一种可诱导小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法和应用技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种可诱导小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法和应用。公开了了一种可诱导小胶质细胞缺陷小鼠模型的构建方法，利用筛选到的高活性gRNA靶位点，基于CRISPR/Cas9系统介导的同源重组构建Tmem119‑DTR小鼠模型；发明专利技术人对该模型小胶质细胞tdTomato荧光表达，白喉毒素对小胶质细胞的可诱导性杀伤进而造成的小胶质细胞缺陷进行了验证，该模型可以应用于特定生理、病理条件下的小胶质细胞功能研究等领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种可诱导小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法和应用。

技术介绍

1、糖小胶质细胞，又称微膠細胞，是一种存在于大脑、脊髓和眼睛等中枢神经系统中的神经胶质细胞，约占脑细胞总数的10-15％。作为神经系统中的特殊巨噬细胞，小胶质细胞在脑内起吞噬和分泌等功能，是中枢神经系统最主要的免疫屏障。正常生理情况下，小胶质细胞呈静息态分枝结构，当脑内发生神经系统疾病或受到损伤、感染或出现炎症时，小胶质细胞被激活，胞体体积增大，形态呈阿米巴状态，实行吞噬功能。小胶质细胞的异常增殖和激活与多种中枢神经系统疾病密切相关，如帕金森病、阿尔茨海默病、孤独症等的致病风险基因均由小胶质细胞表达。

2、在体内对目标细胞进行特异性剔除，是研究该细胞的功能及机制作用的重要有效方法。为了更好的研究小胶质细胞在中枢神经系统中的重要作用，研究人员开发了多种研究小胶质细胞的小鼠模型，包括利用药物干预的方式引起小胶质细胞死亡/抑制增殖，如细胞集落刺激因子1受体(csf1r)抑制剂plx3397及atp竞争性csf1r抑制剂gw2580,可在给药干预后一定窗口时间内有本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种构建可诱导性小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法具体包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种构建可诱导性小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述引物对包括重组左臂的鉴定引物对：引物P1，其序列如SEQ ID NO:8所示，和引物P2，其序列如SEQ ID NO:9所示；以及重组右臂的鉴定引物对：引物P3，其序列如SEQ IDNO:10所示，和引物P4，其序列如SEQ ID NO:11所示。

3.如权利要求1-2任一项所述的可诱导性小胶质细胞剔除小鼠模型在评价小胶质细胞功能中的应用。

4.如权利要求1-2任一项所...

【技术特征摘要】

1.一种构建可诱导性小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法具体包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种构建可诱导性小胶质细胞剔除小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述引物对包括重组左臂的鉴定引物对：引物p1，其序列如seq id no:8所示，和引物p2，其序列如seq id no:9所示；以及重组右臂的...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈如凌，郭洋，范春，
申请(专利权)人：上海实验动物研究中心，
类型：发明
国别省市：