本发明专利技术公开了一种防治糖尿病的风轮菜有效部位提取物的制备方法和应用。该有效部位提取物以风轮菜（Ｃｌｉｎｏｐｏｄｉｕｍ?ｃｈｉｎｅｎｓｅ（Ｂｅｎｔｈ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）为原料，经粉碎、醇提取、减压回收后碍到浓缩物，浓缩物经石油醚、乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯提取物，再经大孔树脂纯化而得到。该有效部位提取物主要由总黄酮和萜类组成，具有明显的降低链脲佐菌素糖尿病小鼠的血糖，降低血清胆固醇含量，保护胰岛细胞，抑制α－葡萄糖苷酶活性，和保护血管内皮细胞的作用。可见，风轮菜有效部位提取物具有良好的降血糖、降血脂、保护胰岛细胞和血管内皮细胞功能，可用于防治糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱及糖尿病性心脑血管方面并发症。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药风轮菜有效部位提取物的制备方法，以及该有效部位提取物的降 血糖、降血脂、保护胰岛细胞和血管内皮细胞功能，及其在防治糖尿病、糖尿病引起的脂代 谢紊乱及糖尿病性心脑血管并发症方面的应用。
技术介绍
糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的一组代谢异常综合症。据WHO估计 1995 2025年，全球糖尿病发病率将增至3% 5%，预计达3亿患者，患者年龄则从65岁 以上趋向45 54岁。糖尿病可分为胰岛素依赖型糖尿病(Insulin Dependent Diabetes Mellitus, IDDM又称1型)和非胰岛素依赖型糖尿病(Noinsulin Dependent Diabetes Mellitus, NIDDM又称2型)。糖尿病的主要危害在于它的血管并发症，包括大血管病变和 微血管病变。糖尿病大血管并发症主要是指脑血管、心血管和下肢血管的病变。糖尿病患 者并发心脑血管病的几率要远远高于非糖尿病患者。目前的研究认为糖尿病引起的大血管 病变是糖尿病患者致死致残的主要原因。目前治疗糖尿病的药物主要有磺脲类，双胍类、胰岛素、a-葡萄糖苷酶抑制剂、噻 唑烷酮类等。这些药会引起一些副作用如低血糖，肝毒性，乳酸性酸中毒及腹泻。中药治疗 糖尿病具有明显的优势，其治疗糖尿病是多环节、多途径、多靶点的综合协调作用，其药源 丰富、价格低廉、毒副作用小，所以从中药筛选具有抗糖尿病药物的前景是十分广阔的。风轮菜为唇形科风轮菜属植物风轮菜(Clinopodium chinense (Benth.) 0. Kuntze)的全草，风轮菜微苦、涩，凉。归肝经。风轮菜为《中华人民共和国药典》收载中 药断血流的原植物，具有清热解毒、止血活血的功效。风轮菜在福建民间用于治疗糖尿病。 本实验室前期研究发现风轮菜具有降血糖作用，但尚未有针对风轮菜有效部位提取物的制 备工艺、以及该有效部位提取物的降血糖、降血脂、保护胰岛细胞和血管内皮细胞功能，及 其在防治糖尿病及糖尿病性心脑血管并发症方面的报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种从中药风轮菜中制备有效部位提取物的方法，以及该有效部位 提取物的降血糖、降血脂、保护胰岛细胞和血管内皮细胞功能，及其在防治糖尿病及糖尿病 性心脑血管并发症方面的应用。1、风轮菜有效部位提取物的制备方法(1)风轮菜全草干燥粉碎；(2)乙醇或甲醇或丙醇及它们的含水物回流提取，或浸渍提取，提取液减压浓缩；(3)将浓缩的提取物依次用石油醚、乙酸乙酯萃取3 4次；(4)乙酸乙酯提取物用大孔树脂柱进行柱层析；(5)水洗脱杂质后，乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩干燥，得提取物。上述制备方法的条件范围为步骤(2)中乙醇或甲醇或丙醇的浓度为10 90%，提取方法为回流、浸渍；步骤(5)中乙醇梯度洗脱范围为20 80%。2、风轮菜有效部位提取物主要由总黄酮和萜类组成，黄酮的主要成分为香蜂草 苷、柚皮素、芹菜素、异樱花素、木犀草素、金合欢素等；熊果酸为萜类的主要成分。其中总黄 酮含量的测定采用紫外分光光度法，以NaN02-Al(N03)3-Na0H显色测定总黄酮含量，以芦丁 计，黄酮类化合物的总含量不低于50%。本专利技术所述风轮菜有效部位提取物可与常规辅助剂和/或赋型剂混合，制备成各 种剂型，用于预防或治疗。针剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、糖衣丸剂、溶液剂等都为可供选择的 药物剂型。胶囊剂、片剂、颗粒剂、糖衣丸剂等剂型可以含有一种或多种常用赋型剂一填料和 增容剂如淀粉，微晶纤维等；粘合剂如羧甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮等；致湿剂如甘 油；崩解剂如碳酸钙等；吸收剂如高岭土等；润滑剂如滑石粉等。药用赋型剂可以是固体、半固体、液体等各种形态的，配方辅助剂可以是各种类型 的。