【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种绿茶提取物及其制备方法。
技术介绍
1、茶叶的成分，会受到气候、季节、树龄以及种植条件的影响而改变。茶叶含有多种有效化学成分，包括多酚类、氨基酸、蛋白质、生物碱（咖啡因、茶碱和可可碱）、挥发性成分、矿物质等。在这些物质中，多酚类物质是茶叶中最重要的组成成分，在新鲜绿茶叶中，儿茶素含量最为丰富，可占茶叶干重的30–40%。
2、多酚类：是存在于茶树中的多羟基酚性化合物的混合物，约占茶鲜叶干重18-36%，是茶叶中最重要的组成成分。茶多酚是目前发现和利用的无毒副作用、高效、天然抗氧化剂，其抗氧化效果优于维生素e。人体内过剩的自由基会损害细胞膜，并使脂褐质(老年色素)大量堆积，茶多酚的酚羟基可提供活泼氢使自由基灭活，本身被氧化成较稳定的含邻苯二酚结构的自由基，达到清除自由基，延缓皮肤老化的作用。此外，茶多酚还具有调节血脂、预防心脑血管疾病、抗癌、抗肿瘤、良好的免疫功能、抑菌、消炎等多种生物功能。酯型儿茶素在抗氧化、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、防癌、防辐射等药理药效中发挥有重要的作用，因此对儿茶素中起主要作用的酯型儿茶素和更为关注，其分离成为深入研究与应用的需要。
3、有机溶剂萃取法是利用茶多酚与杂质在有机溶剂中的溶解度不同而实现茶多酚的纯化。常用的萃取溶剂有氯仿、石油醚、乙酸乙酯等，乙酸乙酯是萃取中最常用的溶剂。
4、搅拌吸附法是利用搅拌力增大茶多酚样品与吸附剂的接触面积，从而最大程度地除去茶多酚中的杂质达到纯化茶多酚的一种方法。常用的吸附剂有活性炭、硅藻土、活性黏土、酸性白土和纤维素
5、柱层析法是常用的纯化茶多酚的技术，原理是利用茶多酚样品组分在两相之间的分配系数不同，通过吸附―解析的过程把不同理化性质的物质分离开来，从而得到纯化的目的。根据所选用的填料不同，分为吸附柱分离法、离子交换柱分离法、凝胶柱分离法，硅胶、聚酰胺、大孔树脂是目前最常用的填料。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于探寻一种简单易行、经济实惠的酯型儿茶素单体分离制备方法。由于儿茶素的结构和性质比较相似，有效地分离制备儿茶素单体具有一定的难度。本专利技术创造性的结合酸性白土吸附脱法、乙醇沉淀纯化法、萃取富集法、层析提纯法，所用制备方法绿色环保，所用溶剂可回收重复使用，是一种经济实惠、操作简单的酯型儿茶素单体分离方法，本专利技术优点在于酯型儿茶素具有抗氧化、抗肿瘤、防辐射等重要的作用。
2、本专利技术提供的一种绿茶提取物及其制备方法的制备工艺流程，包括以下步骤：
3、步骤（1）酸性白土吸附后的茶多酚提取液制备
4、绿茶样品粉碎处理，过筛。将粉碎的茶样品与蒸馏水按一定比例混合后，在微波试验仪中进行浸提。对提取液进行减压抽滤，得到茶多酚提取液。取90~120ml茶多酚提取液，加入酸性白土进行吸附。机械搅拌下，进行2~5次吸附，每次30~60min，得到吸附后的茶多酚提取液。
5、步骤（2）醇沉后的茶多酚制备
6、将吸附后的茶多酚提取液于冷冻离心机上离心，上清液于旋转蒸发仪上浓缩至原体积的三分之一，加入无水乙醇，醇沉2~3次，每次4~7h。离心取上清液，旋转蒸发浓缩至所需浓度可得到醇沉后的茶多酚提取液。
7、步骤（3）乙酸乙酯萃取富集酯型儿茶素
8、用柠檬酸调节醇沉后的茶多酚提取液的ph值至3~6，加入与浓缩液等体积的乙酸乙酯，进行萃取处理。合并萃取液，通过旋转蒸发浓缩。将浓缩液置于预先称重的培养皿上，于冷冻干燥机上进行干燥处理。干燥后得到富集的酯型儿茶素。
9、步骤（4）柱层析分离酯型儿茶素馏分
10、第一步，将聚酰胺置于乙醇中加热回流，过滤并洗涤滤饼，回收乙醇并重复使用。再向聚酰胺中加入一定量的超纯水浸泡过夜。
11、第二步，固定层析柱，倒入超纯水并倒入处理好的聚酰胺，使其自然沉降，同时敲打层析柱使其填充紧密后关闭活塞。
12、第三步，称取自制茶多酚，溶解后加入聚酰胺层析柱中，用洗脱剂等速洗脱，分段收集洗脱馏分，用高效液相色谱检测直至洗脱完全，收集egcg和ecg产品的馏份。
13、步骤（5）高纯度酯型儿茶素产品制备
14、将含egcg和ecg的馏分合并，在旋转蒸发仪上减压蒸馏浓缩。浓缩液经冷冻干燥后得到富集产品。低纯度馏分收集后作为层析原料再次纯化。将初次得到的富集产品与再次纯化的产品混合。最后得到白色粉末为分离后的高纯度酯型儿茶素产品。
