【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物应用，具体涉及一种复合乳酸菌青贮添加剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、苜蓿作为一种多年生的豆科牧草，适应性强，产量高，蛋白质含量丰富，具有大量的维生素和多种矿物质成分，而且适口性较好，是畜牧业发展过程中不可缺少、不可替代的优质牧草。苜蓿青贮起源于18世纪，目前在国外，很多国家都以40%的苜蓿调制干草，60%的苜蓿以青贮的方式收获保存。国内来讲，长期以来苜蓿的利用方式主要以晒制青干草为主，随着畜牧业的发展和农业结构的调整，苜蓿种植面积逐年扩大，作为苜蓿收储加工的重要方式，青贮技术已经完善，并且得到了很大程度的推广，让优质牧草资源得到了有效利用。
2、苜蓿青贮是指将含水率为60%~65%的青绿苜蓿经粉碎后，在密闭缺氧的条件下，使苜蓿草上附着的乳酸菌产生发酵作用得到的一种粗饲料。如果在收获作物后粉碎直接压实密封进行青贮，不添加任何菌剂，会导致青贮发酵进程缓慢，而且青贮产物纤维素含量过高，操作不当容易造成氧气残留导致青贮饲料发生霉变。因为苜蓿本身含水量和粗蛋白含量高、含糖较少、具有较高的缓冲能等特点，很难实现青贮。因此，在青贮苜蓿时，往往额外加入乳酸菌菌种，可以促进乳酸菌尽快繁衍，改善青贮饲料品质。但是，目前市面上的青贮添加剂多由单一菌种制成，对发酵过程的促进效果不显著，生长条件苛刻，稳定性较差，最终得到的青贮产物纤维素含量过高。
技术实现思路
1、针对现有的苜蓿青贮添加菌剂菌种单一导致发酵过程缓慢、青贮产物纤维素含量过高的问题，本专利技术提供一种复合乳
2、第一方面，本专利技术提供一种复合乳酸菌青贮添加剂，包括1重量份植物乳杆菌（ lactobacillus plantarum）jylp-376菌粉、0.5~2重量份副干酪乳杆菌（ lactiparacaseibacillus paracasei）jlpf-176菌粉、0.5~2重量份布氏乳杆菌（ lactobacillus buchneri）jyle-202菌粉、0.5~2重量份凝结芽孢杆菌（ bacillus coagulans）bcn019菌粉；植物乳杆菌jylp-376的保藏日期为2019年7月8日，保藏编号为cgmcc no.18099；副干酪乳杆菌jlpf-176的保藏日期为2019年6月27日，保藏编号为cgmccno.18043；布氏乳杆菌jyle-202的保藏日期为2023年4月27日，保藏编号为cgmccno.27224；凝结芽孢杆菌bcn019的保藏日期为2021年6月23日，保藏编号为cgmccno.22764。
3、进一步的，包括1重量份植物乳杆菌jylp-376菌粉、1重量份副干酪乳杆菌jlpf-176菌粉、1重量份布氏乳杆菌jyle-202菌粉、1重量份凝结芽孢杆菌bcn019菌粉。
4、进一步的，复合乳酸菌青贮添加剂还包括脱脂奶粉。
5、进一步的，复合乳酸菌青贮添加剂中的菌体数量为1.0×1010~2.0×1010cfu/g。
6、第二方面，本专利技术提供一种上述复合乳酸菌青贮添加剂的制备方法，包括：
7、（1）制备mrs液体培养基和mrs平板培养基；
8、（2）分别在mrs平板培养基上活化植物乳杆菌jylp-376、副干酪乳杆菌jlpf-176、布氏乳杆菌jyle-202和凝结芽孢杆菌bcn019，挑取活化后的单菌落接种到mrs液体培养基中，培养分别获得植物乳杆菌jylp-376菌液、副干酪乳杆菌jlpf-176菌液、布氏乳杆菌jyle-202菌液和凝结芽孢杆菌bcn019菌液；
9、（3）分别将上述菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度，冷冻干燥后得到植物乳杆菌jylp-376菌粉、副干酪乳杆菌jlpf-176菌粉、布氏乳杆菌jyle-202菌粉和凝结芽孢杆菌bcn019菌粉；
10、（4）将上述菌粉按比例进行混合，制成复合乳酸菌青贮添加剂。
11、进一步的，步骤（2）中，培养温度为37℃，培养时间为24h。
12、进一步的，步骤（3）中，调整悬浊液的浓度为1.0×1010~2.0×1010cfu/ml。
13、第三方面，本专利技术提供还一种上述复合乳酸菌青贮添加剂在苜蓿青贮方面的应用。
14、进一步的，使用方法为：取复合乳酸菌青贮添加剂按照106cfu/ml加水制成菌液，以20ml/kg的量均匀喷洒在苜蓿秸秆碎料上，然后将苜蓿秸秆碎料装入青贮发酵袋中，真空处理后立即密封常温发酵。
15、本专利技术的有益效果在于：
16、1、本专利技术提供的复合乳酸菌青贮添加剂中，植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌、副干酪乳杆菌均属于同型发酵乳酸菌，能够产生乳酸，降低青贮饲料的ph值，但是在有氧暴露阶段乳酸容易被酵母等有害微生物利用，存在有氧腐败的可能性；而布氏乳杆菌属于异型发酵乳酸菌，可以利用乳酸产生乙酸，抑制酵母等有氧菌的繁殖，增加有氧稳定性。