溶液剂可以含有一般的溶剂、增溶剂、乳化剂、防腐剂等，如水、乙醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸苄酯等。胶囊剂、片剂、颗粒剂、糖衣丸剂、溶液剂等剂型可以用已知的常规方法制备，可以 将风轮菜有效部位提取物与一种或多种赋型剂混合，制备剂型。3、风轮菜有效部位提取物降血糖、降血脂和保护血管内皮细胞活性3. 1风轮菜有效部位提取物(CCE)对链脲佐菌素糖尿病小鼠血糖、胆固醇(TC)、 血清胰岛素及胰岛组织的影响随机取出小鼠10只作为正常组，其余小鼠禁食16_17h后，尾静脉注射链脲佐菌 素160mg/kg，注射后72h后眼眶后静脉丛取血，分离血清，测定血糖，选空腹血糖> llmmol/ L的小鼠40只，随机分为4组，分别按10ml/kg体重经口给予CCE 50、100mg/kg，二甲双胍 (Metformin) 200mg/kg以及等体积的0. 2% CMC-Na，每日一次，连续12天给药。第6天末 次给药后1. 5h (禁食5h)，小鼠眼眶后静脉丛取血，分离血清，以葡萄糟氧化酶法测定血糖。 末次给药后1. 5h (禁食5h)，小鼠摘眼球取血，分离血清，以试剂盒方法测定血糖、TC、血清 胰岛素。分离小鼠胰腺，将胰腺浸泡在10%福尔马林中固定、石蜡包埋，制片，HE染色，作组 织病理学检查。血糖实验结果如图1所示，与正常组比较，模型组链脲佐菌素糖尿病小鼠血糖极 显著升高(P < 0. 01)。与模型组比较，CCE 100mg/kg和二甲双胍200mg/kg均可明显降低 第6天糖尿病小鼠血糖(P<0.05) ；CCE 50mg/kg剂量组明显降低第12天糖尿病小鼠的血 糖(P < 0. 05)，CCE 100mg/kg和二甲双胍200mg/kg剂量组均可极明显降低第12天糖尿病 小鼠的血糖(P < 0. 01)。TC实验结果如图2所示，与正常组相比，链脲佐菌素糖尿病小鼠的TC含量极明显 升高(P<0.01)。与模型组相比，CCE 50mg/kg和二甲双胍200mg/kg剂量组均明显地降低 糖尿病小鼠的血清TC含量(P < 0. 05)，CCE 100mg/kg剂量组极明显地降低糖尿病小鼠的 血清TC含量(P < 0.01)。胰岛素的实验结果如图3所示，与正常组相比，模型组链脲佐菌素糖尿病小鼠的 血清胰岛素含量极明显降低(P<0.01)。与模型组相比，CCE100mg/kg剂量组和二甲双胍200mg/kg剂量组均明显地回升糖尿病小鼠低下的胰岛素含量(P < 0. 05)。链脲佐菌素糖尿病小鼠胰腺的组织病理学改变主要为内分泌部胰岛数量较正常 减少，体积缩小，存留的胰岛组织结构较正常松散，其内细胞体积增大，胞界欠清，部分小鼠 胰腺外分泌部腺泡细胞有空泡变。CCE 50、100mg/kg和二甲双胍200mg/kg能减轻胰岛的病 变，具体表现药物应用后胰岛数量增多、胰岛体积增大，每个胰岛内细胞数量有明显改善， 提示药物能改善链脲佐菌素所致的胰岛病变。3. 2风轮菜有效部位提取物(CCE)对a -葡萄糖苷酶的抑制作用以4-硝基酚-a-D-呋喃葡萄糖苷(PNP_G)为底物测定a-葡萄糖苷酶的活 性。将CCE (终浓度为10，30，60，90，120mg/L)或阿卡波糖(终浓度为100，300，600，900， 1200,1500mg/L)40u 1 与 a -葡萄糖苷酶(0. 35mg/ml) 30 yl 共同加 500 yl KH2P本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种防治糖尿病的风轮菜有效部位提取物，其特征在于：该有效部位提取物是以风轮菜为原料，经粉碎、提取、减压回收后得浓缩物，浓缩物经萃取后得乙酸乙酯提取物，再经大孔树脂柱进行柱层析而得到提取物粉末。
【技术特征摘要】
一种防治糖尿病的风轮菜有效部位提取物，其特征在于该有效部位提取物是以风轮菜为原料，经粉碎、提取、减压回收后得浓缩物，浓缩物经萃取后得乙酸乙酯提取物，再经大孔树脂柱进行柱层析而得到提取物粉末。2.权利要求1所述的风轮菜有效部位提取物的制备方法，其特征在于取干燥风轮菜， 粉碎，乙醇或甲醇或丙醇及它们的含水物回流提取，或浸渍提取，提取液减压浓缩，将浓缩 的提取物分散在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取3 4次，乙酸乙酯提取物用大孔树脂 柱进行柱层析，水洗脱杂质后，乙醇梯度洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩干燥，得提取物。3.根据权利要求2所述的风轮菜有效部位提取物的制备方法，其特征在于a)提取方法为回流、浸渍b)纯化的柱材料为大孔树脂，乙醇梯度洗脱范围为20 80%。4.权利要求1所述的风轮菜有效部位提取物，其特征在于该提取物主要由总黄酮和 萜类组成，黄酮的主要成分为香蜂草苷...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴斐华，梁敬钰，刘洋，任燕利，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。