知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用。本发明专利技术首次发现该化合物在体内外表现出了很好的抗糖尿病活性，有可能成为未来治疗糖尿病的有效药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于制药
，涉及知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用。
技术介绍
糖尿病，古称消渴症，即消瘦烦渴之意，现代医学发现它是一种常见的内分泌疾 病，是由于人体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的血中葡萄糖浓度升高，进而糖大量从尿 中排出，并出现多饮、多尿、多食、消瘦、头晕、乏力等症状。进一步发展则引起全身各种严重 的急、慢性并发症，威胁身体健康。糖尿病通常分为1型糖尿病和2型糖尿病两种。在糖尿病 患者中，II型糖尿病占了大多数。糖尿病患者如得不到很好地控制，进一步发展则引起全身 各种严重的急、慢性并发症，可导致眼、肾、神经、皮肤、血管和心脏等组织、器官的慢性并发 症，以致最终发生失明、下肢坏疽、尿毒症、脑中风或心肌梗死，严重威胁身体健康。 糖尿病是一种常见病，随着人们生活水平的提高，糖尿病的发病率在逐年增加。近 年来，我国糖尿病患病率显著升高，患者人数达9000多万。 糖尿病的治疗是一个漫长的过程，其治疗方法有很多种，包括糖尿病中医治疗，西 医治疗，胰岛素治疗等。目前国内常用的口服降糖药物分为促胰岛素分泌剂类、胰岛素增敏 剂、糖苷酶抑制剂和高糖损伤修复剂等，如格列本脲、二甲双胍类、阿卡波糖和羟苯磺酸 钙等。合成的各类型药物或疗效有限，或毒副作用明显，近年来，中药在糖尿病的临床治疗 中显示出很大优势。但现有中成药或大多有效成分不清，或作用机理不明了，急待开发出有 效成分明确、作用机理清楚、质量稳定可控的中药制剂。 中药知母清热泻火，生津润燥，主要具有抗菌、抗病毒、解热、降血糖等作用。到目 前为止，已有了知母皂苷BII、知母皂苷All I和芒果苷抗糖尿病方面的活性，对知母皂苷N的 活性报道较少，Yokosuka等在其文章 【Steroidal glycosides from the underground parts of Yucca glauca and their cytotoxic activities.Phytochemistry.2014 (101): 109-115】中报道了它对HL-60细胞和A549细胞毒作用；尚未见知母皂苷N治疗糖尿病方面的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用。经体内、外药 理试验，所得知母皂苷N具有多种不同途径的显著性降糖作用。 为达到上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案： 知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用。 所述的药物为能够提高高糖损伤细胞的细胞活力和NO分泌量的药物。 所述的药物为能够提高机体胰岛素的分泌能力的药物。所述的药物为能够提高机体葡萄糖消耗量，改善胰岛素抵抗作用的药物。所述的药物为能够抑制α-葡萄糖苷酶的活性的药物。 所述的药物包括知母皂苷N和药学上可接受的载体或者常规食用辅料。所述药物 剂型为口服剂型。 所述的知母皂苷N可以采用现有技术中已经公开的方法(例如，马百平，知母中的 两种新呋留皂苷，药学学报，2006,41(6):527-532)进行制备，也可以采用其他方法自行制 备。 本专利技术采用上述方法提取得到的知母皂苷N首先进行体内、体外药效实验:知母皂 苷N对高糖诱导的HUVEC损伤模型细胞活力和NO分泌量的影响实验，结果表明知母皂苷N对 高糖诱导的HUVEC损伤模型细胞活力有明显的增强作用，对NO分泌量有显著性的提高作用； 知母皂苷N对RIN细胞胰岛素分泌的影响实验，结果显示知母皂苷N能显著增加 RIN细胞胰岛 素的分泌能力，其作用与格列本脲相当；知母皂苷N对棕榈酸诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗 模型葡萄糖消耗量的影响实验，结果显示知母皂苷N能限制性地促进HepG2细胞对葡萄糖的 消耗量，具有改善胰岛素抵抗的作用;体外α-葡萄糖苷酶抑制实验，观察该化合物对α-葡萄 糖苷酶抑制率来得出其抑制效果，结果表明，知母皂苷N体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性作用 显著。体内试验:结果表明知母皂苷N对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠具有显著性降糖作用。 本专利技术的有益效果： 该专利技术首次发现该化合物在体内外表现出了很好的防治糖尿病活性，有可能成为 未来治疗糖尿病的有效药物。【附图说明】 图1为大鼠胰岛素 ELISA试剂盒标准曲线【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但不限制本专利技术。 实验材料[00211 细胞株:RIN-m5F大鼠胰岛瘤细胞(购自中国医学科学院基础医学研究所基础医学 细胞中心）；人脐静脉内皮细胞(HUVEC，来源ATCC); !fepG2人肝癌细胞(来源ATCC)。 试药:4-硝基酚-α-D吡喃葡萄糖苷(alfa aesar，批号：110906);α-葡萄糖苷酶（日 本TCI，批号：120527);阿卡波糖片（拜耳医药保健有限公司，批号：117893); 1640培养基 (Gibco，批号：1229728);高糖DMEM培养基(Gibco，批号：991030);格列本脲(天津太平洋制 药有限公司，批号：110706);大鼠胰岛素 ELISA试剂盒(Merckmili pore，批号：1311756);胰 蛋白酶(Amresco，批号：27250018) ;FBS(Thermo Fisher，批号：NVM0344);MTT(Ameresco,批 号：M21128) ;DMS0(Solarbio,批号：302A034);青霉素（Solarbio，批号：119A031);链霉素 (Solarbio，批号：423A054)Na 2HP〇4 · 12H20(南京化学试剂有限公司，批号：090902);KH2PCk (南京化学试剂有限公司，批号：090922 ); NaCl (南京化学试剂有限公司，批号： 09060310494) ;KC1(南京化学试剂有限公司，批号:060960239);阿卡波糖片(北京拜耳医药 保健有限公司，批号：117893);羟苯磺酸钙(利君制药有限公司，批号：1202023);盐酸二甲 双胍(京丰制药有限公司，批号：120915);知母(产地河北，购于中国中药材配送网，经鉴定 为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge ·的干燥根莖）；知母阜苷N(自制，纯度 为 95%)。仪器：HERA?Cell 1?50型细胞培养箱（Thermo Electron Corporation，USA) ;RT_ 6000型酶标仪（深圳雷杜生命科技有限公司）；超净工作台（苏州艾可林净化设备有限公 司）；⑶IC XDS-IB型倒置光学显微镜(重庆光电仪器有限公司）；BS124S型万分之一电子天 平（Sartorius，USA); YXQ · SG41 · 280型高压灭菌锅(上海华线医用核子仪器有限公司）； 79-1型磁力搅拌器(深圳国华仪器有限公司）；0412-1型离心机(上海医疗器械有限公司）； 微量移液器(Thermo Electron Corporation，USA);96孔细胞培养板(Caster公司）。 知母皂苷N的制备过程： 取知母药材2.0千克，以20升90% (v/v)乙醇回流提取三次，每次回流2小时，过滤， 合并滤液。回收乙醇，减压浓缩至5L，再加水15L稀释浓缩液，至体积浓度为0.1 g生药/mL，溶 液进行过滤，滤液本文档来自技高网...

【技术保护点】
知母皂苷N在制备防治糖尿病药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨小林，吴皓，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32