一种蛋白A亲和层析纯化抗体的方法技术

本发明专利技术提供一种蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，其包括如下步骤：取平衡缓冲液，对蛋白A亲和层析柱进行平衡；取待纯化抗体溶液，向得到的平衡后的蛋白A亲和层析柱进行上样；取洗涤液，对蛋白A亲和层析柱进行洗涤；取洗脱液，对蛋白A亲和层析柱进行洗脱，收集流出液得到纯化后的抗体。本发明专利技术所述的蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，纯化后的抗体纯度较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，特别是指一种蛋白a亲和层析纯化抗体的方法。

技术介绍

1、金黄色葡萄球菌蛋白a(staphylococcal protein a，简称蛋白a)是细菌蛋白的一种，对抗体具有高亲和力，因此，常被用于检测和纯化抗体。蛋白a作为配体，可与不同物种或不同亲和力的抗体结合，其含有5个同源免疫球蛋白结合域，可以与抗体的fc段特异性结合，也可结合抗体重链可变区的cdr2与cdr3之间，对大部分igg都具有较高的亲和力。通常情况下，在以蛋白a作为配体的亲和层析介质上，一个蛋白a分子可以同时结合至少2个igg分子，其结合域可用来捕捉和结合igg。虽然，蛋白a与igg的亲和力强，但是其也较易与一些非目的蛋白结合，最终导致蛋白的纯度下降，在纯化抗体时，如何更大程度地提高抗体纯度，是本领域的研发热点之一。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，以解决现有技术中的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法易于与非目的蛋白结合、抗体纯度较低的问题。

2、为解决上述技术问题，本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述平衡缓冲液包括：浓度为10-20mmol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠，浓度为50-100mmol/L的氯化钠；所述平衡缓冲液的pH值为7.0-7.4。

3.根据权利要求1所述的蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述平衡缓冲液的用量为3-5个柱体积，流速为200-250cm/h。

4.根据权利要求1所述的蛋白A亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述上样的流速为200-2...

【技术特征摘要】

1.一种蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述平衡缓冲液包括：浓度为10-20mmol/l的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠，浓度为50-100mmol/l的氯化钠；所述平衡缓冲液的ph值为7.0-7.4。

3.根据权利要求1所述的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述平衡缓冲液的用量为3-5个柱体积，流速为200-250cm/h。

4.根据权利要求1所述的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述上样的流速为200-250cm/h，层析柱载量小于或者等于25mg/ml填料。

5.根据权利要求1所述的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述待纯化抗体溶液中加入硫酸皮肤素。

6.根据权利要求5所述的蛋白a亲和层析纯化抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述硫酸皮肤素在所述待纯化抗体溶液中...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴学星，高飞，秦佳，王佳琛，周延慧，
申请(专利权)人：武汉博进生物新材料有限公司，
类型：发明
国别省市：