酵母细胞核作为载体在核酸递送中的应用制造技术

技术编号:40956815 阅读:20 留言:0更新日期:2024-04-18 20:33
本发明专利技术涉及生物技术技术领域,尤其涉及酵母细胞核作为载体在核酸递送中的应用。本发明专利技术以酿酒酵母细胞核作为递送载体,将酿酒酵母细胞核内的外源超大DNA,利用细胞核中的组蛋白和核小体的保护,将外源超大DNA成功递送到哺乳动物细胞系中,有效地解决了本领域无法将超大DNA完整地送到向哺乳动物的技术难题,具有及其重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸转染,尤其涉及酵母细胞核作为载体在核酸转染中的应用。


技术介绍

1、目前,细胞转染载体可分两大类:病毒载体和非病毒载体。病毒载体转染效率高,但具有免疫原性和致突变性,因此极大地限制了它的应用;与病毒载体相比,非病毒载体有许多潜在的优势,如:毒性低、免疫原性以及潜在的致癌性都较低、转移的核苷酸大小范围广(从寡核苷酸到人工染色体均可)、质量控制较方便,制剂方法较简单以及剂量可控。

2、目前,非病毒载体转染法中运用最广泛的是化学法,即利用阳离子聚合物,将裸露的dna包裹或者压缩后进行递送,递送的方法有很多,包括电转、转染、病毒侵染等方法,但对于超大dna的转移方法,受缺少合适的载体的限制。当目标/待递送的dna长度过长时,体外提取容易受剪切力影响而断裂,进入受体细胞也受长度限制,最终导致转染效率变的很低。之前已有利用酿酒酵母与动物细胞融合将酿酒酵母内的遗传物质递送至哺乳动物细胞的研究报道,该方法存在的缺陷有:(1)引入大量的酵母细胞器、酶等杂质;(2)存在生物安全的问题,降低转移的效率。因此需要一个合适的载体,将超大dna从微生物中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.酵母细胞核作为核酸递送载体或转移载体将核酸转入到动物细胞中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,包括:

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述转入的方法包括:电转、显微注射、脂质体转染、PEG介导的融合、病毒转染、细胞融合中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述酵母包括酿酒酵母、芽殖酵母或裂殖酵母。

5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述酵母细胞核的粒径≤1μm。

6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述动物细胞为哺乳动物细胞。

7.根据权利要求6所述的应...

【技术特征摘要】

1.酵母细胞核作为核酸递送载体或转移载体将核酸转入到动物细胞中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,包括:

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述转入的方法包括:电转、显微注射、脂质体转染、peg介导的融合、病毒转染、细胞融合中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述酵母包括酿酒酵母、芽殖酵母或裂殖酵母。

5.根据权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:元英进刘悦刘子川
申请(专利权)人:天津大学合成生物前沿研究院
类型:发明
国别省市:

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