【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药品检测，具体涉及一种林下山参保元汤的检测方法及其应用。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、保元汤出自明·孙志宏《简明医殽》，由人参、黄芪、甘草、肉桂、生姜五味药组成，其中人参大补元气、补脾益肺，为君药；黄芪补肺固表，为臣药；甘草补脾益气、调和诸药，为佐使药；肉桂温通血脉，温肾助阳，为佐药；生姜取其温中之效，助肉桂温阳之力，为使药。全方有补气温阳之功，主治元气虚弱、气虚类病证。
3、近年来，国家局陆续颁布《古代经典名方关键信息表》、《按古代经典名方目录管理的中药复方制剂药学研究技术指导原则(试行)》等相关法规，利好了经典名方新药的研发。制定合理的质量标准、建立全过程的质量控制体系对经典名方研发尤为关键。目前报道的保元汤质量检测方法较多，主要包括薄层鉴别、含量测定、指纹(特征)图谱，由于薄层鉴别的专属性不强，重复性不佳，超高效液相色谱、指纹(特征)图谱、多成分含量测定等先进的技术手段得到广泛应用。
4、文献《保元汤物质基准uplc-pda特征图谱的建立及化学成分指认》(中国实验方剂学杂志,2021,27(07)16-23)、《经典名方保元汤的物质基准研究》(杨净尧.长春中医药大学,2020)、《经典名方保元汤物质基准特征图谱及多指标量值传递研究》(药物分析杂志,2021,41(02):345-357)建立了保元汤物质基准冻干粉的uplc-pda
5、专利《一种保元汤的hplc特征图谱的检测方法》(申请号：201911323091.1)、《用于制备保元汤的组合物，保元汤制品，及其特征图谱测定和质量检测方法》(申请号：cn202010003443.1)、《一种保元药物组合物的制备方法及其检测方法》(申请号：202011521544.4)建立的特征图谱，然而，据专利技术人研究了解，供试品的处理过程中加入氨试液洗涤，会将保元汤中显酸性的有效成分如甘草酸、肉桂酸除去，供试品的制备方法欠妥当。同时，专利技术人还研究发现，《一种保元汤制剂的hplc特征图谱及其构建方法》(申请号：202110140726.5)建立的特征图谱中人参皂苷rg1、6-姜辣素的响应不明显，因此供试品的制备方法需改进，且分析时间较长；《一种保元汤的双波长特征图谱建立方法及其标准特征图谱》(申请号：202111514128.6)采用固相萃取法制备供试品溶液，过程繁琐，重现性较差，对君药人参的皂苷类组分指认较少，且分析时间过长，因此检测方法仍需改进。
技术实现思路
1、为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种林下山参保元汤的检测方法及其应用，本专利技术基于保元汤的传统制备方法和君臣佐使的配伍原则，建立林下山参保元汤双波长检测的特征图谱，同时此方法可测定4种人参皂苷的含量，作为林下山参保元汤较全面的质量控制方法，提升产品整体的质量控制水平。
2、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
3、一方面，一种林下山参保元汤的检测方法，包括林下山参保元汤的前处理过程以及特征图谱的建立过程；
4、所述林下山参保元汤的前处理过程为：向林下山参保元汤的汤剂加入甲醇混合均匀，静置后取上清液蒸干并加水复溶，然后依次采用三氯甲烷、水饱和正丁醇进行振摇提取或直接采用水饱和正丁醇进行振摇提取，将正丁醇提取液蒸干后加入甲醇溶解，过滤后的滤液为供试品；其中，直接采用水饱和正丁醇进行振摇提取获得的供试品为供试品1，依次采用三氯甲烷、水饱和正丁醇进行振摇提取获得的供试品为供试品2；
5、所述特征图谱的建立过程为：将若干批次林下山参保元汤前处理后的供试品进行高效液相色谱检测获得含有人参皂苷rg1、人参皂苷rb1、人参皂苷re、人参皂苷rb2、人参皂苷rf、人参皂苷rc、人参皂苷rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、刺芒柄花苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、6-姜辣素的特征峰的图谱，根据特征峰的相对保留时间构建林下山参保元汤的特征图谱；其中，供试品1的检测波长为250～260nm，供试品2的检测波长为200～210nm。
6、优选地，高效液相色谱检测中，检测波长为200～210nm、250～260nm，流动相a为乙腈，流动相b为体积分数为0.02～0.08％的磷酸水溶液，色谱柱填料为1.6～2.1μm的十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱长度为50～150mm，色谱柱直径为1.8～2.5mm。
7、另一方面，一种上述林下山参保元汤的检测方法在工业化生产林下山参保元汤制剂中进行质量监控的应用。
8、本专利技术的有益效果为：
9、(1)本专利技术以按传统方式煎煮的林下山参保元汤为分析样品，所建立的特征图谱体现林下山参保元汤标准汤剂的质量，为林下山参保元汤的基准样品研究提供参考价值。
10、(2)本专利技术采取合理的供试品制备方法，去除林下山参保元汤中的多糖、蛋白质、鞣质等成分，保留药效物质基础成分，避免色谱图中的杂峰干扰，使多数共有峰的分离度较好。
11、(3)本专利技术通过流动相的选择和色谱柱的配合，使林下山参保元汤中更多的人参皂苷类成分得到分离，在检测林下山参保元汤特征图谱的同时进行4种人参皂苷的含量测定。