15、作为优选，步骤（1）酸性白土吸附后的茶多酚提取液制备方法包括：
16、称取20~35g绿茶样品，采用料理机进行粉碎处理，过50~80目筛。以蒸馏水为溶剂，按料液比1:20~1:10于mg08s-2b微波试验仪中60~90℃浸提50~80min，微波辐照功率450~600w。对提取液进行减压抽滤，滤液即为茶多酚提取液。准确量取90~120ml茶多酚提取液，加入2~5g酸性白土，100~130r·min-1的机械搅拌下吸附2~5次，每次30~60min，可得到吸附后的茶多酚提取液；
17、采用本专利技术，优点在于通过使用料理机进行粉碎处理，能够更充分地释放茶叶中的茶多酚成分。微波试验仪的浸提过程能够在短时间内高效地提取茶多酚，提高了生产效率。使用蒸馏水作为溶剂，避免了使用有机溶剂，从而降低了对环境的污染和对资源的消耗。采用酸性白土吸附技术可以高效地去除茶多酚提取液中的杂质和色素，净化茶多酚产品，因此提高了产品质量。
18、作为优选，步骤（2）醇沉后的茶多酚制备方法包括：
19、将吸附后的茶多酚提取液于tdl5m冷冻离心机上3000~4500r·min-1离心9~12min，上清液于n-1001旋转蒸发仪上浓缩至原体积的三分之一，加入浓缩液3~6倍体积的无水乙醇，醇沉2~3次，每次4~7h。离心取上清液，使用旋转蒸发仪将上清液浓缩至所需浓度可得到醇沉后的茶多酚提取液；
20、采用本专利技术，优点在于使用无水乙醇进行醇沉不会对茶多酚成分的结构和活性产生影响，具备较好的保留效果，茶多酚产品质量稳定。通过使用冷冻离心机进行高速离心分离，能够将茶多酚提取液中的杂质和茶多酚进行有效分离，提高了茶多酚的纯度和分离效果。使用旋转蒸发仪对上清液进行浓缩，能够快速地将上清液中的水分和低浓度茶多酚去除，提高了浓缩效率和生产效率。整个浓缩过程在密闭的系统中进行，减少了与有害物质的接触，提高了安全性。
21、作为优选，步骤（3）乙酸乙酯萃取富集酯型儿茶素方法包括：
22、用柠檬酸调节醇沉后的茶多酚提取液ph值至3~6，加入与浓缩液等体积的乙酸乙酯，萃取2~3次，每次15~30min。合并萃取液，旋转蒸发浓缩，将浓缩液置于预先称重的培养皿上，于lgj-18s冷冻干燥机上干燥即可富集酯型儿茶素；
23、采用本专利技术，优点在于使用乙酸乙酯进行萃取，能够将醇沉后的茶多酚提取液中的酯型儿茶素与其他成分进行有效分离，提高了酯型儿茶素的纯度和分离效果。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于，包括有：
2.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
3.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
4.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
5.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
6.根据权利要求5所述的一种绿茶提取物及其制备方法的制备工艺，其特征在于：
7.根据权利要求6所述的一种绿茶提取物及其制备方法的制备工艺，其特征在于：
8.根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法的制备工艺，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于，包括有：
2.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
3.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
4.一种根据权利要求1所述的一种绿茶提取物及其制备方法，其特征在于：
5.一种根...
【专利技术属性】
技术研发人员：程勇，邵云东，
申请(专利权)人：杭州天草科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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