【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测，具体涉及一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒及应用。
技术介绍
1、神经母细胞瘤是儿科常见的恶性肿瘤，每百万名15岁以下儿童中有10.2例。神经母细胞瘤的临床表现多种多样，从没有任何症状的肿块到因局部侵袭、广泛扩散或两者兼而有之而导致病情危重的原发性肿瘤。神经母细胞瘤的发病风险与孕妇使用娱乐性药物、染发剂等因素有关，还与儿童遗传变异有关。基于遗传变异的研究结果表明，casc15rs6939340g>a，lmo1rs110419t>c、rs4758051c>t，rs10840002a>g、rs204938t>c、rs2168101c>a以及linc00673 rs11655237g>a位点可作为识别神经母细胞瘤高危人群的标志物。针对上述位点采用的检测方法有基因分型芯片、taqman探针法等，但这些方法成本高、效率低，不能对位点进行特定检测或只能对单一位点进行基因分型，无法对多个位点同时检测。目前尚无经济、高效的试剂盒用于检测神经母细胞瘤多个风险位点的基因型。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒及应用，该试剂盒能够精准的识别出神经母细胞瘤高危人群。
2、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒，所述试剂盒包括多重pcr引物组和单碱基延伸引物组；所述多重pcr引物组的核苷酸序列如seq id no.1～1
4、优选的，所述试剂盒还包括多重pcr扩增试剂：extaqpremix、双蒸水、sap酶和exonuclease i酶，基因型检测试剂：snapshot multiplex、双蒸水和sap酶。
5、本专利技术提供所述试剂盒在制备识别神经母细胞瘤高危人群产品中的应用。
6、本专利技术还提供了一种用于非疾病诊断目的的检测神经母细胞瘤易感性的方法，包括如下步骤：(1)提取样本外周血基因组dna；(2)利用所述的多重pcr引物组对dna进行多重pcr扩增，得多重pcr扩增产物；(3)利用所述的单碱基延伸引物组对多重pcr扩增产物进行多重单碱基延伸反应，得延伸产物，对延伸产物利用测序仪分析。
7、优选的，所述多重pcr扩增体系为：总体积20μl，4μl多重pcr引物预混液、10μlextaqpremix、2μldna和4μl双蒸水。
8、优选的，所述多重pcr扩增程序：95℃ 2min+(95℃ 20s+65℃(td-0.5/℃)40s+72℃ 1min)×12+(95℃ 20s+59℃ 30s+72℃ 1min)×24+72℃ 10min+4℃∞。
9、优选的，所述多重单碱基延伸反应体系为：总体积为10μl，5μlsnapshotmultiplex、2μl多重pcr产物，1μl单碱基延伸引物预混液、2μl双蒸水。
10、优选的，所述多重单碱基延伸反应程序：95℃ 10s+(95℃ 10s+50℃ 5s+60℃30s)×35+60℃ 30s+4℃∞。
11、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
12、本专利技术提供了一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒，该试剂盒能够经济、高效的检测待测者casc15基因上的rs6939340g>a，lmo1基因上的rs110419t>c、rs4758051c>t、rs10840002a>g、rs204938t>c、rs2168101c>a以及linc00673基因上的rs11655237g>a位点的基因型，可精准识别神经母细胞瘤高危人群，有助于实施明确的个体化预防及治疗，具有广泛的应用前景。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括多重PCR引物组和单碱基延伸引物组；所述多重PCR引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～14所示，所述单碱基延伸引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.15～21所示。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括多重PCR扩增试剂：ExTaqpremix、双蒸水、SAP酶和Exonuclease I酶，基因型检测试剂：SNaPshot Multiplex、双蒸水和SAP酶。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒在制备识别神经母细胞瘤高危人群产品中的应用。
4.一种用于非疾病诊断目的的检测神经母细胞瘤易感性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述多重PCR扩增体系为：总体积20μL，4μL多重PCR引物预混液、10μL ExTaqpremix、2μL DNA和4μL双蒸水。
6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述多重PCR扩增程序：95℃ 2min+(95℃20s+65℃(TD-0.5/℃)40
7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述多重单碱基延伸反应体系为：总体积为10μL，5μL SNaPshot Multiplex、2μL多重PCR产物，1μL单碱基延伸引物预混液、2μL双蒸水。
8.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述多重单碱基延伸反应程序：95℃ 10s+(95℃ 10s+50℃ 5s+60℃ 30s)×35+60℃ 30s+4℃∞。
...【技术特征摘要】
1.一种检测神经母细胞瘤易感性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括多重pcr引物组和单碱基延伸引物组；所述多重pcr引物组的核苷酸序列如seq id no.1～14所示，所述单碱基延伸引物组的核苷酸序列如seq id no.15～21所示。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括多重pcr扩增试剂：extaqpremix、双蒸水、sap酶和exonuclease i酶，基因型检测试剂：snapshot multiplex、双蒸水和sap酶。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒在制备识别神经母细胞瘤高危人群产品中的应用。
4.一种用于非疾病诊断目的的检测神经母细胞瘤易感性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述多重pcr扩增体系为：总体积...
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