【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种抗体融合蛋白及其制备方法与应用。
技术介绍
1、二乙酰精胺(diacetylspermine，das)，cas号61345-83-3，分子量286.4。它是精胺的二乙酰化衍生物，健康人尿液中的das含量占总多胺的0.46％，且与年龄、性别、女性怀孕和月经状况有着直接关系。
2、目前，关于癌症患者尿液中das的产生机制尚不明确，但是多年来的研究结果表明，多种癌症尿液的das水平确实会较正常人有不同程度的升高。现有研究表明，快速生长的组织一般都有活跃的多胺合成体系，肿瘤的快速生长亦有赖于多胺含量的大幅增长。das属于多胺类化合物，很有可能参与到肿瘤发生、发展、转移等环节中。
3、此外，尿液检测作为无痛、便捷、非侵入的方式可以获得受检人群更高的依从性，也有助于提高检测效率。目前，das在癌症的早期诊断、治疗、预后及监测复发等方面均表现出一定的指向性作用。因此，需要开发一种快速用于尿液中das诊断用的试剂。
技术实现思路
1、为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目在于提供一种二乙酰精胺单域抗体融合蛋白及其检测试剂盒和应用。
2、因此，本专利技术一方面提供了一种单域抗体，所述单域抗体能特异性结合二乙酰精胺，所述的单域抗体的vhh序列如seq id no.1所示。
3、再一方面，本专利技术还提供了一种单域抗体融合蛋白，所述单域抗体融合蛋白由所述的两个单域抗体通过连接子连接，其氨基酸序列如seq id no.2所示。
4、再一方面，本专利技术还提供了一种二乙酰精胺检测试剂盒，所述试剂盒包括有效量的所述的单域抗体融合蛋白、有效量的das-ova以及配套的检测试剂。
5、优选地，本专利技术所述的单域抗体融合蛋白标记吖啶酯，所述的标记吖啶酯的单域抗体融合蛋白使用时的稀释倍数为500倍，其标记为试剂r2。
6、优选地，本专利技术所述的das-ova偶联磁微粒，所述的偶联磁微粒的das-ova使用时的浓度为0.5mg/ml，其标记为试剂r1。
7、优选地，本专利技术所述的配套的检测试剂包括校准品、洗涤液和吖啶酯发光液。
8、优选地，本专利技术所述的校准品为使用二乙酰精胺为母液配制的不同浓度的二乙酰精胺溶液，其浓度分别为0ng/ml、5ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml、150ng/ml。
9、优选地，本专利技术所述的洗涤液为pbst缓冲液。
10、再一方面，本专利技术还提供了一种所述的单域抗体融合蛋白在制备二乙酰精胺检测试剂中的应用。
11、本专利技术筛选制备的特异性结合二乙酰精胺的单域抗体，并在此基础上制备的单域抗体融合蛋白，均具有良好的特异性和亲和性，且单域抗体融合蛋白较单域抗体具有更高的亲和性。因此，本专利技术制备的单域抗体融合蛋白为建立二乙酰精胺的检测提供了良好的工具。
12、同时，本专利技术在制备的单域抗体融合蛋白的基础上，开发了用于二乙酰精胺检测的试剂盒。本专利技术的试剂盒具有灵敏度高、检测速度快、检测准确度高的优点，适用于二乙酰精胺大范围快速检测。
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1.一种单域抗体，所述单域抗体能特异性结合二乙酰精胺，其特征在于，所述的单域抗体的VHH序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种单域抗体融合蛋白，其特征在于，所述单域抗体融合蛋白由权利要求1所述的两个单域抗体通过连接子连接，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种二乙酰精胺检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括有效量的权利要求2所述的单域抗体融合蛋白、有效量的DAS-OVA以及配套的检测试剂。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的单域抗体融合蛋白标记吖啶酯，所述的标记吖啶酯的单域抗体融合蛋白使用时的稀释倍数为500倍，其标记为试剂R2。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的DAS-OVA偶联磁微粒，所述的偶联磁微粒的DAS-OVA使用时的浓度为0.5mg/ml，其标记为试剂R1。
6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的配套的检测试剂包括校准品、洗涤液和吖啶酯发光液。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述的校准品为使用二乙酰精胺为母液配制的不同
8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述的洗涤液为PBST缓冲液。
9.一种如权利要求2所述的单域抗体融合蛋白在制备二乙酰精胺检测试剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种单域抗体，所述单域抗体能特异性结合二乙酰精胺，其特征在于，所述的单域抗体的vhh序列如seq id no.1所示。
2.一种单域抗体融合蛋白，其特征在于，所述单域抗体融合蛋白由权利要求1所述的两个单域抗体通过连接子连接，其氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.一种二乙酰精胺检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括有效量的权利要求2所述的单域抗体融合蛋白、有效量的das-ova以及配套的检测试剂。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的单域抗体融合蛋白标记吖啶酯，所述的标记吖啶酯的单域抗体融合蛋白使用时的稀释倍数为500倍，其标记为试剂r2。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：耿开通，黄国武，马贵均，
申请(专利权)人：广州杰博生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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