12、(4)本专利技术选择200～210nm、250～260nm作为林下山参保元汤特征图谱的检测波长，200～210nm波长处人参皂苷有最大吸收，可以获得包括人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rb1、人参皂苷rd、人参皂苷rb2、人参皂苷rf、人参皂苷rc共有峰的特征图谱；在250～260nm处，黄芪、甘草、肉桂、生姜的化学成分有明显吸收，分离度较好，可以获得包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、刺芒柄花苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、6-姜辣素的特征图谱。
13、(6)本专利技术可缩短单个样品的检测时间至65min以内，提高检验效率。
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1.一种林下山参保元汤的检测方法，其特征是，包括林下山参保元汤的前处理过程以及特征图谱的建立过程；
2.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，所述特征峰的指认过程为：将人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rf、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、刺芒柄花苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、6-姜辣素配成设定浓度的对照品溶液，采用高效液相色谱分别对林下山参保元汤和对照品溶液进行检测，根据对照品高效液相色谱的峰保留时间确定林下山参保元汤高效液相色谱的对应特征峰。
3.如权利要求2所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，对照品溶液的溶剂为甲醇水溶液，优选地，甲醇水溶液的体积分数为75～85％。
4.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，高效液相色谱检测中，检测波长为200～210nm、250～260nm，流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.02～0.08％的磷酸水溶液，色谱柱填料为1.6～2.1μm的十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱长度为50～15
5.如权利要求4所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，高效液相色谱检测过程中，流动相的流速为0.10～0.25mL/min，进样量为3～6μl。
6.如权利要求4所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，高效液相色谱检测过程中，梯度洗脱程序如下：
7.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，将供试品特征图谱与对照品参照物峰进行比对，203nm波长下供试品特征图谱中呈现14个特征峰，254nm波长下供试品特征图谱中呈现18个特征峰；
8.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，还包括林下山参保元汤检测的过程，所述林下山参保元汤检测的过程为：采用高效液相色谱对待测样品检测，获得待测样品的色谱，将所述待测样品的色谱与特征图谱进行比较；
9.如权利要求8所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，林下山参保元汤检测的过程中的高效液相色谱的条件与特征图谱的建立过程中的高效液相色谱的条件相同。
10.一种权利要求1～9任一所述的林下山参保元汤的检测方法在工业化生产林下山参保元汤中进行质量监控的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种林下山参保元汤的检测方法，其特征是，包括林下山参保元汤的前处理过程以及特征图谱的建立过程；
2.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，所述特征峰的指认过程为：将人参皂苷rg1、人参皂苷rb1、人参皂苷re、人参皂苷rb2、人参皂苷rf、人参皂苷rc、人参皂苷rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、刺芒柄花苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、6-姜辣素配成设定浓度的对照品溶液，采用高效液相色谱分别对林下山参保元汤和对照品溶液进行检测，根据对照品高效液相色谱的峰保留时间确定林下山参保元汤高效液相色谱的对应特征峰。
3.如权利要求2所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，对照品溶液的溶剂为甲醇水溶液，优选地，甲醇水溶液的体积分数为75～85％。
4.如权利要求1所述的林下山参保元汤的检测方法，其特征是，高效液相色谱检测中，检测波长为200～210nm、250～260nm，流动相a为乙腈，流动相b为体积分数为0.02～0.08％的磷酸水溶液，色谱柱填料为1.6～2.1μm的十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱长度为50～150mm，色谱柱直径为1.8～2.5mm；优选地，流动...
【专利技术属性】
技术研发人员：王佳琳，俞仑，李欣欣，杨晓刚，马旋，任松鹏，马振元，
申请(专利权)人：辽宁上药好护士药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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