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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17及其制备方法和应用,属于蛋白表达。
技术介绍
1、胶原蛋白(collagen)是哺乳动物体内含量最多的一类蛋白质,其广泛分布在动物的皮肤、骨骼、肌腱、韧带和血管之中。人体中胶原蛋白含量占总蛋白的25%~30%,是一种重要的结构蛋白,起着保护机体、支撑器官的重要作用。
2、人xvii型胶原蛋白是一种跨膜型非成纤维胶原蛋白,其为三条相同α1(xvii)链构成的均相三聚体,单链分子量为180kda。xvii型胶原蛋白分为胞内、跨膜、胞外三大类结构域,又可根据是否具有典型的(gly-x-y)n氨基酸重复序列及能否形成三螺旋区域分为16个非三螺旋区和15个三螺旋区,这些胶原域和非胶原域共同参与执行了与细胞外基质间的相互作用。人xvii型胶原蛋白是细胞中半桥粒的一种组成成分,在上皮细胞-基底膜的作用中发挥重要作用,可调控上皮细胞的黏附、分离和发育分化,对角化细胞的分化和再生有重要作用。
3、然而,人xvii胶原蛋白在人体及动物体内中含量极少,提取难度非常大,无法依靠传统的酸、碱、酶解法处理动物组织获得,少量的提取只能满足科研需求,无法量产,没有大量应用的可能性,同时不可避免的存在免疫原性和潜在的病毒、疫病等生物安全性隐患。由于这些阻碍,目前人类对于非纤维类胶原蛋白的结构功能认识非常有限,尤其是对于xvii型胶原蛋白知之甚少。
4、现在解决此类问题的主要方式则是通过基因工程等生物技术来获得重组胶原蛋白,基于人体皮肤xvii胶原蛋白的原始基因序列,优化选择其中
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17,可原核表达,水溶性好,生物活性高。
2、本专利技术采用的技术方案:
3、一种重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17,其序列如seq id no.2、seq id no.6或seq idno.7所示。
4、上述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的编码基因。
5、优选的,其序列如seq id no.8、seq id no.12或seq id no.13所示。
6、上述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的表达载体。
7、根据权利要求4所述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的表达载体,其特征在于所述载体为pet30a。
8、上述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的表达宿主菌。
9、优选的,所述宿主菌为大肠杆菌细胞bl21。
10、上述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的制备方法,其步骤包括:
11、(1)构建前述的表达载体,将其转化到表达宿主菌中;
12、(2)培养表达宿主菌,诱导重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17表达;
13、(3)纯化表达产物,得到重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17。
14、本专利技术还公开了上述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17在辅助细胞培养中的应用。
15、本专利技术的有益效果:
16、本专利技术的重组xⅶ型胶原蛋白pro.c17,具有良好的生物活性,其生物活性接近人体xⅶ型胶原蛋白。本专利技术所制备的重组xⅶ型人源化胶原蛋白pro.c17的氨基酸序列源自天然胶原蛋白氨基酸序列,可以与其余蛋白复配成为组织工程产品、化妆品、保健品或药物的原材料。且可用原核系统来进行表达,表达体系简单,成本低,产量高。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17,其特征在于其序列如SEQ ID No.2、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。
2.权利要求1所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因,其特征在于其序列如SEQ ID No.8、SEQ ID No.12或SEQ ID No.13所示。
4.权利要求1所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的表达载体,其特征在于所述载体为pET30a。
6.权利要求1所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的表达宿主菌。
7.根据权利要求6所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的表达宿主菌,其特征在于所述宿主菌为大肠杆菌细胞BL21。
8.权利要求1所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17的制备方法,其特征在于其步骤包括:
9.权利要求1所述的重组ⅩⅦ型胶原蛋白Pro.C17在辅助细胞培养中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17,其特征在于其序列如seq id no.2、seq id no.6或seq id no.7所示。
2.权利要求1所述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因,其特征在于其序列如seq id no.8、seq id no.12或seq id no.13所示。
4.权利要求1所述的重组ⅹⅶ型胶原蛋白pro.c17的表达载体。
5.根据权利要求4所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:田江杰,余冬飞,谢丽晶,
申请(专利权)人:广州普言生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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