【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及兽用生物制品，尤其涉及一株猪轮状病毒毒株及其应用。
技术介绍
1、猪轮状病毒 (porcine rotavirus, porv)可以感染各种年龄段的猪，哺乳仔猪和断奶仔猪最易感，感染率达90%-100%，引起仔猪腹泻和胃肠炎，临床表现为水样腹泻，精神不振，食欲减退等。由于感染porv的仔猪抵抗力急剧下降，常继发细菌和其它腹泻类病毒的混合感染，直接或间接影响猪群生产力，给养猪业造成严重的经济损失。
2、轮状病毒（rotavirus, rv）属于呼肠孤病毒科（reoviridae）轮状病毒属（rotavirus），是无囊膜双链 rna 病毒。猪轮状病毒(porcine rotavirus, porv)目前被分为四种血清型（a、b、c、e)，其中a群轮状病毒（group a rotavirus , rva）流行范围最广，是引起仔猪急性腹泻的主要原因之一。rva 的基因组是分节段的双股 rna，其基因组由 11个节段构成，分别编码 6 个结构蛋白（vp1~vp4, vp6, vp7）和 6 个非结构蛋白（nsp1~nsp6）。vp7 和 vp4 是 rva 重要的两个结构蛋白，是结合宿主细胞受体的病毒蛋白，决定病毒的毒力，也是诱导机体产生中和抗体的主要蛋白。vp7蛋白由 326 个氨基酸组成，分子量为37kda，决定 rva 的 g 型。vp4蛋白由轮状病毒基因片段 4 编码，共编码 775 个氨基酸，相对分子质量约为 87.6kda，它也决定了该病毒的p型。g 型与 p 型之间会产生不同的组合。迄今为止，己经
3、针对猪轮状病毒并没有切实有效的治疗方案，接种疫苗是预防控制rva感染的有效手段。因此，针对不同基因型毒株开发高效的灭活疫苗，对预防和治疗猪轮状病毒所致疾病，为防控猪轮状病毒疫情的暴发和流行具有重大意义。
技术实现思路
1、第一方面，本专利技术提供了一株猪轮状病毒毒株，其为猪轮状病毒porv/jl/2021052，其保藏号为cgmcc no.45764。
2、该毒株为猪轮状病毒流行株，能够在贴壁ma104细胞中稳定传代，且致病性强，免疫原性好，能够诱导机体产生高滴度且维持时间长的中和抗体，为有效的疫苗制备和猪轮状病毒疫情的防控提供了基础。
3、目前已经报道的用于制备疫苗的猪轮状病毒毒株主要为g9基因型，本专利技术提供的该毒株为g3p23基因型，基于该毒株制备的疫苗或其它检测试剂或试剂盒等产品能够针对g3p23基因型猪轮状病毒毒株，实现特异性地诊断、预防和治疗作用。
4、该毒株已于2023年12月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；邮政编码：100101，分类命名：猪轮状病毒porcine rotavirus，保藏编号为cgmcc no.45764。
5、本专利技术的猪轮状病毒毒株分离自吉林猪轮状病毒阳性猪的肠组织。
6、在蚀斑克隆纯化过程中，本专利技术筛选了大量的蚀斑样进行传代，同时在传代过程中对不同毒株感染细胞的病变程度进行观察，结果发现一部分毒株无法进行长期的传代，其传代稳定性较差，另一部分毒株感染细胞的病变程度较差，其毒力较弱。经过大量筛选以及免疫试验验证，最终获得了本专利技术致病性强，免疫原性好的保藏毒株porv/jl/2021052。
7、第二方面，本专利技术提供了上述猪轮状病毒毒株在药物或试剂制备中的应用，所述药物或试剂用于治疗、预防或诊断猪轮状病毒所致疾病。
8、第三方面，本专利技术提供了一种检测试剂或试剂盒，其中含有所述猪轮状病毒毒株。
9、所述检测试剂或试剂盒用于治疗、预防或诊断猪轮状病毒所致疾病。
10、第四方面，本专利技术提供了一种疫苗，其中含有所述猪轮状病毒或其培养物。
11、作为本专利技术的一种优选的实施方案，所述疫苗为灭活疫苗。
12、作为本专利技术的一种优选的实施方案，所述疫苗为兽用疫苗。
13、作为本专利技术的一种优选的实施方案，制备所述疫苗的猪轮状病毒或其培养物中的病毒含量为108.0tcid50/ml以上。
