一种用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及病毒检测技术领域，具体涉及一种用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒。该试剂盒包括试剂A，试剂A包括试剂A1、试剂A2、试剂A3，试剂A1为正向引物试剂，试剂A2为反向引物试剂、试剂A3为探针试剂，所述试剂A1、A2、A3单独储存或者混合储存，其中，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，探针序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；试剂B：试剂B为PCR预混液，其内含有UNG酶、dATP、dCTP、dGTP、dUTP、DNA聚合酶。该试剂盒特异性强且不容易出现假阳性，其灵敏度能达到现有试剂盒的10倍，对于苗种的筛选和ISKNV的监测与流行病学的调查具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒检测，具体涉及一种用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒。

技术介绍

1、传染性脾肾坏死病毒(infection spleen and kidney necrosis virus,isknv)俗称鳜爆发性传染病，是以脾、肾坏死为主要病理特征的一种病毒性疾病，可引起淡水养殖鳜爆发性死亡，严重危害我国鳜养殖业发展。传染性脾肾坏死病毒在海洋和淡水养殖鱼类中流行广泛，其中，它对鳜鱼造成的死亡率接近100％，已成为制约鱼类养殖业持续发展的重要因素之一。为了更好地防止疾病爆发，在加强研究安全、方便、特效且适用于渔业生产的疫苗的同时还应加强对传染性脾肾坏死病毒疾病检测，预防病毒的传播和流行，尤其是对苗种的检测，保证苗种不携带病毒对于减少该病毒的发生具有重要意义。

2、我国目前尚无isknv诊断的国家标准，一般进行isknv诊断的方法主要包括病理切片诊断、ifat检测、pcr检测以及病理分离检测。但是这些方法普遍具有滞后性，pcr检测相对其它几种检测方法相对较为灵敏，但是由于pcr检测过程中无法进行封闭，易造成检测室的核酸气溶胶污染，容易出现假阳本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，包括

2.根据权利要求1所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，试剂B由UNG酶、dATP、dCTP、dGTP、dUTP、dTTP、DNA聚合酶、Tris-HCI、KC1、DTT、吐温-20、甘油和纯水制备而成。

3.根据权利要求1所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，探针序列的5’端标记有荧光染料，3’端标记有淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，所述荧光染料包括但不限于FAM，淬灭基团包括但不限于BHQ2。

...

【技术特征摘要】

1.一种用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，包括

2.根据权利要求1所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，试剂b由ung酶、datp、dctp、dgtp、dutp、dttp、dna聚合酶、tris-hci、kc1、dtt、吐温-20、甘油和纯水制备而成。

3.根据权利要求1所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，探针序列的5’端标记有荧光染料，3’端标记有淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，所述荧光染料包括但不限于fam，淬灭基团包括但不限于bhq2。

5.根据权利要求1所述的用于传染性脾肾坏死病毒检测的试剂盒，其特征在于，q-pcr时，正向引物、反向引物的终浓度为0.2-1.0μmol/l，探针的终浓度为0.1-1.0μmol/l，ung酶的酶活为0.5-1.5u，datp的终浓度为150-250μm，dctp的终浓度为150-250μm，dgtp的终浓度为150-250μm，d...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘梦梅，蔡亮亮，余勇，张奇，吴勤超，
申请(专利权)人：武汉华扬天乐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载 我是这个专利的主人