5.如权利要求4所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白凝胶,其特征在于所述卡波姆和三乙醇胺的质量比为5:12。
6.如权利要求1所述的一种促修复重组人源化胶原蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘轶轩,史叶挺,吴扬,汪土荣,
申请(专利权)人:钱望浙江生物科技有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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