17、2、本专利技术提供的复合乳酸菌青贮添加剂中，各复配菌种高度协同，能够显著提高苜蓿青贮的乳酸、乙酸含量，增加乳酸菌数量，同时抑制霉菌、酵母菌和大肠杆菌的繁殖。此外，使用该复合乳酸菌青贮添加剂，能够减少苜蓿青贮饲料中的纤维素含量，同时减少干物质损失，保留更多的营养物质，增加适口性，提高苜蓿青贮饲料的品质。
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1. 一种复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，包括1重量份植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）JYLP-376菌粉、0.5~2重量份副干酪乳杆菌（Lactiparacaseibacillus paracasei）JLPF-176菌粉、0.5~2重量份布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）JYLE-202菌粉、0.5~2重量份凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）BCN019菌粉；植物乳杆菌JYLP-376的保藏日期为2019年7月8日，保藏编号为CGMCC No.18099；副干酪乳杆菌JLPF-176的保藏日期为2019年6月27日，保藏编号为CGMCCNo.18043；布氏乳杆菌JYLE-202的保藏日期为2023年4月27日，保藏编号为CGMCCNo.27224；凝结芽孢杆菌BCN019的保藏日期为2021年6月23日，保藏编号为CGMCCNo.22764。
2.如权利要求1所述的复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，包括1重量份植物乳杆菌JYLP-376菌粉、1重量份副干酪乳杆菌JLPF-176菌粉、1重量份
3.如权利要求1或2所述的复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，还包括脱脂奶粉。
4.如权利要求1所述的复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，复合乳酸菌青贮添加剂中的菌体数量为1.0×1010~2.0×1010cfu/g。
5.一种如权利要求1所述的复合乳酸菌青贮添加剂的制备方法，其特征在于，包括：
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，培养温度为37℃，培养时间为24h。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，调整悬浊液的浓度为1.0×1010~2.0×1010cfu/mL。
8.一种如权利要求1所述复合乳酸菌青贮添加剂在苜蓿青贮方面的应用。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，使用方法为：取复合乳酸菌青贮添加剂按照106cfu/mL加水制成菌液，以20mL/kg的量均匀喷洒在苜蓿秸秆碎料上，然后将苜蓿秸秆碎料装入青贮发酵袋中，真空处理后立即密封常温发酵。
...【技术特征摘要】
1. 一种复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，包括1重量份植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）jylp-376菌粉、0.5~2重量份副干酪乳杆菌（lactiparacaseibacillus paracasei）jlpf-176菌粉、0.5~2重量份布氏乳杆菌（lactobacillus buchneri）jyle-202菌粉、0.5~2重量份凝结芽孢杆菌（bacillus coagulans）bcn019菌粉；植物乳杆菌jylp-376的保藏日期为2019年7月8日，保藏编号为cgmcc no.18099；副干酪乳杆菌jlpf-176的保藏日期为2019年6月27日，保藏编号为cgmccno.18043；布氏乳杆菌jyle-202的保藏日期为2023年4月27日，保藏编号为cgmccno.27224；凝结芽孢杆菌bcn019的保藏日期为2021年6月23日，保藏编号为cgmccno.22764。
2.如权利要求1所述的复合乳酸菌青贮添加剂，其特征在于，包括1重量份植物乳杆菌jylp-376菌粉、1重量份副干酪乳杆菌jlpf-17...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘玉林，田华，张永娟，王丽媛，司书锋，曹维超，
申请(专利权)人：山东中科嘉亿生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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