用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质及制备方法技术

本发明专利技术提供用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质及其制备方法，所述用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，以改性的二氧化硅微球为基质，以肝素衍生物为配体；所述改性的二氧化硅微球经过环氧氯丙烷活化、N,N‑二(3‑氨丙基)乙基乙胺胺化后，与所述肝素衍生物偶联；其中，所述改性的二氧化硅微球为附着有壳聚糖和/或葡聚糖的中空介孔二氧化硅微球；所述肝素衍生物为甲基丙烯酰化肝素。本发明专利技术所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，可提高配体肝素衍生物的密度，在肝素中引入甲基丙烯酰基，可增强对间充质干细胞分泌因子的选择性和亲和性，且在相对温和的洗脱条件下即可充分洗脱，提高了间充质干细胞分泌因子的回收率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，特别是指用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质。

技术介绍

1、间充质干细胞(msc，mesenchymal stem cells)，属于多能干细胞，来源于发育早期的中胚层，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。目前，对于间充质干细胞分泌因子的纯化可采用肝素层析介质，肝素配体虽然对于宽范围的生物分子均能产生特异性吸附，但是，其对于成分复杂的间充质干细胞分泌因子的回收率并不高，这是由于为兼顾间充质干细胞分泌因子中的多种类目标蛋白的回收，在洗脱时通常ph值、离子浓度变化较大，会使目标蛋白的稳定性变差，甚至变性，进而导致回收率较低，回收的目标蛋白的生物活性也破坏，活性回收率较低。而在温和的洗脱条件下，部分目标蛋白难以被洗脱，导致目标蛋白的流失，同样导致回收率较低。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，以解决现有技术中的层析介质纯化间充质干细胞分泌因子的回收率低、活性回收率低的问题。

<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，

2.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述肝素衍生物为平均分子量为2.5-3.0kD的甲基丙烯酰化肝素。

3.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述中空介孔二氧化硅微球的粒径为40-60μm，孔道的平均孔径为40-50nm。

4.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述中空介孔二氧化硅微球与所述壳聚糖和/或葡聚糖的质量比为100：(60-80)。

5.根据权利要求1所述的用...

【技术特征摘要】

1.用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，

2.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述肝素衍生物为平均分子量为2.5-3.0kd的甲基丙烯酰化肝素。

3.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述中空介孔二氧化硅微球的粒径为40-60μm，孔道的平均孔径为40-50nm。

4.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述中空介孔二氧化硅微球与所述壳聚糖和/或葡聚糖的质量比为100：(60-80)。

5.根据权利要求1所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质，其特征在于，所述改性的二氧化硅微球与所述肝素衍生物的质量比为100：(40-50)。

6.用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

7.根据权利要求6所述的用于纯化间充质干细胞分泌因子的层析介质的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述改性的二氧化硅微球通过如下方法得到：将中空介孔二氧化硅微球、壳聚糖和/或葡聚糖置于浓度为0.5-0.8mol/l的氢氧...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈嘉琛，罗发锐，毛昊霆，李朝东，高飞，
申请(专利权)人：武汉博进生物新材料有限公司，
类型：发明
国别省市：