一种牛睾丸类器官的构建方法技术

本发明专利技术一种牛睾丸类器官的构建方法，属于分子生物学技术领域；本发明专利技术通过从牛睾丸实质组织中分离出原代细胞，纯化后按比例接种于培养皿中，通过培养可形成类曲细精管样结构，在研究大家畜生殖系统生态位生精微环境、雄性不育及其诊断和治疗方面具有重要意义，为后续的睾丸类器官应用奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学，尤其涉及一种牛睾丸类器官的构建方法。

技术介绍

1、睾丸在雄性生物中有两个主要作用：配子生成和产生雄激素。曲细精管管壁由支持细胞及各级生精细胞形成的内部生精上皮和管周肌样细胞形成的外层组成，精原干细胞(spermatogonial stem cells，sscs)作为未分化的精原细胞，能持续产生大量精子，是精子发生的基础。支持细胞(sertoli cells,scs)是生殖细胞分化的场所饲育细胞，相邻scs支持细胞之间的紧密连接是血睾屏障的主要组成部分。此外，睾丸间质中存在间质细胞(leydig cells，lcs)其分泌的睾酮可启动胎儿性腺的雄性化，并维持性成熟后期的精子发生过程。精子发生的效率依赖于scs支持细胞-精原干细胞sscs生态位，它能够使发育中的生殖细胞在空间上正确的排列，并接收sscs自我更新和分化所需的各种信号和细胞因子。

2、家畜雄性育种及种质保存是生殖医学及生物学中的重要的课题。牛是重要的经济动物，但一些遗传性因素如隐睾、睾丸发育不全，免疫性及疾病等的因素会导致公牛繁殖障碍，而针对这个此问题的研究本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，所述步骤S2中，二步酶消化法所用消化液配方包括消化液I和消化液II；

3.根据权利要求2所述的牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，所述步骤S2中，将剪碎的组织先置于消化液I中37℃消化30min,1500rpm离心5min；弃上清后在消化液II中继续消化，直至可见单细胞时加入等体积胎牛血清终止消化。

4.根据权利要求1所述的牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，所述步骤S3中，使用Percoll法纯化睾丸间质细胞和支持细胞具体包括以下内...

【技术特征摘要】

1.一种牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，所述步骤s2中，二步酶消化法所用消化液配方包括消化液i和消化液ii；

3.根据权利要求2所述的牛睾丸类器官的构建方法，其特征在于，所述步骤s2中，将剪碎的组织先置于消化液i中37℃消化30min,1500rpm离心5min；弃上清后在消化液ii中继续消化，直至可见单细胞时加...

【专利技术属性】
技术研发人员：张学明，杨蕊，张博洋，陈斓歆，张言，王玥琦，蒋道臻，唐博，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：