14、作为本专利技术的一种优选的实施方案，接种所述疫苗后，血清中和抗体效价水平不低于1:360。
15、作为本专利技术的一种优选的实施方案，所述疫苗中还包括佐剂。
16、第五方面，本专利技术提供了上述任一实施方案中疫苗的制备方法，包括：
17、将所述猪轮状病毒毒株接种于细胞中进行培养，制得病毒液培养物；再将所述病毒液培养物灭活后与佐剂混合。
18、优选地，采用ma104细胞进行病毒培养。
19、本专利技术还进一步发现，选择ma104细胞培养所述毒株制得的病毒液的病毒含量较高。
20、优选地，培养至细胞病变达80%以上时，收获病毒液培养物。
21、优选地，灭活采用β-丙内酯，更优选0.25‰的β-丙内酯。
22、优选地，灭活的步骤包括：
23、将所述病毒液培养物与β-丙内酯混合后，在80~100r/min、0~8℃条件下灭活。
24、优选地，灭活24h以上。
25、优选地，灭活的病毒液与佐剂按照重量比1：0.5~1.5混合，在30~33℃下乳化后制得。
26、优选地，乳化的时间为30min以上。
27、第六方面，本专利技术提供了上述任一实施方案中的疫苗或疫苗的制备方法在制备药物或试剂中的应用；所述药物或试剂用于治疗、预防或诊断猪轮状病毒所致疾病。
28、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
29、本专利技术提供了一株传代稳定性好，致病性强，免疫原性好，且能够诱导机体产生高滴度中和抗体且维持时间长的猪轮状病毒毒株，将其制备成疫苗后能够特异性的预防或治疗猪轮状病毒所致疾病，为牧区猪轮状病毒感染的防控和治疗提供重要的医用价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株猪轮状病毒毒株，其特征在于，其为猪轮状病毒PORV/JL/2021052，其保藏号为CGMCC No.45764。
2.权利要求1所述的猪轮状病毒毒株在药物或试剂制备中的应用，所述药物或试剂用于治疗、预防或诊断猪轮状病毒所致疾病。
3.一种检测试剂或试剂盒，其特征在于，其中含有权利要求1所述的猪轮状病毒毒株。
4.一种疫苗，其特征在于，其中含有权利要求1所述的猪轮状病毒或其培养物。
5.根据权利要求4所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗为灭活疫苗。
6.根据权利要求4或5所述的疫苗，其特征在于，制备所述疫苗的猪轮状病毒或其培养物中的病毒含量为108.0TCID50/mL以上。
7.根据权利要求6所述的疫苗，其特征在于，接种所述疫苗后，血清中和抗体效价水平不低于1:360。
8.根据权利要求4所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗中还包括佐剂。
9.权利要求8所述疫苗的制备方法，其特征在于，包括：
10.权利要求4~8中任一项所述的疫苗、或权利要求9所述的疫苗的制备方法在制备药
...【技术特征摘要】
1.一株猪轮状病毒毒株，其特征在于，其为猪轮状病毒porv/jl/2021052，其保藏号为cgmcc no.45764。
2.权利要求1所述的猪轮状病毒毒株在药物或试剂制备中的应用，所述药物或试剂用于治疗、预防或诊断猪轮状病毒所致疾病。
3.一种检测试剂或试剂盒，其特征在于，其中含有权利要求1所述的猪轮状病毒毒株。
4.一种疫苗，其特征在于，其中含有权利要求1所述的猪轮状病毒或其培养物。
5.根据权利要求4所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗为灭活疫苗。
6.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉梅，张彦婷，张鸣华，刘东霞，陈学飞，杨晓婷，范文霞，关平原，
申请(专利权)人：金宇保灵生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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